尿液POU4F2基因甲基化对膀胱尿路上皮癌早期诊断的意义

目的寻找在中国人群中具有高敏感性、高特异性的膀胱癌甲基化标志物,以应用于膀胱癌的尿液诊断。方法先用T24细胞系筛选8种文献报道的膀胱癌甲基化标志物,再利用甲基化特异性荧光定量PCR(q MSP)技术分别在28例膀胱癌患者、10例尿路结石伴感染患者和30例健康志愿者尿液样品中检测筛选成功的4种甲基化标志物,计算出不同组合的敏感性和特异性。结果PCDH17、POU4F2、TCF21、ZNF154的敏感性分别为46.43%、92.86%、39.29%、46.43%,特异性分别为95.00%、97.50%、97.50%、100.00%,最优的诊断标志物为POU4F2(敏感性92.86%、特异性97.50%)。结论应用q MSP技术,以POU4F2为甲基化标志物在尿液中检测膀胱癌可能会成为一种临床可用的诊断方式。

甲状腺乳头状癌中TSHR与NIS基因启动子区甲基化状态与侵袭性相关性研究

目的本研究分析甲状腺乳头状癌中促甲状腺素受体与钠碘转运体基因启动子区甲基化状况,探讨甲状腺功能基因甲基化与甲状腺乳头状癌病理侵袭性之间相关性。方法采用甲基化荧光实时特异聚合酶链反应甲状腺乳头状癌中TSHR与NIS基因启动区异常甲基化情况,探讨该区甲基化与病理参数之间的关系,以及两基因甲基化之间相关情况。结果甲状腺癌中NIS与TSHR基因甲基化均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。TSHR启动区域5’-Cp G岛甲基化分别与病灶多少、颈淋巴结转移及局部侵犯有关(P<0.05),NIS基因启动子区域5’-Cp G岛甲基化分别与患者年龄、多病灶、颈淋巴结转移及病理分期有关(P<0.05),两基因甲基化相关性分析:1TSHR启动子甲基化发生显著高于NIS;2TSHR与NIS基因的启动子区甲基化有关系。结论乳头状甲状腺癌的功能基因TSHR与NIS基因启动区甲基化是常见现象,可能在甲状腺癌的发生发展过程中发挥重要作用,可能与肿瘤侵袭性相关。两组基因甲基化具一定相关性,联合两个基因启动子区域甲基化检测可能更有意义。

乳腺癌患者血清sCD146与组织MCAM基因甲基化状态和临床病理特征的关系

目的探讨乳腺癌患者血清可溶性CD146[又称为黑色素瘤细胞粘附分子(MCAM)](sCD146)水平与肿瘤组织MCAM基因甲基化状态及患者临床病理特征之间的关系。方法收集2019年5月至2020年5月在我院确诊并接受手术治疗的148例原发性乳腺癌患者的新鲜肿瘤组织和癌旁组织以及术前血液样本,另收集30例健康体检人群的血液样本作为正常对照组。采用甲基化定量PCR技术(qMSP)确定组织中MCAM基因甲基化程度,并采用ELISA法检测血清sCD146水平。用Pearson法分析乳腺癌患者两项指标之间的相关性。结果对于乳腺癌患者,血清sCD146水平高于正常对照组人群(P<0.05),且乳腺癌组织MCAM基因甲基化程度的中位数明显低于相应的癌旁组织(P<0.05)。血清sCD146水平与肿瘤组织中MCAM基因甲基化程度呈负相关性(r=-0.461,P<0.001)。此外,血清sCD146水平与肿瘤组织中MCAM基因甲基化程度与肿瘤T分期、分级、Ki-67表达及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达有关(P<0.05)。而且三阴性乳腺癌患者血清sCD146水平和组织MCAM基因低甲基化率最高,显著高于Luminal A型和Luminal B-HER2-型(P<0.05)。结论乳腺癌患者血清sCD146水平较健康对照人群普遍升高,以三阴性乳腺癌患者升高最明显,这可能与肿瘤组织中MCAM基因发生去甲基化有关;而且血清sCD146水平也随着肿瘤T分期和组织学分级增加而逐渐升高。

胃癌RUNX3基因甲基化及其蛋白表达临床意义的研究

目的:观察胃癌组织中RUNX3基因启动子区甲基化状态及其对蛋白表达的影响,并分析甲基化及蛋白表达与临床病理特征的关系。方法:采用甲基化特异性定量PCR检测胃癌组织及相应癌旁正常组织中RUNX3的甲基化状态。应用Western Blot法检测RUNX3蛋白表达情况。结果:162例胃癌组织及相应癌旁组织中RUNX3基因甲基化阳性率分别为77.8%(126/162)、38.9%(63/162)(P<0.001)。RUNX3蛋白表达下调/缺失率分别为81.5%(132/162)、12.3%(21/162)(P<0.001)。RUNX3基因甲基化阳性率与胃癌的临床分期、组织分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移具有相关性(P<0.05),RUNX3蛋白表达与胃癌的组织分化程度、淋巴结转移具有相关性(P<0.05)。结论:RUNX3甲基化及其蛋白表达与胃癌的发生发展关系密切,并且甲基化影响其蛋白表达。

甲状腺乳头状癌中TSHR基因启动子区5’-CpG岛甲基化研究

目的:探讨促甲状腺素受体(thyroid-stimulating hormone receptor,TSHR)基因启动子区5'-CpG岛甲基化在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用,加深对其癌变分子机制的了解。方法:应用实时荧光定量甲基化特异性聚合酶链反应(real-timefluorescent quantitative methylation-specific PCR,qMSP)分别检测90例甲状腺乳头状癌患者癌组织及癌旁正常组织中TSHR基因启动子区5'-CpG岛甲基化情况,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果:在90例甲状腺乳头状癌组织中,TSHR基因启动子区5'-CpG岛发生甲基化的有37例(41.1%,37/90),与之相对应的癌旁正常组织中发生甲基化的有5例(5.6%,5/90),2者差异有统计学意义(P<0.05)。TSHR基因启动子区5'-CpG岛甲基化分别与患者的肿瘤大小、病灶多少、局部侵犯、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄等无关(P>0.05)。结论:TSHR基因启动子区5'-CpG岛的甲基化是甲状腺乳头状癌频发的分子事件,这可能是导致甲状腺细胞摄碘率下降的重要原因之一,在甲状腺乳头状癌的发生发展过程中发挥着重要作用。