慢病毒载体介导RNA结合蛋白-5对肺腺癌细胞系H1299的增殖和凋亡的影响

目的探讨慢病毒载体介导RNA结合蛋白-5(QKI-5)对肺腺癌细胞凋亡的影响。方法应用GV358(过表达)和GV248(抑制表达)载体分别构建针对QKI-5基因的慢病毒过表达载体和抑制表达载体,转染293T细胞产生慢病毒颗粒,收集并测定慢病毒滴度。将经测序鉴定的QKI-5过表达的慢病毒或抑制表达的慢病毒转染到肺腺癌细胞H1299,Real-time PCR检测QKI-5 mRNA表达,集落形成实验检测H1299细胞增殖情况,膜联蛋白V(annexin V)、碘化丙啶(PI)检测H1299细胞凋亡情况,Western blotting检测促凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8表达。结果成功构建QKI-5过表达慢病毒载体和抑制表达慢病毒载体,与对照组比较,QKI-5过表达后,QKI-5mRNA表达增加,细胞集落形成减少,肺腺癌细胞早期凋亡增加,促凋亡蛋白Caspase-8表达增加;QKI-5抑制表达后,QKI-5 mRNA表达降低,细胞集落形成增加,但肺腺癌细胞凋亡无明显变化,然而促凋亡蛋白Caspase-8表达减少。结论慢病毒介导QKI-5抑制增殖,可能通过Caspase-8促进肺腺癌细胞系H1299的凋亡。

震颤同系物-5过表达对卵巢癌细胞A2780增殖和凋亡的影响

目的:探讨RNA结合蛋白震颤同系物-5(QKI-5)在卵巢癌细胞中的表达以及对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:通过免疫印迹实验(Western blot)检测正常卵巢上皮细胞和卵巢癌细胞中QKI-5的表达差异,并选取QKI-5相对表达水平最低的卵巢癌细胞进行过表达慢病毒感染,构建稳定转染细胞系后通过细胞增殖和毒性分析(CCK8)和平板克隆实验检测细胞增殖和克隆能力的变化,通过流式细胞仪检测过表达QKI-5对卵巢癌细胞凋亡的影响。结果:Western blot实验结果显示,在卵巢癌细胞中QKI-5的表达水平相比正常卵巢上皮细胞显著降低,三株卵巢癌细胞中A2780细胞的QKI-5表达水平相对最低,通过慢病毒感染成功构建了稳定过表达QKI-5的A2780细胞系。CCK8和平板克隆实验结果显示,过表达QKI-5基因后A2780细胞增殖活力和克隆形成能力受到抑制(P<0.05)。流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示,QKI-5表达水平的增加能够显著促进A2780细胞的凋亡(P<0.05)。结论:RNA结合蛋白QKI-5在卵巢细胞中表达水平异常降低,QKI-5表达特异性扩增后能够抑制卵巢癌细胞A2780增殖和克隆形成能力并促进癌细胞发生凋亡。

汶川地震灾后26例急性应激反应心理危机干预综合分析

汶川大地震后,作者对绵阳安置点内来自北川县的26例灾民采用聆听观察、访谈、当事人自诉等方法收集资料,发现17例都有痛失亲人的遭遇;正常心理反应4例,神经衰弱反应2例,恐惧反应8例,抑郁反应9例,精神病反应3例。对评断为精神病反应的3例进行了及时的转介。同时发现:社会支持系统与个体内在因素相互作用,影响问题的形成和发展。采用支持性陪伴、积极宣泄、(交互式)放松、理性情绪疗法和认知行为疗法等短期治疗策略有效。作者认为灾后急性心理危机干预后续干预的长期性必须引起社会的普遍关注。建立统筹协调的可持续发展的灾后心理干预工作系统和运行机制势在必行。

QKI-5在三阴乳腺癌组织中的表达及其意义

目的 :利用免疫组织化学方法检测RNA结合蛋白quaking 5(QKI-5)在人三阴乳腺癌组织中的表达,探讨QKI-5在乳腺癌转移过程中的作用。方法:采用组织芯片技术,检测30对人三阴乳腺癌组织及其对应癌旁组织中的QKI-5蛋白水平表达情况,并对表达情况与临床病理参数间的关系进行分析。构建能稳定过表达QKI-5的细胞株MDA-MB-231和稳定敲减QKI-5表达的细胞株4T1,并对其迁移功能进行测定。结果 :肿瘤组织中的QKI-5表达率(13.3%)较对应癌旁组织(53.3%)低(χ2=10.8,P<0.05);且肿瘤组织中QKI-5的阴性表达与患者的淋巴结转移及肿瘤直径有关(P=0.025,P<0.05;P=0.015,P<0.05);体外迁移实验结果显示,过表达QKI-5的MDA-MB-231细胞的迁移能力下降(t=3.0,P<0.05),而敲减QKI-5表达的4T1细胞的迁移能力提升(F=22.9,P<0.05)。结论:QKI-5在人三阴乳腺癌组织中低表达,而其低表达可能是促进三阴乳腺癌淋巴结转移的重要原因。