芪归益肾方对缺血再灌注致急性肾损伤小鼠的保护作用

目的探讨芪归益肾方对缺血再灌注致急性肾损伤小鼠的保护作用。方法ICR小鼠随机分成假手术组、模型组、芪归益肾方组(50 g/kg)和硫辛酸组(硫辛酸0.1 g/kg)。各组灌胃处理1周后,利用肾动脉夹闭及恢复血流建造肾缺血再灌注损伤模型,造模24 h后采集全血,分离肾脏组织。全自动生化分析仪检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平,HE染色、免疫组化和Western blot观察肾脏组织形态学变化和检测HO-1、Nrf2表达。结果除假手术组外,其余各组小鼠血清Scr、BUN水平和肾组织肾小管损伤评分均升高,但均低于模型组(P<0.05)。HE染色显示除假手术组外,其余各组存在不同程度的肾小管损伤,而药物干预组病理损伤较模型组减轻(P<0.05),其中芪归益肾方组最明显。免疫组织化学和Western blot结果表明,芪归益肾方和硫辛酸组小鼠MDA水平低于模型组,而SOD活性及HO-1、Nrf2表达高于模型组(P<0.05)。结论芪归益肾方可通过调控Nrf2/HO-1通路,基于抗氧化机制对缺血再灌注诱导的急性肾损伤小鼠肾脏组织发挥保护作用。

芪归益肾方延缓单侧输尿管梗阻小鼠肾脏纤维化进展机制的探讨

目的:利用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)肾病模型研究芪归益肾方通过调控细胞信号通路TGF-β/Smad/ILK的表达水平影响肾脏纤维化进展的程度。方法:昆明种小鼠32只,随机分为正常组、模型组、贝那普利组和芪归益肾方组,每组8只,除正常组外,其余各组制备UUO肾病模型后分别进行药物干预,第10天处死后取肾组织,分别采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肾组织的病理变化,免疫组化观察小鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1),细胞信号转导分子2(Smad2),Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和整合素连接激酶(ILK)蛋白的表达,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测小鼠肾组织TGF-β1,Col-Ⅰ和ILK mRNA及蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,免疫组化结果显示模型组小鼠肾组织TGF-β1,Smad2,Col-Ⅰ,ILK蛋白表达量明显升高,RT-PCR和Western blot检测结果显示小鼠肾组织TGF-β1,Col-Ⅰ和ILK mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05),模型组小鼠肾脏纤维化程度较为明显;与模型组比较,贝那普利组和芪归益肾方组治疗后肾脏纤维化程度均有减轻,明显降低小鼠肾组织TGF-β1,Smad2,Col-Ⅰ,ILK蛋白表达,明显降低小鼠肾组织TGF-β1,Col-Ⅰ和ILK mRNA及蛋白的表达(P<0.05),其中芪归益肾方治疗组比较贝那普利组效果更为明显(P<0.05)。结论:芪归益肾方对于UUO肾病模型的纤维化病变程度具有抑制作用,其作用主要与调控细胞信号通路TGF-β/Smad/ILK表达相关。

芪归益肾方对UUO小鼠肾组织TGF-β_1/Smads/PI3K信号通路的影响

目的:利用单侧输尿管梗阻(UUO)模型探讨芪归益肾方通过调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路延缓肾脏纤维化进展的机制。方法:Balb/C小鼠32只,制造UUO肾病模型,根据干预的药物分为芪归益肾方组(中药组,10 g·kg^(-1)),洛汀新组(10 m L·kg^(-1)),模型组,假手术组。实验结束后取肾组织采用苏木素-伊红(HE)染色及Masson染色进行病理学检测,观察肾小管-间质指数的变化;采用免疫组化检测肾组织中TGF-β_1,Smads,PI3K,纤维连接蛋白(FN)蛋白的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)及逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对肾组织的TGF-β1,PI3K蛋白及mRNA表达进行分析。结果:与假手术组比较,模型组肾小管-间质指数明显升高,免疫组化显示TGF-β1,Smads,FN蛋白表达均明显升高,PI3K蛋白表达明显降低(P<0.05),TGF-β_1蛋白及mRNA表达明显升高,PI3K蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,中药组和洛汀新组明显降低肾小管-间质指数,免疫组化显示明显降低TGF-β_1,Smads,FN蛋白表达,明显升高PI3K蛋白表达(P<0.05),明显降低TGF-β1蛋白及mRNA表达,明显升高PI3K蛋白及mRNA表达(P<0.05)。结论:芪归益肾方对于UUO模型小鼠延缓肾脏纤维化有较好的治疗作用,其作用机制可能与调控TGF-β1/Smads/PI3K信号通路有关。