祛风扶正散调控TLR4/NF-κB信号通路治疗周围性面瘫的作用机制

目的探讨祛风扶正散调控Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路治疗周围性面瘫的作用机制。方法建立RAW264.7细胞炎症模型,用不同浓度祛风扶正散受试物处理炎症模型细胞,采用Griess reagent法检测细胞一氧化氮(NO)的分泌量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、前列腺素2(PEG 2)的水平,活性氧荧光探针(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)的水平,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞TNF-α、IL-1βmRNA的表达,蛋白印迹法(Western blot)检测细胞p65、磷酸化p65(p-p65)、IκBα、磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白表达。结果祛风扶正散可显著降低炎症模型细胞NO、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6及PEG 2表达水平(F=338.731~5790.712,P<0.01),下调TNF-α、IL-1βmRNA表达(F=134.430、168.217,P<0.01),抑制p-p65和p-IκBα蛋白表达、IκBα降解及p65核易位(F=17.793~97.613,P<0.01)。结论祛风扶正散治疗周围性面瘫的作用机制可能与抑制本病相关TLR4/NF-κB信号通路的活化及其下游促炎性细胞因子、炎症递质的释放有关。