柑橘中氨苄青霉素QuEChERS-液质联用检测方法的建立及残留降解动态测定

建立基于石墨化多壁碳纳米管(G-MWCNTs)的改良QuEChERS法结合液质联用技术测定柑橘中氨苄青霉素(Ampicillin)的简便、快速、准确的检测方法。在优选的色谱及质谱条件下,首先考察不同提取溶剂对氨苄青霉素提取回收率的影响;然后考察4种吸附剂的用量对氨苄青霉素回收率的影响,并优化净化剂使用量。结果表明,氨苄青霉素在0.5~100ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))均大于0.999,基质效应(matrix effect,MEs)在9.0%~21.2%之间,低、中、高(2、40、200μg/kg)3水平下的平均回收率为85.9%~102.4%,相对标准偏差(Relative Standard Deviation,RSD)为2.1%~5.8%,检测限(Limit of Detection,LOD)和定量限(Limit of Quantity,LOQ)分别为1.0μg/kg和4.0μg/kg。在降解动态试验中,氨苄青霉素在沃柑和脐橙中的降解半衰期分别为1.2d和1.1d。该方法简便、快速、灵敏、准确,可为柑橘的质量评价提供有效的检测方法。

模拟胃液结合液质联用研究紫苏对内源性亚硝胺的阻断作用

为研究蔬菜对亚硝胺的阻断效果,在模拟胃液环境下结合液质联用,研究紫苏提取液对内源性亚硝胺的阻断作用。结果表明,在模拟胃液环境下加入紫苏液与亚硝酸钠,亚硝酸钠清除率可达10.4%。加入紫苏液、亚硝酸钠和二乙胺进行液相色谱质谱检测,空白样品和添加紫苏的样品中二乙基亚硝胺生成量分别为0.2、0.1 ng/mL,抑制率达到50%。添加紫苏的膳食中N-亚硝基二甲基(NDMA)、N-亚硝基二乙基(NDEA)、N-亚硝基二丁基(NDBA)、N-亚硝基吡咯烷(NPYR)含量显著降低。NDMA、NDEA在空白膳食中含量均为0.2 ng/g,紫苏试验组均未检出。NDBA空白对照为0.4 ng/g,紫苏试验组为0.2 ng/g,抑制率为50%;NPYR空白对照为8.6 ng/g,紫苏试验组为4.9 ng/g,抑制率为43%。因此,紫苏对内源性亚硝胺有明显的阻断作用。

基于高分辨液质联用技术与网络药理学探讨泽苓定眩汤物质基础

目的:采用高分辨液质联用技术结合网络药理学分析泽苓定眩汤作用靶点,同时与基于药材饮片的网络药理学预测作用靶点比较。方法:采用Q-Orbitrap高分辨液质联用技术对苓定眩汤复方制剂进行天然产物成分鉴定,并对其结构进行解析,使用pharmmapper数据库和Uniprot数据库对具有3D结构的化合物进行检索,获取对应的蛋白质及靶点信息。将上述数据库所得靶点信息进行合并,从而得到基于天然产物成分鉴定所筛选出化合物所对应的靶点集合(集合A)。使用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and A-nalysis Platform,TCMSP)数据库收集泽苓定眩汤组方中各药材已报道有效成分及对应靶点信息,并采用上述相同方法获取组方药材对应的已知靶点集合(集合B)。将集合A和集合B取交并集,采用蛋白相互作用分析数据库STRING绘制蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络图,利用Metascape平台对基因进行富集分析。结果:采用高分辨液质联用技术对泽苓定眩汤复方制剂进行天然产物成分鉴定,共得到582个化合物,其中与数据库比对匹配程度得分≥80分的化合物共计93个,在Pubchem中可检索到64个化合物的3D结构,基于天然产物筛选出的化合物所对应的靶点共计550个。将泽苓定眩汤中七味药材使用TCMSP数据库可得到157个靶点,其预测出的靶点数量明显少于基于天然产物成分鉴定所得靶点数量,两者交集靶点共计55个。基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析共得到519条富集结果,其中包含55个经典通路,京都基因与基因组百科全书(kyoto ency-clopedia of genes and genomes,KEGG)富集结果得到140条代谢通路。结论:采用高分辨液质联用技术结合网络药理学所得到的泽苓定眩汤靶点和富集结果更加全面。

基于液质联用技术比较郁香忍冬花蕾与金银花化学成分

目的 比较郁香忍冬花蕾与金银花的成分差异,评估郁香忍冬花蕾药用价值,为其开发利用提供参考。方法 以70%甲醇为提取溶剂,以UPLC-TOF-MS分析成分种类,以HPLC-QQQ-MS测定成分含量,经多元统计分析确定成分差异。结果 在郁香忍冬花蕾与金银花中共鉴定出52种成分,20种定量成分含量差异显著,金银花有4种差异成分,郁香忍冬花蕾的异绿原酸C、阿魏酸、木犀草苷、芦丁含量是金银花的2倍以上,马钱酸、马钱苷含量分别是金银花的11.96、37.23倍。马钱苷、异绿原酸A、马钱酸、芦丁及断马钱酸是区分郁香忍冬花蕾及金银花的关键差异成分。结论 郁香忍冬花蕾与金银花成分种类相近,但含量差异明显,郁香忍冬花蕾具有重要药用价值,可进一步开发利用。

基于液质联用和模拟炮制的诃子汤制狼毒大戟减毒机制研究

目的基于液质联用(LC-MS)和模拟炮制初探诃子汤制狼毒大戟的减毒机制。方法采用LC-MS分析狼毒大戟诃子汤制前后和狼毒大戟生品二氯甲烷部位诃子汤模拟炮制后的化学成分变化;小鼠分别灌胃给予狼毒大戟生品乙醇提取物、狼毒大戟水制品乙醇提取物、诃子汤乙醇提取物、狼毒大戟诃子汤制品乙醇提取物、狼毒大戟生品二氯甲烷提取物、狼毒大戟诃子汤制品二氯甲烷提取物、狼毒大戟生品二氯甲烷部位诃子汤模拟炮制提取物,以粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平以及肠道病理损伤情况评价诃子汤制狼毒大戟和诃子汤模拟炮制狼毒大戟生品二氯甲烷部位的毒性变化。结果狼毒大戟中共鉴定出115种化合物,诃子汤中共鉴定出53种化合物。狼毒大戟经诃子汤炮制后有58种化合物的含量显著降低,12种化合物的含量显著升高。与空白对照组相比,狼毒大戟生品组及其水制品组的粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平均显著升高(P<0.01),肠道损伤明显。与狼毒大戟生品组相比,诃子汤组和狼毒大戟诃子汤制品组的粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平均显著降低(P<0.01),肠道损伤得到修复。狼毒大戟生品二氯甲烷部位经诃子汤模拟炮制后,二萜类化合物和鞣质酚酸类化合物的离子强度变化率分别为-6.75%~8.09%和66.06%~100.00%。狼毒大戟诃子汤制品二氯甲烷部位二萜类化合物的离子强度变化率为-9.92%~54.72%,无鞣质酚酸类化合物。与空白对照组相比,狼毒大戟生品二氯甲烷部位组和狼毒大戟诃子汤制品二氯甲烷部位组的粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平均显著升高(P<0.01),肠道损伤严重。与狼毒大戟生品二氯甲烷部位组相比,狼毒大戟生品二氯甲烷部位诃子汤模拟炮制组的粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平显著降低(P<0.01),肠道未见明显损伤。结论诃子汤制能缓和狼毒大戟肠道毒性,其减毒机制可能是狼毒大戟在炮制过程中引入的诃子汤中大量的鞣质酚酸类化合物在动物体内起到了药理拮抗作用。

超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用法同时测定荔枝中4种细胞分裂素

【目的】应用超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪(UPLC-MS/MS),建立一种同时测定荔枝反式玉米素核苷(tZR)、异戊烯基腺嘌呤核苷(IPR)、二氢玉米素(DHZ)、异戊烯基腺嘌呤(IP)4种细胞分裂素含量的方法。【方法】0.25 g荔枝样品用乙腈-水(80∶20,体积比)溶液浸提8 h,经Bond Elut Plexa PCX固相萃取柱纯化,2.5%氨水甲醇洗脱后过0.22μm有机滤膜检测。选取XSelect HSS T3色谱柱,以甲醇和5 mmol·L^(-1)甲酸铵水溶液为流动相进行7 min梯度洗脱,采用电喷雾正离子(ESI+)模式电离,选择反应监测(MRM)模式对细胞分裂素进行定量。【结果】4种细胞分裂素的检出限和定量限分别低于18.12和60.39 pg·g^(-1),在0.05~50 ng·mL^(-1)质量浓度范围内呈良好的线性关系,线性相关系数(r2)大于0.999。在高、中、低浓度三种加标水平下,4种细胞分裂素的平均回收率为80.0%~108.2%,标准偏差为0.8%~15.5%。采用建立的方法可以同时检测出荔枝果皮、果肉、种子、幼果、叶片和果柄离区中4种细胞分裂素含量。【结论】该方法简便、快速、灵敏、准确,适用于荔枝不同组织中细胞分裂素含量的测定。

基于液质联用和网络药理学探讨天花粉防治糖尿病的作用机制

目的 通过超高效液相色谱联用质谱技术(UPLC-MS)分析中药天花粉中的化合物成分,结合网络药理学和分子对接技术探究天花粉防治糖尿病的作用机制。方法 应用液质联用技术解析天花粉水提物,获取天花粉成分及结构并筛选得到潜在活性成分。通过Swiss Target Prediction数据库对潜在活性成分进行靶点预测,从GeneCards数据库收集糖尿病相关疾病靶点并取二者交集靶点。应用STRING网站和Cytoscape软件构建蛋白质互作网络并筛选得到核心靶点。将核心靶点导入Metascape网站进行GO和KEGG分析。结果 液质联用解析得到天花粉15种药物成分,筛选出Cucurbitacin D(葫芦素D)等6种潜在活性成分,分析得61个天花粉防治糖尿病靶点。GO富集分析主要包括脂肪酸代谢、单羧酸代谢、类固醇羟化酶活性等脂质代谢和氧化应激相关进程。KEGG富集分析主要涉及胰岛素抵抗、内分泌抵抗、糖尿病并发症的AGE-RAGE信号通路等糖尿病防治密切相关的通路。分子对接发现天花粉可能通过Cucurbitacin D作用STAT3、MAPK14、PIK3CA等关键靶点实现改善糖尿病的效果。结论 天花粉具有潜在防治糖尿病的功效,其机制可能是通过Cucurbitacin D等活性成分改善胰岛素抵抗及内分泌抵抗,调控AGE-RAGE等信号通路,从而起到防治糖尿病的作用。

液质联用技术在生物毒素食品安全检测分析中的应用

生物毒素广泛存在于自然环境和农产品中,是一种结构多样且种类繁多的物质。值得强调的是,含有此类物质的食物往往具有致毒性,严重威胁着人类的正常生活。在此背景下,科学家们针对生物毒素提出并发展了多种检测分析技术,包括免疫荧光法、质谱法等。其中,液质联用技术表现出了显著的高特异性和高灵敏度。基于此,文章针对液质联用技术的应用展开阐述。

基于高分辨液质联用的双标记氨基酸同位素丰度测定方法研究

近年来,稳定同位素标记化合物,尤其是同位素标记氨基酸在合成生物学、蛋白质组学、代谢组学等前沿科学研究中发挥着越来越重要的作用。建立了一种基于高分辨液质联用的双标记氨基酸同位素丰度检测方法,以^(13)C_(2),^(15)N-甘氨酸为例,考察了样品浓度、质谱扫描张数等影响因素对同位素丰度计算结果的影响,结果表明该方法具有良好的准确性和稳定性,所需样品用量少,操作简单,有望成为一种简便、通用的同位素试剂质控方法;也将为代谢组学、海洋学等同位素示踪技术应用研究提供数据支持。

基于球包球填料的液质联用技术应用考察

液质联用已经成为最广泛应用的蛋白质复合物分离鉴定研究方法,具有高效率、高分辨、高灵敏度以及低进样量的优势。本文构建了基于新型球包球填料的纳流液相色谱串联质谱联用分析平台,并考察了其对牛血清白蛋白酶解产物的分析。

液质联用技术在农产品质量安全领域的应用

随着经济的发展和技术的进步,在高质量发展的基础上创造高品质生活已经成为现阶段人民的普遍需求。加强农产品安全检测,保证食品安全迫在眉睫。本文主要介绍了液质联用技术的发展概况、应用优势和注意事项,阐述了其在种植业农产品和动物源性食品中药物残留检测、生物毒素检测中的应用情况,总结了液质联用技术的具体应用要点及最新研究成果,并探索未来发展趋势,旨在为检测行业从业人员提供一定的参考。

液质联用技术在农产品农残检测中的应用研究进展

随着人们生活水平的提高,农产品安全问题越来越受到关注。农药残留是农产品安全的重要问题之一,而液质联用技术在此领域的应用研究也日益受到重视。液质联用技术是指将液相色谱与质谱技术结合起来的一种分析方法,具有高分离能力、高灵敏度、高特异性等优点,被广泛应用于化合物鉴定、代谢组学、药物代谢等研究领域。在农产品农残检测中,液质联用技术可以用于检测农产品中的农药残留,为农产品安全提供有力保障。

三重四级杆液质联用测定乳酸环丙沙星中哌嗪的残留量

建立液质联用法测定乳酸环丙沙星中哌嗪残留量的方法。采用C18色谱柱分离,串联四级杆质谱多反应离子监测方式检测,外标法定量。哌嗪浓度在0.021~1.28μg/m L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.998),平均回收率为98.9%(RSD=1.61%)。方法专属性强、重复性好、灵敏度高,可用于乳酸环丙沙星中哌嗪残留量测定。

液质联用结合手性固定相法拆分辛弗林对映体

建立了液质联用结合手性固定相法拆分辛弗林对映体的方法。考察了流动相的组成、pH值、盐浓度、柱温及质谱检测条件对辛弗林对映体分离的影响。采用资生堂Chiral CD-Ph色谱柱(250mm×4.6mm),流动相为乙腈-10mmol·L^(-1)乙酸铵溶液(8∶92)(甲酸调节pH值至5.0);流速为0.5mL·min^(-1);柱温:40℃;质谱采用电喷雾正离子多反应监测模式,母离子为168.1,子离子为150.2(定量)、135.2。辛弗林对映体在10~1000ng范围内线性关系良好,检出限(S/N=3)为2.5ng。辛弗林对映体能实现基线分离,分离度为2.2。该方法简便、快速,适用于辛弗林对映体的分离。

SinCHERS-液质联用法测定豆芽中2种植物生长调节剂

本试验旨在建立一种高效、灵敏且准确的SinCHERS-液质联用法用于检测豆芽中6-苄基腺嘌呤以及4-氯苯氧乙酸2种植物生长调节剂。豆芽样品用含1%甲酸的乙腈溶液提取目标物,然后加入萃取盐包盐析分层,经过基质分散净化装置(SinCHERS)净化,采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱进行分离,以含有0.1%甲酸的10 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液和乙腈溶液梯度洗脱,采用负离子监测模式检测,外标法进行定量。本试验的线性关系良好(r>0.999)、检出限低(约0.14μg·kg^(-1))且回收率高(85.43%~94.51%),为2种植物生长调节剂的监测和质量控制提供有力的技术支持。

基于液质联用技术分析磨盘草石油醚部位在大鼠血浆中的成分

目的:分析磨盘草石油醚部位在大鼠血浆中的成分,为磨盘草有效成分的分析提供依据。方法:采用液质联用技术分析磨盘草石油醚部位在大鼠血浆中的成分,选取不同时间点的血浆确定成分入血时间。结果:60 min抽取的血浆里具有明显的药物入血成分,与磨盘草石油醚部位样品的UPLC-QTOF-MS的比较,共有5个成分吸收入血,可将其归为4类,分别是葡萄糖苷酸类化合物、鞘脂类化合物、非离子表面活性剂类和类似于环氧千金-二萜醇-二乙酰苯乙酰酯的化合物。结论:运用UPLC-QTOF-MS技术鉴别磨盘草石油醚部位在大鼠血中移行成分,不仅得到了分离度良好的色谱峰,还可以节省时间及试剂的消耗。

固相萃取-高效液相色谱-三重四级杆质谱联用法测定一次性静脉留置针中痕量双酚A的方法优化

目的:通过优化固相萃取(SPE)等各项参数,建立固相萃取纯化静脉留置针中双酚A(BPA)含量样品的处理方法。方法:样品经固相萃取柱净化并富集BPA,采用液质联用法(HPLC-MS/MS)测定。结果:建立了一种HPLC-MS/MS法测定静脉留置针中BPA含量样品的固相萃取方法。结论:该方法条件优良,可有效纯化和富集静脉留置针中的痕量BPA,便于准确测定样品中BPA的含量。

液质联用技术在医药院校药物分析专业实验教学中的应用

液相色谱-质谱联用技术是一门综合性分析技术,在样品分离及结构鉴定中发挥着重要的作用。本文以双黄连口服液主要药效物质分析实验的教学为例,把液质联用技术引入到药物分析专业的本科实验教学中,介绍了方法建立、色谱分离、质谱鉴定和数据分析完整的实验流程,可以增强该专业本科生对前沿研究技术的了解,开拓学生的视野,对于培养该专业学生的科研创新思维、实践能力和问题分析能力起着非常重要的作用,也为培养更多高水平技术人才做准备。

基于液质联用法检测污水中14种毒品及代谢物研究

为了对区域毒品滥用情况加以控制,本文提出了一种液质联用法对污水中的毒品以及代谢物进行检验。为了验证该方法有效,设计实验室验证,在经过固相萃取之后,使用超纯水进行净化处理,随后再次应用甲醇、氨水甲醇等对溶液进行洗脱处理,完成氮吹定容之后,利用液相色谱串联质谱对其展开检测。实验证明该方法可对污水中的14种常见毒品进行精准检验,进而形成良好的检测效果,可在各污水区域展开检测从而实现对毒品的有效控制。

改进QuEChERS-液质联用法测定食品中6种非食用色素

建立了QuEChERS提取和净化样品的改进方法,利用超高效液相色谱-三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)同时测定食品中6种非食用色素碱性橙Ⅱ、罗丹明B、苏丹红Ⅰ~Ⅳ的方法。针对不同基质样品采用乙腈或乙腈-水萃取、低温冷冻、C18净化、液相分离后多反应离子监测模式(MRM)测定。对红酒、葵花籽、糖果的检测结果表明,6种非食用色素的方法检出限为1.0~20.0μg/kg;回收率为72.4%~114.7%,相对标准偏差(RSD)为3.7%~11.3%。与传统前处理方法相比,该方法在有机试剂消耗量、时间上均可节省50%以上。