清热利湿活血方口服配合中药灌肠对溃疡性结肠炎患者疗效及ICAM-1、VCAM-1影响

目的探讨清热利湿活血方口服配合中药灌肠对溃疡性结肠炎患者的疗效及细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管内皮细胞黏附分子-1(vascular endothelial cell adhesion molecule-1,VCAM-1)的影响。方法选取辽宁中医药大学附属第三医院溃疡性结肠炎患者98例随机分为两组,对照组49例采用美沙拉嗪肠溶片治疗;观察组49例在此基础上采用清热利湿活血方(黄连、黄芩、白头翁、茯苓、炒白术、炒薏苡仁、陈皮、木香、当归、地榆炭、白蔹)口服配合中药灌肠,每日1剂,持续治疗8周。记录两组患者血清ICAM-1、VCAM-1、T淋巴细胞亚群(CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+))水平及中医证候积分,比较两组临床疗效。结果对照组总有效率(83.67%)低于观察组(95.92%),差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗后血清ICAM-1、VCAM-1水平降低;治疗后,观察组与对照组比较血清ICAM-1、VCAM-1水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗后CD_(3)^(+)水平、CD_(4)^(+)水平及CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)比值升高,CD_(8)^(+)水平降低;治疗后,观察组与对照组比较CD_(3)^(+)水平、CD_(4)^(+)水平及CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)比值升高,CD_(8)^(+)水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗后腹痛、腹泻、便下脓血、肛门灼热等中医证候积分降低;治疗后,观察组与对照组比较腹痛、腹泻、便下脓血、肛门灼热等中医证候积分降低(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论清热利湿活血方口服配合中药灌肠对溃疡性结肠炎患者的疗效显著,可降低ICAM-1、VCAM-1,改善免疫功能和中医证候,且安全性高,值得大力推广。

清热活血方辅助治疗小儿过敏性紫癜临床观察

目的分析清热活血方辅助治疗小儿过敏性紫癜的效果。方法本研究选择2019年1月—2020年2月小儿过敏性紫癜患儿,数量为70例。给予患儿两种不同的治疗方式,并且随机将患儿分成观察组和对照组两组,每组人数分别为35例。其中对照组主要接受常规西医治疗,观察组主要在此基础上接受清热活血方辅助治疗,对比两组患儿的治疗效果、不良反应发生率、临床症状消失时间、治疗前后中医证候评分、生活质量、治疗前后腹痛、关节疼痛程度。结果观察组的治疗效果高于对照组(P<0.05)。观察组的腹痛、恶心、关节肿痛等不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。观察组的紫癜消失时间、腹痛消失时间、关节肿痛消失时间分别为(6.11±1.14)、(7.53±1.04)、(6.15±1.33),均要短于对照组(P<0.05)。观察组的治疗前后中医证候评分均低于对照组(P<0.05)。观察组的躯体指标、生理指标、心理指标、物质生活等生活质量均要高于对照组(P<0.05)。观察组的治疗前后腹痛、关节疼痛程度均低于对照组(P<0.05)。结论清热活血方辅助治疗小儿过敏性紫癜的效果显著。

基于LRG1/TGF⁃β信号轴探讨清热活血方调节“炎症-骨破坏”治疗类风湿关节炎的靶向作用机制

通过梳理前期相关研究,认为湿热证是类风湿关节炎(RA)的核心证候,清热活血方是治疗RA湿热证的有效方剂。“炎症-骨破坏”是RA的关键病理环节,也是清热活血方疗效的优势环节所在,富含亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)可介导转化生长因子⁃β(TGF⁃β)信号通路参与RA“炎症-骨破坏”病理过程,或可作为清热活血方治疗RA湿热证的疗效靶点蛋白。据此提出科学假说,即清热活血方可能通过靶向调控LRG1所介导的TGF-β信号通路调节“炎症-骨破坏”治疗RA,并设想后续通过临床研究证实清热活血方对LRG1的临床干预效应,通过动物实验明确清热活血方对LRG1/TGF-β信号轴的作用机制以及LRG1/TGF-β信号轴表达与否对清热活血方的疗效影响。

补肾益气活血化痰方治疗老年全身麻醉后认知障碍及对血清E2、T、Aβ、BNP的影响

目的研究补肾益气活血化痰方治疗老年全身麻醉后认知障碍及对患者血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、Tβ-淀粉样蛋白(Aβ)、脑钠肽(BNP)的影响。方法选择医院2017年10月—2018年9月诊治的老年全身麻醉后认知障碍96例作为研究对象,遵照知情同意原则并按照随机数字表法分为两组,每组48例。对照组采用常规西医治疗,观察组在常规西医治疗基础上采用补肾益气活血化痰方治疗。比较两组患者的治疗效果,简易精神状态量表(MMSE)与蒙特利尔认知评估量表(MoCA),患者血清E2、T、Aβ、BNP水平以及不良反应发生情况。结果观察组总有效率显著高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者的MMSE、MoCA评分差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗后1周、2周MMSE、MoCA评分均有改善,治疗后1周两组间MMSE、MoCA评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2周观察组MMSE、MoCA评分显著优于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者的血清E2、T、Aβ、BNP差异无统计学意义(P>0.05),治疗后1周、2周两组患者的血清E2、T、Aβ、BNP均有改善,但治疗后1周两组间各指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2周观察组的血清E2、T显著高于对照组,血清Aβ、BNP显著低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率为12.5%(6/48),对照组为10.4%(5/48),组间无显著性差异(P>0.05)。结论补肾益气活血化痰方治疗老年全身麻醉后认知障碍可获得满意的临床效果,能够降低患者的血清Aβ、BNP水平、升高血清E2、T水平,改善患者的认知功能,是有效安全的治疗方案。

活血化瘀方联合视网膜光凝术对瘀血阻络型糖尿病视网膜病变疗效观察

目的研究活血化瘀方联合视网膜光凝术对瘀血阻络型糖尿病视网膜病变治疗疗效影响。方法研究对象选取医院收治的瘀血阻络型糖尿病视网膜病变患者112例,采用随机数字表法将其分为对照组和观察者,每组各56例。对照组患者接受视网膜光凝术治疗,在此基础上,观察者患者给予活血化瘀方治疗。比较两组患者的治疗疗效,同时比较两组患者治疗前后的血清血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)及血浆内皮素-1(ET-1)等细胞因子水平和视力、视野平均敏感度及中医证候积分。结果观察组患者的治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患者的血清VEGF、PDGF、CysC及ET-1等细胞因子水平均明显低于对照组(P<0.01),视力和视野平均敏感度均明显高于对照组(P<0.01),中医证候积分均明显低于对照组(P<0.01)。结论活血化瘀方联合视网膜光凝术能明显提高瘀血阻络型糖尿病视网膜病变治疗疗效,改善微血管损伤和视力水平,促进患者病情恢复,值得在临床推广。

益气养阴活血利水方对视网膜脱离术后患者视网膜电图及MCP-1、ATP、IL-2水平的影响

目的探究益气养阴活血利水方联合妥布霉素地塞米松滴眼液对视网膜脱离术后患者视网膜电图及房水MCP-1、ATP、IL-2水平的影响。方法选取2017年12月—2018年12月于该院眼科就诊的50例视网膜脱离术后患者,以随机数字表法分为联合组(n=25)、常规组(n=25)。两组均行视网膜脱离术,术后常规组予妥布霉素地塞米松滴眼液治疗,联合组在常规组基础上予以益气养阴活血利水方治疗,两组均于手术2周后连续治疗6个周,随访1年。评估两组术后8周的视力疗效,比较两组术前、术后2周、术后8周的视网膜电图及术后2周、术后8周房水MCP-1、ATP、IL-2水平,统计两组术后1年视力及复发情况。结果治疗后,联合组患者总有效率为92.00%(23/25),高于常规组的52.00%(13/25)(P<0.05);术前、术后2周、术后8周两组暗适应视网膜电图a波振幅、b波振幅依次升高,且联合组高于常规组,术后8周明适应视网膜电图a波振幅、b波振幅高于术前,且联合组均高于常规组(P<0.05);术后8周,两组房水MCP-1、IL-2水平均低于术后2周,且联合组低于常规组,两组房水ATP水平高于术后2周,且联合组高于常规组(P<0.05)。随访1年,联合组患者术后1年视力高于常规组(P<0.05),联合组复发率(4.00%,1/25)与常规组(12.00%,3/25)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气养阴活血利水方联合妥布霉素地塞米松滴眼液能提高视网膜脱离术后患者房水ATP水平,降低房水MCP-1、IL-2水平,同时调节视网膜组织微环境,从而改善视网膜电图,提高患者视功能,且不会增加术后复发率。

补肾活血方联合常规西药治疗射血分数中间值心衰气虚血瘀证患者129例随机对照临床观察

目的评价补肾活血方治疗射血分数中间值心衰(HFmrEF)气虚血瘀证的临床疗效。方法将HFmrEF气虚血瘀证患者277例随机分为治疗组139例、对照组138例,对照组给予常规西药治疗,治疗组在对照组基础上加用补肾活血方,两组均治疗8周。比较治疗前后两组患者左心室射血分数(LVEF)、N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)水平、心功能分级、明尼苏达心力衰竭生活质量评分、焦虑评分、抑郁评分,以及治疗后6个月主要不良心血管事件发生率、再住院率情况。结果治疗组脱落10例、对照组脱落6例,实际完成治疗组129例、对照组132例。与本组治疗前比较,两组患者治疗后LVEF升高、NT-pro BNP水平降低(P<0.05);治疗后治疗组与对照组比较,LVEF升高、NT-pro BNP水平降低(P<0.05)。治疗组心功能分级改善总有效率(97.67%,126例/129例)高于对照组(84.09%,111例/132例)(P<0.05)。治疗后两组患者明尼苏达心力衰竭生活质量评分、焦虑评分、抑郁评分均较治疗前降低(P<0.05),且治疗组上述评分均低于对照组(P<0.05)。治疗后6个月两组患者均无死亡事件发生,治疗组主要不良心血管事件发生率(25.58%,33例/129例)与对照组(33.33%,44例/132例)比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组再住院率(14.73%,19例/129例)低于对照组(30.30%,40例/132例)(P<0.05)。结论补肾活血方可增加HFmrEF气虚血瘀证患者的LVEF,降低NT-pro BNP,提高生活质量,改善患者焦虑抑郁状态,降低再住院率。

益气活血方辅助治疗慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者58例随机对照临床研究

目的探讨益气活血方辅助治疗慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者的临床疗效和安全性。方法将120例慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者随机分为治疗组和对照组各60例,对照组给予常规西医基础治疗,治疗组在对照组基础上加用益气活血方配方颗粒口服,每日1剂。两组疗程均为8周。比较两组患者治疗前后中医症状积分、明尼苏达生活质量量表(MLHF-Q)评分、超声心动图指标[包括右室舒张末期内径(RVEDD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左房舒张末期内径(LAEDD)、肺动脉平均压(PAMP)]、六分钟步行距离(6MWD)、血浆N-末端B型利钠肽原(NT-ProBNP)水平。治疗后比较两组患者心功能疗效及中医证候疗效,并观察不良事件发生情况。结果治疗组和对照组各脱落2例,两组各58例纳入分析。治疗组心功能疗效及中医证候疗效总有效率分别为91.38%(53/58)及96.55%(56/58),均高于对照组的70.69%(41/58)、48.27%(28/58)(P<0.05)。与本组治疗前比较,治疗组患者治疗后中医症状积分、RVEDD水平明显降低,两组治疗后MLHF-Q评分、血浆NT-ProBNP水平、PAMP降低,6MWD升高(P<0.01)。治疗后组间比较,治疗组中医症状积分、MLHF-Q评分、血浆NT-ProBNP水平、PAMP水平低于对照组,6MWD高于对照组(P<0.01)。两组患者治疗后血、尿、便常规及肝肾功能指标均未出现明显异常,治疗过程两组各发生不良反应1例,发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在西医常规治疗基础上口服益气活血方可以显著提高慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者临床疗效,改善临床症状和心功能,提升患者生活质量和运动耐量,且安全性较好。

益气活血方治疗气虚血瘀证宫腔粘连患者随机对照临床观察

目的观察益气活血方联合手术及雌激素、孕激素序贯治疗气虚血瘀证宫腔粘连患者的临床疗效及安全性。方法选取2021年6月1日至2022年12月31日在中国中医科学院广安门医院收治的宫腔粘连患者64例,随机分为治疗组和对照组各32例,均接受宫腔镜下宫腔粘连分离术(TCRA)治疗。对照组术后予雌激素、孕激素序贯治疗,每日口服1片,前14天服雌二醇片,后14天服雌二醇地屈孕酮片。治疗组术后在对照组治疗的基础上联合益气活血方治疗,每日1剂。两组疗程均为3个月。观察两组患者临床疗效、中医证候积分、子宫内膜厚度、宫腔粘连评分、月经量积分及治疗结束3个月后的复粘率、妊娠率,并进行安全性评价。结果治疗组和对照组临床总有效率分别为90.63%、75.00%,两组临床疗效差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后子宫内膜厚度、月经量均较本组治疗前增加,宫腔粘连评分、中医证候积分较治疗前明显下降(P<0.05或P<0.01)。治疗后治疗组宫腔粘连评分、中医证候积分较对照组明显下降(P<0.05)。治疗组术后6个月妊娠率为37.50%,高于对照组的12.50%(P<0.05)。治疗组复粘率为3.13%,对照组为9.38%,两组复粘率比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组均未出现不良事件。结论益气活血方联合手术及雌激素、孕激素序贯治疗宫腔粘连气虚血瘀证术后患者,可促进子宫内膜恢复,增加月经量,改善患者临床症状,提高妊娠率及临床疗效,且安全性好。

补肾活血方对帕金森病模型小鼠回肠组织TLR/NF-κB通路及肠道菌群的影响

目的从肠道菌群探讨补肾活血方治疗帕金森病(PD)的可能作用机制。方法将72只雄性C57/BL6J小鼠随机分为空白组、模型组、美多芭组及补肾活血方低、中、高剂量组,每组12只。空白组小鼠腹腔注射10 ml/kg生理盐水,其余各组小鼠采用腹腔注射浓度为3 mg/ml的1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)30 mg/kg诱导PD小鼠模型,均每天1次,连续7天。造模成功后,补肾活血方低、中、高剂量组分别给予补肾活血方7.5、15、30 g/(kg·d)灌胃,美多芭组给予多美多芭片112.5 mg/(kg·d)灌胃,空白组和模型组予15 ml/(kg·d)蒸馏水灌胃,均每天灌胃1次,连续14天。采用爬杆实验、转棒实验、抓力实验和负重游泳实验评估小鼠行为学指标;16S rRNA高通量测序技术分析各组小鼠肠道菌群改变;Western Blot法测定小鼠回肠组织Toll样受体(TLR)/核因子κB(NF-κB)通路炎症因子[包括Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)、NF-κB、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)]蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠爬杆触底时间延长,抓力减小,转棒持续时间和游泳持续时间缩短,回肠组织中TLR2、TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-17蛋白表达均升高(P<0.01)。与模型组比较,美多芭组和补肾活血方低、中、高剂量组爬杆触底时间缩短,抓力增加,美多芭组和补肾活血方高剂量组转棒持续时间延长,回肠组织TLR2、TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-17蛋白表达均降低,而仅有补肾活血方高剂量组游泳持续时间延长(P<0.05或P<0.01)。与补肾活血方低剂量组比较,补肾活血方中、高剂量组爬杆触底时间缩短(P<0.05或P<0.01);补肾活血方高剂量组抓力增加,TLR2、TLR4、IL-17蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。肠道菌群结果显示,与空白组比较,模型组Dominance指数、Pielou_e指数、Shannon指数、Simpson指数差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,美多芭组Shannon指数、Chao1指数、Observed_otus指数,以及补肾活血方高剂量组Chao1指数、Observed_otus指数、Dominance指数、Pielou_e指数、Shannon指数、Simpson指数差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。在门水平上,各组差异具有统计学意义的菌门相对丰度类别包括变形菌门、拟杆菌门、厚壁菌门(P<0.05或P<0.01);在属水平上,各组差异具有统计学意义的菌属相对丰度类别包括Muribaculaceae、阿克曼菌属、幽门螺杆菌(P<0.05或P<0.01)。结论补肾活血方治疗PD的可能作用机制是通过重构紊乱的肠道菌群结构,减轻炎症反应进而达到改善PD运动功能的目的。

清热活血方治疗急性ST段抬高型心肌梗死的前瞻性、多中心队列研究

目的探讨清热活血方对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者随访1年时终点主要心血管事件(MACE)的影响。方法纳入在广州中医药大学第一附属医院住院的STEMI患者186例为观察组,在遵循西医指南规范化治疗基础上给予清热活血方治疗,每日1剂;同期纳入在南方五省共6家三级甲等西医院住院的STEMI患者176例为对照组,仅按西医指南规范化治疗。两组均治疗1周。以治疗1周后及发病30天、6个月、1年为时间点随访MACE发生情况。进一步行队列分组,以清热活血方治疗时间≥30天、<30天及无中药干预分为强暴露组(153例)、弱暴露组(33例)、非暴露组(176例),比较各组终点MACE发生情况,并采用COX回归模型分析生存时间与终点MACE及相关因素的关系。结果观察组与对照组的治疗1周后死亡率分别为1.1%(2/186)、1.7%(3/176),1年随访时死亡率分别为2.7%(5/186)、5.7%(10/176),两组比较差异均无统计学意义(P>0.05);观察组治疗1周后新发或加重心力衰竭、1年随访时因心力衰竭就诊或住院的比例均高于对照组(P<0.05)。Cox回归分析显示,应用清热活血方治疗是STEMI患者远期死亡的独立保护因素[HR=0.271(0.074,0.997),P=0.0495]。队列分组比较:1年随访时强暴露组患者1年内死亡率显著低于非暴露组(P<0.05),因心力衰竭就诊或住院发生率高于非暴露组(P<0.05),再发心肌梗死两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);强暴露组死亡、再发心肌梗死、因心力衰竭就诊或住院发生率较弱暴露组均显著减少(P<0.05);弱暴露组再发心肌梗死、因心力衰竭就诊或住院发生率较非暴露组均升高(P<0.05),两组死亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论西医指南规范化治疗基础上加用清热活血方是STEMI患者远期死亡的独立保护因素,可使患者的预后得到最大获益。

清热活血方对斑马鱼胚胎血管新生的影响及安全性

目的观察清热活血方对斑马鱼胚胎血管新生的抑制作用并探讨其安全性。方法选取受精后2天的斑马鱼胚胎120个,置于12孔板中,每孔10个。分为空白组、阳性药组和清热活血方50μg/ml、100μg/ml、150μg/ml、200μg/ml组,阳性药组给予浓度为50μg/ml瓦他拉尼(PTK787)3ml,清热活血方各浓度组给予相应浓度清热活血方3ml,各组连续给药72h,每24h更换暴露液,在体式显微镜下观察统计斑马鱼胚胎体节间血管指数及镜下荧光点数。通过预实验确定清热活血方最大非致死浓度(MNLD)为802μg/ml和最小全致死浓度(MTLD)为2560μg/ml,在此区间设定8个药物浓度,建立致死曲线,计算半数致死浓度(LD50)。选用1/10 MNLD(80μg/ml)、1/3 MNLD(267μg/ml)、MNLD 3个浓度作为毒性指标观察的给药浓度,给予药物暴露液3ml,连续给药72h,显微镜下计数斑马鱼胚胎心率,并记录各浓度清热活血方对各个脏器系统及其他表型指标产生的影响,包括斑马鱼胚胎卵黄、肠腔、肠褶皱、尾鳍等。结果与空白组比较,阳性药组及清热活血方100μg/ml、150μg/ml、200μg/ml组斑马鱼胚胎体节间血管指数及镜下荧光点数均降低(P<0.01)。清热活血方100μg/ml组、150μg/ml组、200μg/ml组之间比较,随着中药浓度的增加斑马鱼胚胎体节间血管指数显著降低(P<0.05),而各组斑马鱼胚胎镜下荧光点数仅有减少趋势而差异无统计学意义(P>0.05)。根据清热活血方致死曲线可得LD50为1200μg/ml,安全指数为5.1。与空白浓度比较,清热活血方267μg/ml、802μg/ml浓度干预时斑马鱼胚胎心率显著增快(P<0.01),80μg/ml浓度对斑马鱼胚胎心率影响不明显(P>0.05),267μg/ml浓度与802μg/ml浓度对斑马鱼胚胎心率增快的程度差异无统计学意义(P>0.05)。当浓度高于267μg/ml时,清热活血方对斑马鱼胚胎的发育表现出实质性的毒性作用,如肠褶皱消失、肠变性等。结论浓度为100μg/ml的清热活血方对斑马鱼胚胎有较强的抑制血管新生的作用,且具有安全性。

益气养阴活血通络方对特发性肺纤维化模型大鼠血小板活化及肺组织CD40-CD40L系统的影响

目的 基于CD40-CD40L系统探讨益气养阴活血通络方治疗特发性肺纤维化(IPF)的可能作用机制。方法 96只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、吡非尼酮组、益气养阴活血通络组,每组24只。除空白组外,其余各组大鼠采用气管内注射盐酸博来霉素制备IPF大鼠模型。造模次日吡非尼酮组采用吡非尼酮胶囊序贯方式灌胃,第1~7天给药剂量62.5 mg/(kg·d),第8~14天给药剂量125 mg/(kg·d),第15~28天给药剂量187.5 mg/(kg·d);益气养阴活血通络组给予益气养阴活血通络方颗粒剂18 g/(kg·d)灌胃;空白组和模型组每日给予10 ml/kg生理盐水灌胃。各组大鼠均每日灌胃1次,连续28天。分别于模型制备次日起第7、14、28天(各组每个时间点8只大鼠)时采用HE染色观察各组大鼠肺脏组织病理形态学变化;碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;酶联免疫吸附试验检测血清纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)、凝血因子Ⅸ(FⅨ)、凝血因子Ⅶ(FⅦ)、血小板因子4 (PF-4)表达水平;流式细胞术检测血小板CD41、CD62P表达水平;蛋白免疫印迹法检测肺脏组织CD40、CD40L蛋白水平。结果 空白组大鼠肺组织病理HE染色显示正常。模型组大鼠病理显示第7天时肺泡间隔增宽、腔内炎症细胞聚集,肺间质可见明显水肿;第14天时肺间质内可见胶原纤维增生;第28天时肺泡逐渐萎缩,胶原纤维大量沉积。与空白组同时间点比较,模型组大鼠第7、14、28天肺组织HYP含量,血小板CD41、CD62P表达水平,血清PAI、FⅨ、FⅦ、PF-4表达水平,肺组织CD40、CD40L蛋白水平均显著升高(P<0.01)。与模型组同时间点比较,吡非尼酮组和益气养阴活血通络组大鼠肺组织病理形态学显示炎症细胞浸润明显改善、纤维化程度显著减轻。各给药组大鼠第7、14、28天肺组织HYP含量,血小板CD41表达水平,血清PAI、FⅨ、FⅦ、PF-4表达水平,肺组织CD40、CD40L蛋白水平均有不同程度下降(P<0.05或P<0.01)。与吡非尼酮组比较,益气养阴活血通络组大鼠第7 d、14 d、28 d肺组织HYP含量及血清PAI、FⅨ、FⅦ、PF-4表达水平均下降,第7、28天血小板CD41、CD62P表达水平下降,第28天肺组织CD40蛋白水平下降(P<0.05或P<0.01)。结论 益气养阴活血通络方治疗IPF机制可能与抑制血小板活化和CD40-CD40L系统从而改善肺纤维化病理损伤有关。

清肺化痰活血方辅助治疗儿童重症支原体肺炎毒热闭肺证随机单盲临床研究

目的评价清肺化痰活血方辅助治疗儿童重症支原体肺炎毒热闭肺证的临床疗效。方法纳入重症支原体肺炎毒热闭肺证患儿78例,随机分为对照组、治疗组各39例。对照组采用西医基础治疗加中药麻杏石甘汤,治疗组采用西医基础治疗加清肺化痰活血方,两组均每日1剂。治疗10天后对比两组临床症状、体征评分、凝血功能及炎症指标的变化,并进行疗效评价。结果治疗组脱落4例,对照组脱落6例,最终纳入治疗组35例,对照组33例。治疗后治疗组患儿痊显率为74.28%,明显高于对照组的51.51%(P<0.05);治疗后两组患者症状、体征评分较治疗前均明显降低(P<0.05),且治疗组咳嗽、胸片X线指征、肺部体征评分明显低于对照组(P<0.05);治疗后两组患儿凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、D-二聚体(D-D)、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)均较治疗前明显下降(P<0.05),且治疗后治疗组PT、D-D明显低于对照组(P<0.05)。结论清肺化痰活血方辅助治疗重症支原体肺炎毒热闭肺证疗效确切,可显著改善患儿临床症状、体征及凝血功能。

温阳活血利水方含药血清对足细胞组织蛋白酶L、发动蛋白以及微丝、微管的影响

目的探讨温阳活血利水方治疗原发性肾病综合征蛋白尿的可能作用机制。方法将足细胞分为正常对照组、模型组、地塞米松组、10%中药血清组、20%中药血清组、空白对照组。除正常对照组、空白对照组外,其余各组用氨基核苷嘌呤霉素粉剂制备足细胞损伤模型。正常对照组和模型组加入完全培养基5 ml,地塞米松组加入392μg/L地塞米松5 ml,10%中药血清组、20%中药血清组、空白对照组分别加入10%中药血清、20%中药血清、空白对照血清各5 ml。RT-PCR法与Western blot分别检测各组足细胞胞浆组织蛋白酶L(CatL)、发动蛋白mRNA和蛋白表达含量,并用激光共聚焦观察各组中足细胞骨架微丝、微管的形态结构变化。结果与正常组比较,模型组CatL mRNA与蛋白含量升高,发动蛋白表达含量降低(P<0.01);与模型组比较,各中药血清组与地塞米松组CatL mRNA与蛋白表达含量降低,足细胞发动蛋白蛋白表达含量升高(P<0.01);与10%中药血清组比较,20%中药血清组CatL mRNA与蛋白表达含量降低,发动蛋白表达含量升高(P<0.01)。各组间足细胞发动蛋白mRNA表达含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论温阳活血利水方可能通过下调足细胞CatL的表达,减少CatL对发动蛋白的酶解,从而稳定细胞骨架中的微丝、微管等结构,减少足突融合,改善蛋白尿。

不同浓度益气活血方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖及VEGF表达的影响

目的探讨不同浓度益气活血方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖活力及血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法将8只SD大鼠随机分为空白对照组4只、益气活血方组4只,纯化培养BMSCs,采集空白对照组(灌胃蒸馏水)、益气活血方组(灌胃益气活血方)大鼠血清;将BMSCs分为空白血清对照组、5%、10%、20%益气活血方血清组,分别以含10%空白血清及含5%、10%、20%益气活血方血清培养液干预培养BMSCs。MTT法检测BMSCs增殖活力,ELISA法检测培养BMSCs上清液VEGF水平。结果第2天、第4天、第6天,10%益气活血方血清组BMSCs去基线增殖率较5%益气活血方血清组与20%益气活血方血清组明显增加(P<0.05或P<0.01);第2天、第4天组间BMSCs上清VEGF水平比较,10%益气活血方血清组明显高于空白血清对照组、5%益气活血方血清组、20%益气活血方血清组(P<0.01)。结论 10%益气活血方含药血清可明显提高BMSCs增殖能力,促进VEGF表达。

化痰祛湿活血方含药血清对HepG 2.2.15细胞乙型肝炎病毒复制能力及脂肪代谢相关基因表达的影响

目的探讨化痰祛湿活血方治疗慢性乙型肝炎(CHB)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的可能作用机制。方法60只SD大鼠随机分为恩替卡韦组、化痰祛湿活血方组、联合组和正常组,每组15只。恩替卡韦组给予恩替卡韦分散片0.5mg/(kg·d)灌胃,化痰祛湿活血方组给予化痰祛湿活血方颗粒剂15g/(kg·d)灌胃,联合组给予恩替卡韦分散片和化痰祛湿活血方颗粒剂灌胃,剂量同上,正常组给予正常饲料喂养,10天采血制备含药血清。细胞实验分为对照组、模型组、恩替卡韦血清组、化痰祛湿活血方血清组、联合血清组、激动剂组、联合+激动剂组,每组3个复孔。除对照组外,其余各组均用浓度50μmol/L油酸处理HepG 2.2.15细胞建立CHB合并NAFLD细胞模型。造模后对照组和模型组给予10%正常大鼠血清,恩替卡韦血清组、化痰祛湿活血方血清组、联合血清组给予10%相应血清,激动剂组给予10%大鼠正常血清+T0901317,联合+激动剂组给予10%联合血清+T0901317。培养48h后比较各组细胞活力、细胞凋亡率,检测细胞中肝X受体a(LXRa)、固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)mRNA表达和细胞培养上清液中乙型肝炎病毒(HBV)DNA含量。结果模型组和对照细胞活力和细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,恩替卡韦血清组细胞活力升高、细胞凋亡率降低,而激动剂组细胞活力降低、细胞凋亡率升高(P<0.01),化痰祛湿活血方血清组和联合血清组细胞凋亡率降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,模型组LXRa mRNA降低、HBV DNA含量升高(P<0.01);与模型组比较,化痰祛湿活血方血清组和联合血清组SREBP-1c mRNA降低,恩替卡韦血清组和联合血清组HBV DNA含量降低(P<0.01);激动剂组LXRa、SREBP-1c、FAS mRNA和HBV DNA含量均高于联合血清组,而联合+激动剂组LXRa、SREBP-1c mRNA低于激动剂组(P<0.01)。结论化痰祛湿活血方可能通过调控脂代谢相关基因表达影响肝细胞内脂肪合成,从而增强恩替卡韦抑制HBV DNA复制能力。

理气化痰活血方对冠状动脉微循环障碍模型大鼠血管内皮功能的影响

目的探讨理气化痰活血方对冠状动脉微循环障碍的影响及可能作用机制。方法健康雄性SD大鼠245只随机分为理气化痰活血方组、缬沙坦组、模型组各80只,空白组5只。除空白组外,其余3组均采用经心尖部向左心室注射月桂酸钠的方法建立大鼠冠状动脉微循环障碍模型。理气化痰活血方组及缬沙坦组术前1天及术后4周分别给予理气化痰活血方药(浓度2.25 g/ml)、缬沙坦悬浊液(浓度8.89 mg/ml)1 ml/100 g灌胃,模型组及空白组给予1 ml/100 g蒸馏水灌胃,均每日1次。实验期间观察各组大鼠死亡情况;理气化痰活血方组、缬沙坦组、模型组分别于术后1 h、24 h、1周、2周、3周、4周各时间点随机处死5只大鼠,空白组4周时处死,检测各组大鼠血清内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)、血管性血友病因子(vWF)浓度及心肌组织纤维介素(fgl 2)mRNA表达。结果模型组、理气化痰活血方组、缬沙坦组大鼠总计分别死亡44只、40只、42只,3组大鼠术中及术后死亡情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后4周时,模型组大鼠较空白组血清ET-1浓度升高,vWF浓度降低(P<0.01),血清NO浓度和心肌组织fgl 2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组同时间比较,理气化痰活血方组和缬沙坦组术后1 h、24 h、1周、2周、3周、4周血清ET-1浓度降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组和缬沙坦组同时间比较,术后4周理气化痰活血方组血清NO浓度升高,vWF浓度降低(P<0.05或P<0.01)。术后2周、3周理气化痰活血方组心肌组织fgl 2 mRNA表达显著低于模型组(P<0.01)。结论理气化痰活血方可能通过降低冠状动脉微循环障碍大鼠血清ET-1、vWF浓度及心肌组织fgl 2 mRNA表达,升高血清NO浓度,从而起到保护血管内皮功能的作用。

益气活血方及其拆方对冠心病心力衰竭气虚血瘀证患者心功能及血浆miRNA差异表达的影响

目的 探究益气活血方治疗冠心病心力衰竭气虚血瘀证的疗效及可能作用机制。方法 将160例冠心病心力衰竭气虚血瘀证患者随机分为益气活血组、活血组、益气组、对照组,每组40例。各组患者均给予西医规范治疗,在此基础上对照组给予中药模拟剂、益气活血方组给予益气活血方颗粒剂、益气方组和活血方组分别给予益气活血方拆方的益气药颗粒剂和活血药颗粒剂,各组中药颗粒剂均每次半剂口服,早晚各1次,均治疗3个月。治疗前后各组均进行中医证候评分并观察心功能分级分布情况,治疗后采血进行血浆差异miRNA指标筛选,各组两两比较对miRNA差异靶基因进行预测,将差异靶基因再进行GO富集分析、KEGG富集分析。结果 试验过程中各组均有脱落,最终对照组33例,益气组、益气活血组各34例,活血组37例纳入统计分析。与本组治疗前比较,各组治疗后中医证候积分均明显降低,心功能分布差异具有统计学意义(P<0.01);与对照组治疗后比较,益气组、活血组、益气活血组心功能分级分布差异均有统计学意义,益气活血组中医证候积分明显降低(P<0.05或P<0.01);治疗后益气组、活血组、益气活血组组间两两比较,心功能分级分布差异均具有统计学意义(P<0.01)。差异表达miRNA筛选最终共获得5组比较结果,益气组与对照组比较,共有1个miRNA发生了上调,预测未获得目标靶基因;活血组与对照组比较,共有1个miRNA发生了上调,预测得到15个靶基因,涉及的KEGG通路主要为缺氧诱导因子1 (HIF-1)信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B (PI3K-Akt)信号通路等;益气活血组与对照组比较,共有4个miRNA发生了上调,预测得到65个靶基因,涉及的KEGG通路主要为丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、酪氨酸激酶受体(ErbB)信号通路等;益气活血组与益气组比较,共有1个miRNA发生了上调,预测得到37个靶基因,涉及的KEGG通路主要为钙通路、3’,5’-环磷酸腺苷(cAMP)通路等;活血组与益气组比较,共有3个miRNA发生了下调,预测得到76个靶基因,涉及的KEGG通路主要为Ras相关蛋白1(Rap1)信号通路、昼夜节律、维甲酸诱导基因1 (RIG-1)信号通路、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路等。结论 在规范西药治疗的基础上加用益气活血方能进一步改善患者临床症状及心功能,其机制可能与调节MAPK、ErbB等信号通路有关。

化痰活血益气方对异丙肾上腺素诱导的心肌肥厚大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

目的:探讨化痰活血益气方的抗心肌肥厚作用及对心肌间质Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响。方法:采用异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚模型(1 mg/kg,sc,连续10 d),48只大鼠随机分为6组:正常组、模型组、化痰活血益气方组(4.88 g/kg、9.77 g/kg、19.53 g/kg)和卡托普利组(0.02 g/kg)。14 d相应药物干预后,测定左心室重量指数(left ventricle mass index,LVMI)、全心重量指数(heart mass index,HMI),行HE染色测量心肌细胞表面积、行Masson染色测量胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF),免疫组化法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,实时荧光定量RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达,Western blot检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组的LVMI、HMI、心肌细胞表面积、CVF以及Ⅰ、Ⅲ型胶原在形态学、mRNA、蛋白质层面的表达均明显升高;与模型组比较,化痰活血益气方组(4.88 g/kg、9.77 g/kg、19.53 g/kg)和卡托普利组的LVMI、HMI、心肌细胞表面积、CVF以及Ⅰ、Ⅲ型胶原在形态学、mRNA、蛋白质层面的表达均有不同程度的降低,化痰活血益气方9.77 g/kg组的上述各项指标始终存在显著性差异。结论:化痰活血益气方可以有效改善异丙肾上腺素诱导的心肌肥厚并降低Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。