芪莲汤颗粒剂对实验性糖尿病肾病大鼠肾组织NF-κB及MCP-1表达的影响

目的观察芪莲汤颗粒剂对实验性糖尿病肾病大鼠(diabetic nephropathy,DN)肾组织内核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)表达的影响,探讨芪莲汤颗粒剂对糖尿病肾病大鼠保护作用的作用机制。方法 40只大鼠分为正常对照组、模型对照组、芪莲汤颗粒剂高剂量组、芪莲汤颗粒剂低剂量组。除正常组外其它组大鼠用腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ)联合高糖高脂饲料复制糖尿病肾病动物模型,用芪莲汤颗粒剂干预糖尿病肾病大鼠4个月。实验结束前用代谢笼收集大鼠12h尿液,测定尿蛋白含量;取动物血清测定血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatinine,Cr);取肾脏组织用Westernblot方法检测NF-κB、MCP-1及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehy de3phosphate dehydrogenase,GAPDH)的表达,用多媒体成像分析系统采集图像计算NF-κB、MCP-1与GAPDH的比值。结果模型对照组动物血糖、尿素氮、肌酐、尿蛋白含量较正常对照组高(P<0.01)。芪莲汤颗粒剂干预后各项指标都相应降低,给药组与模型对照组比较有差异(P<0.05或0.01)。模型对照组肾组织内NF-κB/GAPDH、MCP-1/GAPDH表达较正常对照组增高(P<0.01),芪莲汤干预后表达降低(P<0.05)。结论芪莲汤颗粒剂可以降低糖尿病肾病大鼠血糖、尿蛋白含量及血清尿素氮和肌酐,减轻糖尿病肾病大鼠的肾损害,该作用可能与下调NF-κB、MCP-1表达有关。

芪莲汤颗粒剂治疗糖尿病肾病大鼠及对肾组织Ⅳ型胶原蛋白表达的影响

目的探讨芪莲汤颗粒剂(QiLian soup-granula)对糖尿病肾病(diabetic dephropathy,DN)大鼠肾脏病变的保护作用及机制。方法采用高脂饲料联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ45 mg/kg)腹腔注射法建立DN大鼠模型,模型成功后分组给药。设正常对照组、模型对照组、消渴丸组、芪莲汤颗粒剂高剂量组、芪莲汤颗粒剂低剂量组。按试验设计剂量灌胃给药,1次/d,每周6d。连续给药4个月后检测空腹血糖、血肌酐、做糖耐量试验、尿素氮、尿肌酐、尿蛋白。取肾脏组织作病理、免疫组织化学法检测肾小球Ⅳ型胶原蛋白的表达。结果芪莲汤颗粒剂可以显著降低大鼠空腹血糖、尿素氮、血肌酐和尿蛋白。并能抑制DN大鼠肾组织Ⅳ型胶原蛋白表达。结论芪莲汤颗粒剂对DN大鼠具有很好的治疗作用,可以延缓DN病理进程。该作用可能与降血糖及降低胰岛素抵抗和抑制肾组织Ⅳ型胶原表达有关。

芪莲汤颗粒剂对糖尿病肾病大鼠体内IL-6、CRP及尿液NAG含量的影响

目的探讨芪莲汤颗粒剂对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠体内炎性因子C-反应蛋白(creac-tion protein,CRP)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)及尿液N-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosamini-dase,NAG)含量的影响,研究芪莲汤颗粒剂的作用机制。方法采用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素腹腔注射的方法建立DN动物模型,设正常对照组、模型对照组、芪莲汤颗粒剂高剂量组及芪莲汤颗粒剂低剂量组。药物干预模型动物4个月后取血清测定CRP、IL-6含量;取尿液测定其中NAG的含量。结果芪莲汤干预后血清中CRP、IL-6含量降低;尿液中NAG排出减少。结论芪莲汤颗粒剂可以降低DN大鼠体内CRP、IL-6含量,对大鼠体内的炎症状态有纠正作用;能降低大鼠尿液中的NAG酶含量,对大鼠的肾功能有保护作用。

芪连汤颗粒对糖尿病肾病大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体-r表达的影响

目的探讨芪连汤颗粒对糖尿病肾病(DN)大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体-r(peroxisomeproliferators-activated receptor-r,PPAR-r)表达的影响。方法 SD大鼠55只,随机分为正常对照组10只,45只建立DN大鼠模型,并随机分为模型对照组、高剂量药物组,低剂量药物组,每组15只。高、低剂量药物组分别灌胃给予芪连汤颗粒溶液10,5 g.kg-1.d-1。正常对照组和模型对照组灌胃给予等量0.9%氯化钠溶液,连续4个月。取大鼠抗凝全血,分离单核细胞提取总蛋白,取动物肾脏组织总蛋白,用Western-blot方法检测PPAR-r与GAPDH比值(P/G)。结果正常对照组单核细胞内P/G值为(0.857 6±0.069 3),肾脏内P/G值为(0.912 6±0.066 7)。模型对照组单核细胞内P/G值为(0.621 9±0.095 0),肾脏内P/G值为(0.706 2±0.097 0)。高剂量药物组单核细胞内P/G值为(0.806 3±0.081 0),与模型对照组比较差异有显著性(P<0.05),肾脏内P/G值为(0.827 7±0.062 0),与模型对照组比较差异有显著性(P<0.05)。低剂量药物组单核细胞内P/G值为(0.764 8±0.087 0),与模型对照组比较差异有显著性(P<0.05),肾脏内P/G值为(0.785 7±0.099 0)。结论芪连汤颗粒能够保护DN大鼠,可能通过激活单核细胞系统和肾脏内PPAR-r表达,对DN大鼠的全身炎症状态进行调节。

芪莲汤颗粒药物血清抑制链脲佐菌素诱导大鼠胰岛素分泌细胞的凋亡

目的观察芪莲汤颗粒药物血清对链脲佐菌素(streptozocin,STZ)诱导大鼠胰岛素分泌细胞(INS-1)凋亡的保护作用。方法采用高、低2个剂量的芪莲汤颗粒药物血清处理INS-1细胞6h后,用3mmol/L的STZ诱导INS-1细胞凋亡;Alamar Blue法检测细胞活性;AnnexinV-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium io-dide,PI)双标记流式细胞仪检测细胞凋亡情况;免疫酶联吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测INS-1细胞高糖刺激后分泌胰岛素的功能。结果低、高浓度芪莲汤颗粒药物血清不同程度的抑制了STZ诱导的INS-1细胞的凋亡,增强了细胞活力;细胞凋亡率显著下降,胰岛素分泌功能受到药物血清的保护。结论芪莲汤颗粒药物血清体外可以保护STZ损伤的INS-1细胞,保护胰岛素分泌细胞可能是芪莲汤颗粒剂治疗糖尿病及其并发症的机制之一。