HPLC-DAD法同时测定清热除湿祛风膏中5种成分的含量

目的建立同时测定清热除湿祛风膏中盐酸黄柏碱、升麻素苷、盐酸黄连碱、盐酸小檗碱、欧前胡素含量的方法。方法采用HPLC-DAD法,色谱柱为YMC-triart C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.15%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,检测波长为210 nm(盐酸黄柏碱、升麻素苷、欧前胡素)和350 nm(盐酸黄连碱、盐酸小檗碱),柱温为35℃,进样量为5μL。结果清热除湿祛风膏中盐酸黄柏碱、升麻素苷、盐酸黄连碱、盐酸小檗碱、欧前胡素分离度良好,分别在1.5~48μg/mL(r=0.9990),2~64μg/mL(r=0.9998),2.5~80μg/mL(r=0.9996),30~960μg/mL(r=0.9999),1~32μg/mL(r=0.9993)线性关系良好,平均加样回收率及RSD(n=6)分别为100.92%(RSD=1.35%),100.05%(RSD=0.59%),99.20%(RSD=2.31%),100.34%(RSD=1.24%),97.54%(RSD=1.38%)。结论所建方法经方法学验证稳定可靠,重复性好,可为清热除湿祛风膏的质量控制与评价提供参考。