不同剂量腺嘌呤建立脾肾阳虚型慢性肾衰竭大鼠模型的实验研究

目的比较不同剂量腺嘌呤灌胃对模型大鼠一般状态、生化指标及肾脏病理组织的影响,确定腺嘌呤灌胃制备脾肾阳虚型慢性肾衰竭(Chronic kidney disease,CRF)大鼠模型的最佳造模剂量。方法将24只SD雄性大鼠随机分为正常组与模型组,模型组大鼠分为M1组、M2组和M3组,每组6只。正常组给予等量生理盐水灌胃,M1组以腺嘌呤150 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃、M2组以腺嘌呤200 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,M3组以腺嘌呤300 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃。连续干预3周,造模前及造模后每周检测肌酐(Serum creatinine,Scr)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、24 h尿蛋白定量(24-hour urinary protein quantification,24 h-UTP)水平,3周后取肾脏病理组织采用苏木-伊红(HE)和马松(Masson)染色法对大鼠肾脏组织病理学进行模型评估。结果与正常组大鼠比较,模型组大鼠均出现不同程度的精神萎靡不振,活动度降低,弓背蜷缩,毛发稀疏无光泽,耳缘及脚趾苍白发凉,小便频数,大便稀溏等现象。与正常组大鼠比较,各模型组大鼠体重均有不同程度的减轻(P<0.05),造模第2周,与M1组大鼠体重比较,M2组、M3组大鼠差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常组大鼠比较,各模型组大鼠24 h尿量明显增多(P<0.05),Scr、BUN及24 h-UTP水平均升高(P<0.05),且M3组大鼠各指标升高最明显。各模型组大鼠Scr、BUN及24 h-UTP比较差异均有统计学意义(P<0.05)。肾脏病理染色结果显示各模型组大鼠的肾脏组织出现不同程度的改变,镜下见肾小球形态基本完整,部分肾小球结构破坏;部分近肾小管空泡变性严重,上皮萎缩,部分肾小管管腔扩张,管腔内见红染无结构的蛋白管型样物及较多红细胞;随着腺嘌呤灌注剂量增加,肾小球内可见大量黄绿色结晶沉淀物,存在肾间质炎性细胞浸润和纤维组织增生。结论腺嘌呤灌胃可成功建立脾肾阳虚型慢性肾衰竭动物模型,其中200 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃组更接近临床脾肾阳虚型慢性肾衰竭发展进程,且死亡率较低,符合脾肾阳虚型慢性肾衰竭生理病理学特点。

高彦彬教授从络病论治慢性肾衰经验

慢性肾衰是各类进展性肾脏疾病的最终结局,病机错综复杂,中医对其治疗具有较好疗效。高彦彬教授学术思想师承国医大师吕仁和教授,临证四十载,认为此病属于“络病”范畴,并针对慢性肾衰提出肾元虚衰、肾络瘀结、浊毒内停的基本病机和益气固肾、解毒通络的基本治法。临床上以虚定型,以实定候进行辨证论治,并基于治未病理论,提出慢性肾病三级预防策略。

慢性肾功能衰竭并肌肉减少症大鼠模型的实验研究

目的探究5/6肾切除法是否能建立慢性肾功能衰竭并肌肉减少症大鼠模型。方法大鼠随机分为对照组、假手术组和5/6肾切除模型组,进一步验证慢性肾功能衰竭及肌肉减少症。结果与假手术组相比:①模型组的尿蛋白定性、血肌酐、血尿素氮、血尿酸水平升高(P<0.05);②模型组的肾脏纤维化程度、凋亡率升高(P<0.05);③模型组的肌肉力量和功能降低(P<0.05);④模型组肌肉组织的纤维化程度明显(P<0.05)。结论通过5/6肾切除法可以构建慢性肾功能衰竭并肌肉减少症动物模型,为进一步防治该疾病提供了实验依据。

刘新祥教授运用肝脾肾同调法治疗慢性肾功能衰竭的临床经验

近年来慢性肾功能衰竭的发病率逐渐上升,且起病隐匿、预后差、医疗费用大,已成为影响人类健康的重要公共卫生问题,因此本病的早发现、早治疗尤为重要。慢性肾功能衰竭的发生发展不可逆,目前对于本病的治疗缺乏特效药,越来越多研究表明,中医辨证论治在慢性肾功能衰竭的治疗上有着独特优势,可以帮助患者减轻痛苦、改善患者临床症状,提高生活质量。刘新祥教授根据多年临证经验总结认为慢性肾功能衰竭发病过程中虚实夹杂,可出现肝脾肾三脏失调,治宜扶正祛邪、标本兼顾,总以健脾益肾、疏肝理气、祛湿化瘀为主。本文主要探讨刘新祥教授运用肝脾肾同调法治疗慢性肾功能衰竭的经验,为慢性肾衰提供临床治疗思路。

谢圣芳教授辨治慢性肾衰竭并发胃肠功能紊乱经验

胃肠功能紊乱是慢性肾衰竭常见的并发症,临床上表现为恶心、呕吐、腹痛、便秘和腹泻,严重影响患者生活质量,且目前尚无明确的有效治疗措施。谢圣芳教授(以下简称谢师)认为本病病机可归结为本虚标实,以脾肾虚衰、邪实潴留为主要病理状态。治疗上以注重维护肾气、顾护脾胃为原则,遣方用药偏于和缓,攻补兼施,以缓解患者临床症状,提高生活质量和延缓生存期,对慢性肾衰竭并发胃肠功能紊乱患者疗效显著。笔者师从谢圣芳教授,长期跟诊于谢师左右,记录其临床治疗肾脏相关疾病的临证思考与见解,并举医案一则,为中医药治疗慢性肾衰竭并发胃肠功能紊乱提供新的治疗思路。

国医大师皮持衡辨治慢性肾衰竭经验总结

皮持衡认为慢性肾衰竭的具体病因病机包括脾肾虚衰,多脏受损;泌浊不畅,尿毒蓄积;脏气虚衰,水湿滞遏;血脉瘀阻,脏腑衰竭四方面。在治疗慢性肾衰上,皮持衡以“虚、毒、湿、瘀”为切入点,遵循“间者并行,甚者独行”的治则,以治虚、治湿、治瘀、治毒为法,通过补泻结合、敛散兼施、扶助正气、祛除邪气的方法,临床治疗效果甚佳。

傅晓骏教授“健脾补肾,化瘀祛浊”思想治疗慢性肾功能衰竭经验介绍

目的:总结傅晓骏教授治疗慢性肾功能衰竭的具体用药规律以及具体的临证思路,以推广傅晓骏名中医诊治慢性肾功能衰竭的学术思想及用药经验。方法:通过每周三天跟随傅晓骏名中医的专家门诊抄方及每周一次的中医名家病房查房,以整理傅晓骏教授治疗慢性肾功能衰竭的具体病案资料,并通过广泛阅读临床相关的学术文献,挖掘分析阐述傅晓骏教授论治慢性肾功能衰竭思路,探讨傅晓骏教授治疗慢性肾功能衰竭的具体用药特点及用药规律,以总结其治疗慢性肾功能衰竭的学术思想及临证经验。结果:傅晓骏教授治疗慢性肾功能衰竭,临证时特别强调标本同治,提倡治病求本,首当扶正,治疗方法中尤其重视从瘀论治,调理中焦脾胃,强调“中央健,四旁如”诊治思想,治则上以益气温阳方法为主,辅以活血化瘀、泄浊解毒、健脾利湿、清热解毒等治疗方法,并随症加减,始终强调身心同治,强调中医药一体化综合治疗的学术思想。傅晓俊教授临床诊治慢性肾功能衰竭时擅长运用药对,大大提高了临床治疗效果。通过将黄芪与水蛭、仙茅与淫羊藿配伍应用,可以有效治疗脾肾阳虚患者,同时还能够补充肝肾,增强精气,促进气血流通,从而缓解慢性肾功能衰竭患者的腰腿痛、疲劳,减少蛋白尿,提高肾功能。结论:傅晓俊教授以其独具匠心的中西医融会贯通,将传统中医和现代技术有机地融为一体,以期能够迅速、有效地控制肾脏疾病进展,临床效果显著,可改善慢性肾功能衰竭患者肾功能,延缓肾损害进展,具有一定的临床推广应用价值。

疏血通注射液腹腔注射对慢性肾功能衰竭大鼠肾损伤的改善作用及其机制

目的观察疏血通注射液腹腔注射对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠肾损伤的改善作用,并探讨其机制。方法SPF级SD大鼠30只随机分为假手术组、模型组、疏血通注射液组,每组10只。模型组、疏血通注射液组大鼠采用分阶段5/6肾切除法制备大鼠CRF模型。CRF大鼠模型建立成功后,疏血通注射液组按10 mL/(kg•d)的剂量腹腔注射疏血通注射液,假手术组、模型组注射同剂量的生理盐水,连续8周后,收集腹主动脉血清、摘取肾脏备用。采用HE染色法观察各组大鼠肾脏组织病理学变化。使用全自动生化仪及相应试剂盒检测尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、晚期蛋白质氧化产物(AOPPs)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)等肾功能标志物和氧化应激标志物。采用JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位(MTP),使用ATP活性试剂盒检测ATP含量。采用Western Blotting法检测大鼠肾组织沉默信息调节因子1(SIRT1)、叉头框转录因子O1(FoxO1)蛋白。结果模型组大鼠肾小管变形、扩张、萎缩,肾间质可见较多炎症细胞浸润及上皮细胞坏死,伴有腺嘌呤沉积;疏血通给药组大鼠肾间质的炎性细胞浸润减少,肾小管状态改善,腺嘌呤结晶有所减少,病理损伤相对较轻。与假手术组相比,模型组、疏血通注射液组大鼠BUN、Scr、ROS、MDA、AOPPs水平均升高(P均<0.05),SOD活性、ATP酶含量、MTP均降低(P均<0.05);与模型组相比,疏血通注射液组大鼠BUN、Scr、ROS、MDA、AOPPs水平均降低(P均<0.05),SOD活性、ATP酶含量、MTP均升高(P均<0.05)。与假手术组相比,模型组、疏血通注射液组大鼠肾组织SIRT1蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),模型组大鼠肾组织FoxO1蛋白相对表达量升高(P<0.05);与模型组相比,疏血通注射液组大鼠肾组织SIRT1蛋白相对表达量升高(P<0.05),FoxO1蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论疏血通注射液腹腔注射对CRF大鼠的肾损伤具有改善作用,其作用机制可能与抑制肾脏氧化应激水平、改善线粒体功能、调节SIRT1/FoxO1通路相关蛋白的表达有关。

吕宏生教授中医药辨治慢性肾衰竭经验

吕宏生教授长期从事肾脏病临床诊疗工作,运用中医药辨治慢性肾衰竭经验丰富,认为慢性肾衰竭病机方面以正虚为本、邪实为标,虚实之间相互影响;病情迁延,变证百出;急性加重者,热毒为患显著。治疗过程中,注重辨证分型,兼顾标本;内外合治,综合调护;注重调养,减负护肾;关注变证,及时处理;药毒伤肾,使用禁忌,取得较好临床效果。

林启展从湿论治慢性肾衰竭经验

林启展教授认为,慢性肾衰竭主要病机为脾肾两虚,湿浊热瘀潴留,本病病情复杂多变,临证应抓住其本虚标实的特点,并强调湿邪贯穿于慢性肾衰竭全程,是病情不断进展的关键因素,故需重视“祛湿”。林教授认为,慢性肾衰竭患者早期主要为正气虚损,中期脾肾虚损愈加严重,晚期湿邪化为浊毒,湿邪在不同时期亦各有特点,临证活用芳香化湿法、清热利湿法、养阴利湿法、活血泄浊法治疗,取得较好疗效。

毛俐婵从“阳虚致积”论治慢性肾衰竭经验

毛俐婵医师从医20余年,擅长运用中医中药治疗肾脏疾病,疗效显著,广受患者好评。她认为慢性肾衰竭与“积”关系密切,并且认为“积始于肾阳虚”。在治疗上需以化积为核心,以温肾阳为主线,方以五积散为底,随证加减。本文主要从慢性肾衰竭的病因病机、治疗核心、治疗主线三个层次介绍毛俐婵医师基于“阳虚致积”理论治疗慢性肾衰竭的临床经验,并附一则案例佐证。

基于网络药理及动物实验研究卢健棋教授强心汤治疗慢性心力衰竭分子机制

目的基于网络药理学方法、分子对接技术及动物实验研究验证广西名老中医、岐黄学者卢健棋教授所创强心汤治疗CHF分子作用机制。方法首先检索TCMSP数据库与相关文献查找强心汤组成的重要化合物;通过TCMSP数据库和STITCH数据库查找强心汤组成作用靶点;运用GeneCards、DisGeNET与OMIM等数据库获取CHF的主要靶点;进一步选择Venny平台取得两者的交集靶点;使用STRING平台和Cytoscape 3.6.1构建“成分-靶点”网络与强心汤靶点-CHF靶点的PPI网络;利用DAVID 6.8数据库进行GO富集分析和KEGG通路富集分析;使用AutoDock Vina软件进行分子对接。最后构建结扎大鼠左冠状动脉前降支法造成AMI后CHF模型,采用免疫蛋白印迹法检测核心靶点蛋白表达。结果通过网络药理学研究方法得到槲皮素(Quercetin)、山柰酚(Kaempferol)、木犀草素(Luteolin)、丹参酮(Tanshinone Iia)与柚皮素(Naringenin)等185个重要活性成分,核心靶点为信号转导和转录活化因子3(STAT3)、结核分枝杆菌调节蛋白(RELA)、磷酸化蛋白激酶1(AKT1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)和白细胞介素6(IL-6)等100个治疗靶点,初步表明强心汤可能通过调控脂质和动脉粥样硬化、流体剪切应力和动脉粥样硬化、肿瘤坏死因子、IL-17、HIF-1、松弛素和C型凝集素受体等信号通路对细胞因子介导的信号通路、基因表达的正向调控、对缺氧的反应、对脂多糖的反应、对药物的反应等生物过程进行调节,发挥治疗CHF的作用。分子对接结果表明,强心汤组成的重要化合物与核心作用靶点均表现有强烈的结合能力;动物实验研究结果表明,强心汤成分能显著降低STAT3蛋白与MAPK1蛋白的磷酸化表达水平和IL6蛋白的表达水平(P<0.05),强心汤高剂量组略优于低剂量组。结论本研究初步阐明强心汤可以通过降低STAT3蛋白与MAPK1蛋白磷酸化和IL6蛋白表达水平起到治疗CHF的作用,也验证了强心汤有多组成、多靶点、多途径协同作用治疗CHF的特点,动物实验为临床医师治疗CHF临床用药及进一步研究提供实验理论依据。

基于“阳虚裂”辨治慢性肾衰竭

裂纹舌可在临床中指导慢性肾脏病的诊疗。王琛教授围绕慢性肾衰竭阳虚证,对其出现裂纹舌的病理机制、常见病因以及常用治法等3个方面进行了深入的总结,将该舌象称为“阳虚裂”,并且在大量临证中取得良好的治疗效果,最终逐步形成了对“阳虚裂”的独特学术见解。该文重点从慢性肾脏病中期和末期两阶段阐述“阳虚裂”,结合慢性肾衰竭病机演变,以期为该病的临床治疗提供新的思路与方法。

靳锋主任辨治慢性肾衰竭非透析期经验撷菁

慢性肾衰竭是一类严重危害患者健康的综合征,其发病率呈逐年上升趋势,且越来越年轻化,防治CKD进入终末期肾脏病已成为世界各国所面临的重要公共卫生问题。靳锋老师从肺脾肾及三焦论治慢性肾衰竭,临床始终秉持“宣上畅中通下”的治疗原则,并创立了“温肾活血,补肾健脾,通下泄浊,宣肺利水”的治疗方法。靳锋老师秉持未病先防、既病防变的原则,独辟蹊径,通过中西医结合治疗,以此减轻患者症状,提高患者生活质量,取得良好的治疗效果。对靳锋老师治疗慢性肾衰竭的临床经验进行了总结。

黄淑芬教授从络病-玄府辨治慢性肾衰经验

黄淑芬教授对肾脏疾病的治疗积累了丰富的临床经验。基于络病-玄府理论指出,肾络瘀滞、玄府闭塞是慢性肾衰的病机关键,补虚泻浊、通络开玄是慢性肾衰的治疗大法,多年来以自拟肾衰基本方随证加减,配合医院制剂肾舒胶囊治疗,疗效显著。

马鸿斌教授运用行湿补气养血汤治疗慢性肾功能衰竭的经验

慢性肾功能衰竭是指各种原发性或继发性慢性肾脏疾病导致的肾功能损害所引起的临床综合征,主要临床表现有疲乏、纳差、恶心、呕吐等,其病机复杂,发病率也在逐渐升高。目前,西医缺乏特效药物及有效的治疗方法,且治疗疗程较长、费用较高。近年来,越来越多的研究证明了中医治疗该病可有效延缓疾病的发展,改善临床症状,提高患者的生活生存质量。马鸿斌教授专注于中医治疗慢性肾脏疾病30余载,认为慢性肾功能衰竭的病因病机以脾肾两虚、湿浊毒蕴最为常见,故常以“脾肾同治、标本兼顾”的行湿补气养血汤为基础方,再根据患者的个体情况辨证施治,临床疗效显著。笔者有幸跟随马教授临床学习,深刻感受到马教授用方遣药之精准以及此方对慢性肾功能衰竭之气虚湿阻证的临床治疗效果,故本文从中医病因病机、行湿补气养血汤的方义解析及其辨证化裁、特色用药、典型医案举例四个方面将马鸿斌教授运用行湿补气养血汤治疗慢性肾功能衰竭的经验总结如下,以望为临床用方用药提供新思路,为中医药治疗慢性肾功能衰竭疾病提供理论依据及临床经验。

建立痛风性肾病并发慢性肾功能衰竭动物模型方法的探讨

目的探讨痛风性肾病并发慢性肾功能衰竭(简称慢肾衰)动物模型的建立方法。方法以10%高酵母饲料喂养6～8周龄雄性Wistar大鼠,分别以100、150、200、250、300mg/(kg.d)腺嘌呤灌胃,动态监测大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及血尿酸(UA)水平的变化,同时观察大鼠肾脏病理改变。结果与正常对照组比较,以100mg/(kg.d)腺嘌呤灌胃7天,大鼠血清BUN、Cr及血UA均明显升高(P<0.05),同时肾脏病理组织学出现痛风性肾病的病理改变,随着造模时间的延长,上述生化指标及肾脏病理组织学变化更明显,在第26天(约4周)血Cr达到慢肾衰水平,而41天(约第6周)血Cr明显超过慢肾衰水平。血UA于造模后第7天达到较高水平,较长时间内维持在高水平上,血UA在第41～48天之间迅速下降,肾脏病理组织学淋巴细胞浸润,纤维组织增生加重,造模48天时在上述病变基础上纤维组织增生明显,间质纤维化。而其他剂量腺嘌呤灌胃至14天,与正常对照组比较,血清BUN、Cr及血UA均明显升高(P<0.05),达到肾功能衰竭水平;恢复正常饲料喂养,17天后血清BUN、Cr及血UA水平明显下降,至35天时,上述指标恢复接近正常水平。结论用10%高酵母饲料喂养雄性Wistar大鼠,同时予以100mg/(kg.d)体重腺嘌呤灌胃5周,可建立理想的痛风性肾病并发慢肾衰的实验动物模型。

心肾综合征动物模型研究进展

心肾综合征(cardiorenal syndrome,CRS)是慢性心脏衰竭(chronic heart failure,CHF)和肾脏衰竭(chronic renal failure,CRF)发展的终末期阶段。然而,心肾交互损伤的确切启动机制尚未明确。目前尚未有合适的动物模型能够高度模拟临床CRS(心肾共损程度适宜),该文对心肾共损动物模型进行归纳,并结合肾素原(受体)-肾素-血管紧张素系统的变化特点予以综述,为心肾综合征的药物研究提供动物实验方法参考。

腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭贫血动物模型的建立

给大鼠口服含 0 .75 %腺嘌呤饲料 7周 ,造成大鼠慢性肾功能衰竭 ,并引起较严重的贫血 ,为进行重组人红细胞生成素 (rHuEPO)对慢性肾衰所致贫血的药效研究提供了稳定的实验动物模型。

虫草多糖对大鼠肾脏5／6切除诱发的慢性肾衰的治疗作用

目的探讨虫草多糖对慢性肾功能衰竭模型大鼠的治疗作用。方法采用肾脏5/6切除复制大鼠慢性肾衰(CRF)模型。实验分为6组,阳性对照组肌肉注射地塞米松0.1mg/kg,虫草多糖高、中、低剂量组灌胃虫草多糖160,80,40mg/kg,假手术组、模型组灌胃等量生理盐水。给药2周后,观察大鼠的血液生化指标、肾功能、肾病理的变化。结果阳性对照组和虫草多糖3个剂量组大鼠血清尿素氮、肌酐的含量以及尿蛋白和尿量降低,与模型组比较有显著性差异(P<0.01或P<0.05),高剂量和中剂量虫草多糖的作用优于阳性对照组。病理切片可见阳性对照组和虫草多糖高剂量组大鼠肾脏病理损伤明显好转,虫草多糖中、低剂量亦有好转。结论虫草多糖能够治疗大鼠肾脏部分切除诱发的慢性肾功能衰竭,改善肾功能。