西南地区金荞麦(Fagopyrum dibotrys(D.Don)Hara)居群遗传多样性研究

采用等位酶电泳技术研究了云南省和四川省西南共 5个县境内金荞麦 (Fagopyrumdibotrys(D .Don)Hara) 5个天然居群的遗传多样性 .金荞麦居群内维持有较高的遗传多样性 ,多态位点比率为 5 6 .7% ,预期杂合度和观察杂合度分别为 0 .2 2 1和 0 .36 3.并对金荞麦与栽培荞麦之间遗传变异作了比较 .

西南地区金荞麦(Fagopyrum dibotrys(D.Don)Hara)居群的等位酶变异

采用等位酶电泳技术研究了云南省和四川省西南共五县境内金荞麦 (Fagopyrumdibotrys(D .Don)Hara) 5个天然居群间的遗传分化 .金荞麦居群间遗传分化程度较低 ,FST 值为 0 .2 2 5 ,居群间遗传一致度和遗传距离的均值分别为 0 .90 5 3和 0 .10 0 5 ,并提出了保护建议 .

A phenolic glycoside from Fagopyrum dibotrys (D.Don) Hara

A new phenolic constituent along with five known compounds were isolated from Fagopyrum dibotrys (D.Don) Hara. The new compound was characterized as 1,3-dimethoxy-2-O-β-xylo-pyranosyl-5-O-β-glucopyranosyl-benzene, by spectroscopic analysis and enzymatic hydrolysis.

云南金荞麦叶斑病病原菌的鉴定及其生物学特性

从云南省嵩明县试验基地采集金荞麦叶斑病病叶,采用组织分离法分离培养病原菌,根据柯赫氏法则测定病原菌的致病性,观察病原菌形态学特征,并与ITS、TUB2系统发育分析相结合鉴定病原菌,测定病原菌的生物学特性。结果表明:云南金荞麦叶斑病病原菌代表菌株GY3的孢子形态与拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)真菌相似,菌株GY3的rDNA–ITS及TUB2联合序列与小孢拟盘多毛孢(P.microspora)2个菌株(ZK1–1、ZK5–5)的序列聚在同一分支,鉴定认为金荞麦叶斑病的病原菌为小孢拟盘多毛孢(P.microspora);病原菌生物学特性测定结果表明,GY3菌丝生长最适培养基为PDA,以PDA培养基培养GY3,菌丝生长最适pH为7,最适温度为25℃,菌丝的致死温度为50℃(水浴10min),连续光照最有利于菌丝生长,菌丝生长的最适的碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨。

金荞麦胶囊中间体制备工艺的优选及质量控制

目的:优选金荞麦胶囊中间体的制备工艺以及质量控制。方法:以表儿茶素为实验指标,通过正交实验,围绕提取时间、回流时间、回流次数考察选取最佳工艺。结果:当溶剂为药材的6倍量,乙醇浓度为50%,回流为1 h为最佳制备工艺。结论:所建立的方法操作容易,结果准确可靠重现,可显著提高表儿茶素的提取,可用于金荞麦胶囊中间体的制备。

金荞麦秸秆粉对断奶肉兔生长性能、屠宰性能和肉品质的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同比例金荞麦秸秆粉对断奶肉兔生长性能、屠宰性能和肉品质的影响。试验选用28日龄断奶、体重为(0.58±0.05) kg、健康状况良好的商品代肉兔150只,随机分为5个组,每组15个重复,每个重复2只(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加3%(试验Ⅰ组)、6%(试验Ⅱ组)、9%(试验Ⅲ组)和12%(试验Ⅳ组)金荞麦秸秆粉等量替代苜蓿草粉的饲粮。预试期7 d,正试期42 d。结果表明:1)与对照组相比,试验Ⅱ组断奶肉兔终末体重和平均日采食量显著提高(P<0.05)。2)与对照组相比,试验Ⅱ组断奶肉兔半净膛率和全净膛率显著提高(P<0.05)。3)饲粮中添加金荞麦秸秆粉对断奶肉兔各器官指数均无显著影响(P>0.05)。4)与对照组相比,试验Ⅱ组断奶肉兔背最长肌24 h pH和45 min红度(a*)值显著提高(P<0.05),背最长肌滴水损失显著降低(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加适宜比例金荞麦秸秆粉可以提高断奶肉兔生长性能和屠宰性能,改善肉品质,以添加6%为宜。

金荞麦总黄酮对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的影响

该研究旨在探讨金荞麦总黄酮对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠急性肺损伤的影响。应用金荞麦根以乙醇为提取溶剂获得金荞麦总黄酮,采用昆明小鼠连续12 d灌胃金荞麦总黄酮(25、50、100 mg/kg),1 mg/kg LPS滴鼻12 h诱导小鼠急性肺损伤;通过20μg/mL LPS和RAW 264.7细胞共孵育建立细胞损伤模型,应用10、20、30μg/mL金荞麦总黄酮处理RAW 264.7细胞。采用CCK-8法和乳酸脱氢酶(dehydrogenase,LDH)释放量对LPS和金荞麦总黄酮进行RAW 264.7细胞毒性评价;采用ELISA检测炎性细胞因子[白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)和白细胞介素18(interleukin-18,IL-18))]含量;分光光度计法检测氧化生物标志物[活性氧(reactive oxygen,ROS)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和H_(2)O_(2)]水平;Hoechst 33342/PI双染色检测RAW 264.7细胞凋亡水平。结果表明,金荞麦总黄酮可减轻小鼠肺病理损伤及肺组织水肿程度,显著降低LPS染毒小鼠的血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌和氧化应激产物的水平,并增强CAT活力;金荞麦总黄酮能抑制RAW 264.7细胞向M1极化进而减少促炎介质分泌;降低LDH的释放量,清除积累的ROS和MDA,升高SOD及CAT活性,提高GSH的含量,并抵御LPS诱导细胞凋亡,且呈现浓度依赖性。金荞麦总黄酮能有效抑制促炎介质的产生,逆转氧化生物标志物的表达,抵御细胞凋亡,抑制巨噬细胞向M1极化,缓解LPS诱导的小鼠急性肺损伤。

环境温度和饲粮金荞麦提取物对蛋鸡肝脏超微结构及线粒体抗氧化功能的影响

试验旨在研究饲粮金荞麦提取物(FDR)对不同温度条件下的长顺绿壳蛋鸡肝脏组织超微结构和线粒体抗氧化功能的影响。采用3×4的双因子完全随机试验设计,将192只鸡分为22℃常温、28℃中温和33℃高温以及4个FDR添加水平:0、200、400、800 mg/kg,共12个处理组。每个处理4个重复,每个重复4只鸡。将试验鸡只按照温度梯度分别安排到3个独立的温控鸡舍,于试验结束采集肝脏样品用于超微结构及线粒体抗氧化指标检测。结果显示:(1)33℃高温下蛋鸡肝脏组织超微结构损伤最严重,高温处理下不同浓度FDR添加肝脏组织超微结构损伤有所减轻,添加400 mg/kg组损伤程度最轻;(2)33℃环境条件下,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性分别下降了13%和6.1%,丙二醛(MDA)含量和蛋白质羰基(PC)含量分别上升了17.3%和13.9%,FDR添加与温度的影响呈相反趋势,环境温度和FDR两因子添加对蛋鸡GSH-Px活性、SOD活性、MDA含量和PC含量均有显著的互作影响(P <0.05);(3)饲粮中添加FDR可上调蛋鸡肝脏中Nrf2信号通路与Trx2系统相关基因m RNA表达,但差异不显著(P> 0.05),环境温度与FDR两因子的添加对蛋鸡肝脏各个基因mRNA相对表达量有显著的互作影响(P <0.05)。综上所述,蛋鸡长时间暴露在高温环境下肝脏抗氧化能力降低,饲粮中添加400 mg/kg或更高含量的金荞麦提取物可缓解高温环境下蛋鸡的肝脏组织超微结构损伤,以及提高蛋鸡肝脏线粒体抗氧化能力。

夏季高温条件下鲜饲金荞麦对蛋鸡肠道微生物区系及相关基因表达的影响

课题组前期研究发现鲜饲金荞麦可维持蛋鸡在夏季自然高温条件下的产蛋率,但具体作用机制未知,本试验拟从肠道相关基因表达和微生物区系角度探究鲜饲金荞麦对蛋鸡的作用机理。试验选取32周龄的长顺绿壳蛋鸡300只,随机分为5组(C组饲喂基础饲粮,T1、T2、T3和T4组分别饲喂添加5%、10%、15%和20%新鲜金荞麦的基础饲粮),每组5个重复,每个重复12只,试验期90 d。结果表明,T2组显著上调了蛋鸡十二指肠和回肠中的Occluding和EGF的表达量(P<0.05);试验组蛋鸡回肠中蓝细菌门(Cyanobacteria)相对丰度较高;T2组增加了蛋鸡回肠中的双歧杆菌属(益生菌)丰度和盲肠中的乳杆菌属丰度。因此,蛋鸡饲粮中添加新鲜金荞麦可能通过上调肠道中Occluding和EGF基因的表达量以及增加肠道有益菌丰度的途径缓解高温环境带来的应激效应。

气候变化情景下中国金荞麦适生区变化分析

基于MaxEnt生态位模型和ArcGIS技术,以中国金荞麦为研究对象,结合全国137条金荞麦有效分布点和32项环境因子进行适生区分析,筛选金荞麦适宜生长的关键环境因子,并预测末次盛冰期(The last glacial maximum,LGM)、全新世中期(The mid holocene,MH)、当前(Current)和未来时期(2041-2060年,2050s;2061-2080年,2070s)3种不同温室气体排放情景金荞麦适宜区域的地理空间格局变化及质心迁移。结果表明:评价MaxEnt模型的指标训练和测试数据的AUC为0.928±0.005和0.916±0.027,模型模拟精度较高。制约金荞麦生态适宜分布的9个环境因子及阈值为年平均降水量(915~1899mm)、最冷月最低温度(-2.4~6.9℃)、温度季节变化系数(3031~6319)、海拔(61~357.2m,1540~3408m)、昼夜温差月均值(7.5~10.9℃)、7月平均风速(0.6~1.9m·s^(−1))、最暖季度平均降水量(506.8~1060.9mm)、4月平均风速(0.5~2.3m·s^(−1))和降水量季节变化方差(45.4~84.9)。从末次盛冰期到未来时期,金荞麦适生区呈逐渐增加趋势,尤以未来温室气体中高排放情景下扩张幅度较大,最大扩张面积达到45.93×10^(4)km^(2),扩张区域主要集中在横断山脉附近和秦岭-淮河一带。气候变化情景下金荞麦适生区质心呈高纬度、高海拔迁移趋势。

金荞麦化学成分、药理作用的研究进展及质量标志物(Q-Marker)的预测分析

金荞麦是我国传统中药材,主要含有黄酮类、三萜类、甾体类、有机酸类等化学成分,具有抗炎、抗肿瘤、降血糖、抗氧化等多种药理活性。通过文献检索,梳理了近几年国内外对金荞麦化学成分及药理作用研究,从传统功效、传统药性、化学成分可测性、不同产地等多个方面对其质量标志物(Q-Marker)进行了预测分析,为金荞麦质量控制提供科学依据。

《植物名实图考》透骨消本草考证

通过对相关的古今文献分析,从名称、植物形态、产地、功效主治及入药部位对透骨消进行考证。经考证,透骨消之名最早载于《植物名实图考》,书中相关文字及药图考证得到透骨消的基原为金荞麦Fagopyrum dibotrys(D.Don)Hara.,经比对分析地方县志中所载“茎基部带淡紫红色、淡紫色花”特征的透骨消初步考证为活血丹Glechoma longituba(Nakai)Kupr.。可为透骨消的制剂开发及临床使用提供一定参考,保证其使用的安全性及准确性。

持续干旱对金荞麦生长、生理生态特性的影响及抗旱性评价

为探讨金荞麦(Fagopyrum dibotrys)对持续干旱胁迫的适应对策和能力,揭示其抗旱机制,本试验以8个优异金荞麦种质为试验材料,采用室内盆栽模拟干旱胁迫法,研究持续干旱下金荞麦细胞膜脂过氧化、渗透调节物质、保护酶活性、光合及叶绿素荧光参数变化和植株生长情况,并利用主成分与隶属函数综合评价其抗旱性。结果表明,干旱胁迫下金荞麦的脯氨酸(Pro)、可溶性糖(SS)等渗透调节物质累积,维持细胞膨压;SOD,POD和CAT等抗氧化酶活性增加,保护细胞膜免遭伤害。SS的渗透调节能力强于Pro。SOD和CAT酶在活性氧清除反应过程中,首先发挥作用。抗旱性强的金荞麦非光化学猝灭升高,保护细胞及光合结构不受损伤;叶面积、气孔导度和蒸腾速率降低,地下生物量增加保证了较高的水分利用率。8个金荞麦材料的抗旱性顺序为:JQ6>JQ3>JQ2>JQ4>JQ1>JQ8>JQ5>JQ7。

金荞麦(-)-表儿茶素抗氧化活性研究

研究金荞麦中(-)-表儿茶素活性物质的抗氧化活性。超氧阴离子自由基清除实验表明其抗氧化率达到83.08%;羟自由基清除实验表明活性物质质量浓度对清除率的影响差异极显著(P<0.01),质量浓度为0.350 mg/mL时清除率达77.30%;还原力测定实验表明其还原力达到同质量浓度VC的48.02%,且质量浓度对还原力的影响差异极显著(P<0.01);乙醇提取物中活性物质含量达1.40 mg/mL,占块根干物质质量的2.52%。实验证明金荞麦(-)-表儿茶素活性物质具有很好的抗氧化活性,可作为一种天然、高效的抗氧化剂。

金荞麦查尔酮合成酶基因CHS的克隆及序列分析

采用同源克隆的方法获得金荞麦查尔酮合成酶基因(CHS)的保守片段554bp,进一步采用染色体步移法(genome-walking)和RT-PCR技术克隆到CHS基因的全长DNA序列和cDNA开放阅读框(ORF)序列。序列分析结果表明,金荞麦CHS基因DNA全长1650bp,含一个462bp的内含子;其cDNA编码区全长1188bp,编码395个氨基酸,命名为FdCHS,NCBI登录号为GU169470。该氨基酸序列与同为蓼科的掌叶大黄、虎杖CHS的氨基酸序列同源率分别达到94%和93%,且含有CHS活性位点和底物结合口袋位点等保守位点。

光强对金荞麦幼苗部分生理指标和生物量的影响

研究不同光强对金荞麦幼苗生物量和部分生理指标的影响.采用室外盆栽试验方法,用遮阳网形成的不同光强处理金荞麦幼苗75d后测定其生物量;另外分5个时期(处理后15d、30d、45d、60d、75d)测定生理指标.50.32%光强下生长的金荞麦幼苗生物量显著高于其他处理.弱光(20.85%和6.98%光强)下生长的金荞麦幼苗在生物量积累减少的情况下,通过增加叶、根生物量和叶柄生物量配置比例,减少主茎、分枝茎生物量配置来适应光环境.金荞麦幼苗叶绿素a、b及叶绿素总质量分数、可溶性蛋白质量分数、脯氨酸质量分数随着光强减弱而增加,可溶性糖质量分数则相反,其中叶绿素a、b质量分数和脯氨酸质量分数在4个不同处理中达到显著性水平.对于人工栽培的金荞麦,在幼苗期应适当遮阴(试验的相对光强为50%左右),更有利于其生长.

金荞麦的化学成分研究

目的研究中药金荞麦中的化学成分。方法运用多种色谱方法分离化学成分 ,依据理化性质、波谱 (NMR、EI- MS)数据分析鉴定化合物结构。结果从金荞麦中初步分离得到 5个化合物 ,分别鉴定为赤杨酮 (glutinone ,Ⅰ )、赤杨醇 (glutinol,Ⅱ )、棕榈酸单甘油酯 (glycerolmonopalmitate ,Ⅲ )、木犀草素 (luteolin ,Ⅳ )、正丁醇 - β- D- 吡喃型果糖苷 (n butyl -β- D fructopyronoside ,Ⅴ )。 结论 5个化合物均为首次从荞麦属植物中分离得到。

温度和盐胁迫对金荞麦和荞麦种子萌发的影响

比较了蓼科(Polygonaceae)荞麦属(Fagopyrum)2个种金荞麦(Fagopyrumdibotrys (D.Don) Hara)和荞麦(Fagopyrumemarginatum (Roth) Meisner)种子在不同温度和不同NaCl浓度下的萌发率.结果表明:金荞麦和荞麦种子萌发率最高时温度是35℃,最适温度是25℃,该温度下荞麦种子的萌发率(73.67%)显著高于金荞麦种子的萌发率(54.78%),金荞麦种子25℃萌发率与35℃时萌发率(55.48%)相比没有显著差异,荞麦种子25℃时种子萌发率只比35℃时萌发率(75.67%)低2.00%;0.1%NaCl浓度与CK(NaCl浓度为0)时对金荞麦和荞麦种子萌发率没有显著差异,说明2个种种子均有抗低盐能力.通过比较不同NaCl浓度下金荞麦和荞麦种子萌发率的相对变化,得出金荞麦种子比荞麦种子具有更强的耐盐性.

资源植物野生金荞麦的研究进展

中国地大物博,有30000多种高等植物,居北半球之首,其中资源植物十分丰富,也是天然药物主产国之一。自20世纪70年代以来,中国的资源植物研究尤其是药用植物的研究发展迅猛,近20年来,从天然产物中开发各种新药成为世界科学家研究的热点。中国是世界荞麦的起源中心,也是遗传多样性中心。野生金荞麦(Fagopyrumdibotrys)系蓼科荞麦属多年生草本植物,原产于中国西南,分布于陕西、江苏、浙江、江西、河南、湖北、湖南、广西、广东、四川、重庆及云南等省区,是一种营养丰富并具有重要药用价值的资源植物。野生金荞麦中蕴涵着丰富的优异基因,作为中国重要的传统中药材,金荞麦的块根活性提取物(植物次生代谢产物)具有显著的抗癌,抑制肿瘤细胞肺侵袭和转移,以及消炎抗菌等重要作用,是多种有效药物的主要成分之一。除此之外,由于其籽粒蛋白质的组分全,必需氨基酸含量高,富含维生素和微量元素,使其成为一种较理想的保健食品的选用成分。目前,由于人工栽培产量的限制,加之栽培品种在营养价值上、药用有效活性成分和效价上均低于野生品种,这就造成了对野生金荞麦资源的大量需求,从而对野生资源造成了极大的破坏。鉴于此,中国现已将其列为国家二级保护植物。国内外已经展开了资源收集、多样性、生理特性、育种、药效学以及生态环境等方面的研究,基于活性成分合成的功能基因的研究,国内外还未见报道,为了进一步开发野生金荞麦的利用价值,发掘其优异的功能基因,并保护其野生基因资源,综述了野生金荞麦在本草、原植物分类及分布、多样性、核形、化学及功能成分、药理药效、生态环境、栽培及组织培养方面研究的新进展,并从基础研究、组织培养、基因工程、抗癌机理研究、育种研究、保健品开发等方面作了展望。

金荞麦超微粉对小鼠免疫功能的影响

本试验旨在研究金荞麦超微粉对小鼠免疫功能和生长发育的影响。将60只昆明小鼠随机等分为4组,高、中、低剂量组分别灌胃1.75、1.25、0.75 g/kg体重金荞麦超微粉悬液,连续给药7 d;空白对照组灌胃等量的生理盐水。最后一次给药后间隔12 h,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,随后在给药结束后的第7、14和21天取小鼠外周血用于分离淋巴细胞和血清,用CCK-8法测定外周血淋巴细胞增殖能力,微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平,同时称量各组小鼠体重;给药结束后21 d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及脾脏指数。统计学分析结果显示,与对照组相比,中剂量金荞麦超微粉可极显著提高小鼠外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平和体重(P<0.01),同时极显著提高腹腔巨噬细胞的吞噬能力和脾脏指数(P<0.01)。试验结果表明,金荞麦超微粉能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育,为开发金荞麦超微粉成为新型天然植物药、饲料添加剂提供依据。