QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定野生菌中的15种蘑菇毒素

目的基于线性离子阱质谱的多重反应监测-信息依赖采集-增强子离子扫描(multiple reaction monitoring-information dependent acquisition-enhanced product ion scan,MRM-IDA-EPI)二级谱图筛查方法,建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)定量检测和定性筛查野生菌中15种蘑菇毒素。方法野生菌样本通过甲酸-甲醇-水-乙腈(1:40:40:19,V:V:V:V)混合溶液超声提取,QuEChERS试剂提取净化,采用UPLC-MS/MS和MRM-IDA-EPI方法对15种蘑菇毒素进行定量分析和定性筛查。结果通过野生菌样本前处理方法和色谱条件优化,对15种蘑菇毒素进行0.04、0.10和0.40 mg/kg三水平加标回收实验,方法准确度为76.6%~109.2%,精密度为0.3%~7.6%;15种蘑菇毒素的线性范围为10~1000μg/L,线性相关系数(r)在0.9980~0.9994之间;其中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、光盖伞素和鹅膏蕈氨酸的方法检出限(limits of detection,LODs)和定量限(limits of quantification,LOQs)分别为10μg/kg和30μg/kg,二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽、羧基三羟鬼笔毒肽、毒蝇碱、蝇蕈醇、甲基裸盖菇素、鹿花菌素、脱磷酸裸盖菇素、奥来毒素和鬼伞菌素的LODs和LOQs分别为20μg/kg和60μg/kg,采用QuEChERS前处理方法对野生菌样本进行处理,样本基质效应系数K值在0.91~1.08之间。结论所建立的野生菌样本前处理方法对15种蘑菇毒素的定量测定无基质干扰,15种蘑菇毒素的UPLC-MS/MS和MRM-IDA-EPI分析方法结果准确、重现性好、灵敏度高,该方法适用于有毒野生菌引起的食源性中毒定量分析和定性筛查。

QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定大米中14种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂残留量

目的 建立QuEChERS-液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)测定大米中14种琥珀酸脱氢酶抑制剂(succinate dehydrogenase inhibitor,SDHI)类杀菌剂(氟吡菌酰胺、吡噻菌胺、萎锈灵、联苯吡菌胺、吡唑萘菌胺、氟唑环菌胺、氟唑菌苯胺、氟苯吡菌胺、呋吡菌胺、氟酰胺、氟啶酰菌胺、氟吡菌酰胺-苯甲酰胺、甲呋酰胺、噻呋酰胺)残留的分析方法。方法 样品经乙腈提取后,用QuEChERS法净化浓缩,Symmetry C;色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm)分离,在碰撞能量为(35±15) eV条件下,采用多级反应监测触发增强子离子扫描模式(multiple reaction monitoring-information dependent acquisition-enhanced product ion,MRM-IDA-EPI)进行定性分析并建立增强子离子扫描谱库,LC-MS/MS外标法定量。结果 该方法具有较高的灵敏度,14种SDHI类杀菌剂的定量限为0.10μg/kg;在0.05~5.00μg/L质量浓度范围,线性相关系数大于等于0.99936,平均回收率在82.5%~108.3%之间,相对标准偏差在2.1%~11.9%之间。结论 该方法前处理过程简便、灵敏度高,通过谱库比对,定性准确性大大提高,适用于大米中SDHI类杀菌剂残留的定性定量分析。

QuEChERS-UPLC-MRM-IDA-EPI法测定巴比妥类药物的临床监测

目的 :建立检测生物样本(全血、尿液、唾液)中所含巴比妥、苯巴比妥、异戊巴比妥药物成分的QuEChERS-超高效液相色谱(UPLC)-多重反应监测(MRM)-条件触发(IDA Criteria)-增强子离子扫描(EPI)检测方法。方法 :色谱柱为Waters Atlantis T3 C_(18),100 mm×2.1 mm,3μm;柱温为40℃;流动相为含0.1%甲酸的5 mmol/L甲酸铵水溶液及乙腈,梯度洗脱15 min;流速为0.2 mL/min;以优化后的质谱参数采集信号。结果 :检出限浓度为0.5 ng/mL;定量限浓度为1.0 ng/mL;线性范围为定量限浓度～200 ng/mL;在线性范围内相关系数在0.999以上;加标回收率为88.0%～96.8%。结论 :本方法准确,灵敏度高,专属性好;能用于生物样本(全血、尿液、唾液)中巴比妥、苯巴比妥、异戊巴比妥化学成分的同时定性及定量检测。

基于LC-MS/MS的酸枣叶总黄酮中6种成分定性定量分析

目的建立一种基于LC-MS/MS的酸枣叶总黄酮中槲皮素-3-O-洋槐糖苷、芦丁、金丝桃苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮苷、槲皮素6种化学成分的定性和定量测定方法。方法采用沃特世T 3色谱柱进行分离,柱温35℃,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 ml/min;多反应监测-触发增强子离子扫描(MRM-IDA-EPI)模式检测。结果酸枣叶总黄酮中6种化学成分的峰面积和浓度在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,r均大于0.9995。重复性结果RSD值均小于5%,符合药典规定要求。加样回收率为99%-108%,精密度RSD为1.83%-2.95%。总黄酮中槲皮素-3-O-洋槐糖苷、芦丁、金丝桃苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮苷、槲皮素的含量分别为10.4%,8.3%,0.1%,0.3%,0.2%,0.005%。结论本研究所建立方法基于多反应监测-信息依赖获取-增强产物离子(MRM-IDA-EPI)模式,可以实现一次进样同时定性定量分析,而且本研究结果为后期酸枣叶总黄酮药效及药动学研究提供稳定、可控的物质基础。

酸枣仁总黄酮的制备及质量控制研究

目的制备高纯度酸枣仁总黄酮提取物并建立一种同时测定7个黄酮成分的质量控制方法。方法采用正丁醇萃取和D101型大孔树脂洗脱相结合的方法制备酸枣仁总黄酮提取物。以ACQUITY UPLC■HSS T3柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm)为分析柱,流动相采用乙腈-0.1%甲酸水,流速为0.3 ml/min,采用多重反应监测(MRM)-条件触发(IDA)-增强子离子扫描(EPI)的扫描模式,对酸枣仁总黄酮中的当药黄素、维采宁Ⅱ、山奈酚-3-O-芸香糖苷、斯皮诺素、异牡荆素、6'''-阿魏酰斯皮诺素、芦丁7个成分进行定性定量分析。结果制备了含量高达58%的酸枣仁总黄酮,当药黄素、维采宁Ⅱ、山奈酚-3-O-芸香糖苷、斯皮诺素、异牡荆素、6'''-阿魏酰斯皮诺素和芦丁在0.025~1μg/ml,0.125~5μg/ml,0.04~4μg/ml,1~60μg/ml,0.05~1μg/ml,1.5~30μg/ml和0.05~2μg/ml的线性范围内均具有良好的线性关系,r均大于0.9995。加样回收率为97.45%~106.41%。制备的酸枣仁总黄酮中当药黄素、维采宁Ⅱ、山奈酚-3-O-芸香糖苷、斯皮诺素、异牡荆素、6'''-阿魏酰斯皮诺素、芦丁的含量分别为(1.95±0.05)mg/g,(9.66±0.18)mg/g,(12.71±0.15)mg/g,(214.35±1.66)mg/g,(1.86±0.05)mg/g,(78.02±1.21)mg/g和(3.98±0.10)mg/g。结论本研究建立了一种灵敏、快速并能同时测定7种黄酮的LC-MS/MS分析方法,可为后期药效学和药动学研究提供稳定、可控的物质基础。