Plasmid mediated antibiotic resistance of Vibrio cholerae Ol biotype E1 Tor serotype Ogawa associated with an outbreak in Kolkata,India

Objective:To determine the antibiotic resistance of Vibrio choleras(V.cholerae) O1 biotype El Tor serotype Ogawa isolates involved in an outbreak of watery diarrhea in Kolkata,and to explore the role of plasmid in mediating antibiotic resistance.Methods:Antibiotic susceptibility and minimum inhibitory concentration(MIC) values of antibiotics for the isolated V.cholerae 01 Ogawa(n=12) were determined by disk diffusion and agar dilution methods,respectively,using ampicillin(Am),chloramphenicol(C),trimethoprim(Tm),tetracycline(T).erythromycine(Er), nalidixic acid(Nx).ciprofloxacin(Cp),amikacin(Ak) and cefotaxime(Cf).Plasmid curing of multidrug resistant(MDR) V.cholerae 01 Ogawa strains was done following ethidium bromide treatment.Following electrophoresis,the plasmid DNAs,extracted from the isolated MDR V. cholerae O1 Ogawa strains and their cured derivatives,were visualized and documented in ’gel doc’ system.Results:The outbreak causing V.cholerae O1 Ogawa isolates were MDR as determined by disk diffusion susceptibility test,and MIC determination.The isolates showed three different drug resistance patterns:AmTmTErNx(for 6 isolates).TmTErCp(for 5 isolates), and AmTniNx(for one isolate),and showed uniform sensitivity to C,Ak and Cf.The loss of plasmids with the concomitant loss of resistance to Am,Tm,T and Er of the isolates occurred following ethidium bromide treatment.Conclusions:The current findings suggest that the V. cholerae O1 Ogawa associated with the cholera outbreak were MDR,and resistance to Am,Tm,T and Er among the isolates were plasmid mediated.

鹅不食草水煎剂对绿脓杆菌R质粒体外消除作用的实验研究

目的 探讨中药鹅不食草水煎剂对绿脓杆菌R质粒的消除作用。方法 对临床分离的绿脓杆菌R质粒进行了检测,并选用中药鹅不食草水煎剂对该质粒进行了体外消除试验。结果 体外药物作用24h、48h、72h,R质粒消除率分别为0.7％、4.7％、46.3％,SDS对照组分别为0.3％、0.7％、1.7％。结论 鹅不食草对耐药质粒有较强的消除作用。

黄芩甙对铜绿假单胞菌R质粒的消除作用

测定黄芩甙对铜绿假单胞菌R质粒的消除作用 ;以携带R质粒的铜绿假单胞菌株PA16为靶细菌 ,以黄芩甙作为R质粒消除剂 ,进行R质粒体内外消除试验 ;体外消除实验结果表明 ,黄芩甙对PA16的消除率为 5 .1% ,明显高于空白对照组 ,也高于EB对照组的结果 ;体内R质粒消除率为 12 .0 % ,明显高于对照组 ;黄芩甙在体内外对铜绿假单胞菌R质粒具有较强的消除作用 ,为其实际应用提供实验依据。

黄连对大肠杆菌R质粒消除作用的实验研究

本研究以中药黄连的提取物为质粒消除剂，用携带Ｒ质粒的多重耐药性大肠杆菌Ｅ．１０２株为靶细菌，进行了体外Ｒ质粒消除作用的实验研究。同时观察了黄连作用不同时间，对大肠杆菌Ｒ质粒消除作用的影响。实验结果表明：黄连具有消除Ｒ质粒的作用。经黄连作用２４ｈ，消除率为２．４２％，延长作用时间至４８ｈ，其消除率提高为２２．５７％。细菌丢失的耐药性可以表现为单一或两种耐药性的丧失。

4种中药复方对大肠杆菌、沙门氏菌R质粒的消除作用

为研究不同中药复方对大肠杆菌、沙门氏菌2种临床耐药菌株R质粒的消除作用,以三黄汤等4种中药复方水煎剂为质粒消除剂,以临床分离的多重耐药大肠杆菌及沙门氏菌为靶细菌,采用肉汤二倍稀释法和影印培养法进行质粒消除试验。结果显示,4种中药复方对2种临床耐药菌R质粒均有消除作用(消除率0.7%～9.3%),不同中药复方耐药性消除子均丢失2～3个质粒条带(2 000～21 000bp),并丢失耐药表型。表明4种中药复方对耐药大肠杆菌和沙门氏菌R质粒均有消除作用。

黄芩甙对痢疾杆菌R质粒体外消除作用的实验研究

以携带R质粒的痢疾杆菌F_(13)株为靶细菌,以黄芩甙作为R质粒消除剂,进行R质粒体外消除试验。实验组R质粒的消除率为0.3%,对照组中SDS的消除率为0.6%,吖啶橙的消除率0.42%。琼脂糖凝胶电泳结果显示,消除子都丢失了相应的质粒带。

千里光水浸液对大肠埃希菌R质粒的消除作用

目的探讨千里光对大肠埃希菌R质粒消除作用。方法对尿路感染患者尿液中分离的大肠埃希菌R质粒进行检测,并选用中药千里光水浸液对该质粒进行了体外、体内消除实验。体外实验:千里光水浸液亚抑菌浓度分别作用大肠埃希菌24,48,72 h后,影印培养,计数消除子数;体内实验:建立肠道去污染小鼠动物模型后,经口感染大肠埃希菌,同时给千里光水浸液,灌胃给药,每只2 mg/d,分别于给药后24,48,72 h后处死小鼠,分离培养细菌,计数消除子数。消除子经质粒抽提琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果体外药物作用24,48,72 h后,R质较消除率分别为:0.2%,2.2%,3.8%;SDS对照组分别为12.1%,14.9%,23.7%,体内药物作用24,48,72 h R质粒消除率分别为0%,3.1%,14.4%,对照组分别为0%,0.1%,0.1%。结论中药千里光水浸液对大肠埃希菌R质粒于体内、体外均具有消除作用,体内消除作用强于体外。

五倍子对铜绿假单胞菌R质粒消除作用的实验研究

探讨中药五倍子提取液对铜绿假单胞菌R质粒的消除作用。对老年呼吸系统感染患者痰中分离的铜绿假单胞菌R质粒进行了检测 ,并选用中药五倍子提取液对该质粒进行了体外体内消除试验。结果可见 ,体外药物作用 2 4 ,4 8,72hR质粒消除率分别为 0 ,10 .2 % ,3.4 % ,SDS对照组分别为 0 ,0 .8% ,1.6 %。体内药物作用 2 4 ,4 8,72h ,R质粒消除率分别为 0 ,2 % ,13.6 % ,对照组均为 0。可见 ,中药五倍子提取液对铜绿假单胞菌R质粒在体外、体内均具有消除作用 ,体内消除作用强于体外。

淋病奈瑟菌流行菌株耐药性及R质粒的研究

目的 了解淋病奈瑟菌流行株对抗生素的耐药性及R质粒的携带情况。方法 对广东省湛江地区 1998～ 1999年分离鉴定出的 98株淋病奈瑟菌流行株 ,应用纸片扩散法测定细菌对 10种抗生素的敏感性 ,并采用碱裂解法进行质粒抽提 ,分析R质粒的分布情况。结果 淋病奈瑟菌对环丙沙星、四环素、氯霉素、青霉素高度耐药 ,耐药率分别为 82 .6 5 %、6 9.39%、5 0 %、32 .6 5 % ;质粒提取后 ,检出 42 .5kb、39.5kb、7.4kb、4.2kb四种质粒 ,其中 7.4kbR质粒达到 5 9.16 %。结论 湛江地区淋病奈瑟菌对多种抗生素均耐药 ,耐药谱型达 42种 ,R质粒为 7.4kb“亚洲型质粒” 。

白头翁提取液对铜绿假单胞菌R质粒的消除作用

目的探讨中药白头翁提取液对铜绿假单胞菌R质粒的消除作用。方法对老年呼吸系统感染患者痰中分离的铜绿假单胞菌R质粒进行了检测,并选用中药白头翁提取液对该质粒进行了体外、体内消除试验。结果中药白头翁提取液体外作用24,48,72h后,R质粒消除率分别为0,1.8%,3.4%,十二烷基磺酸钠(SDS)对照组分别为0,0.8%,1.6%。中药白头翁提取液体内作用24,48,72h后,R质粒消除率分别为0,2%,12.8%,对照组均为0。结论中药白头翁提取液对铜绿假单胞菌R质粒在体外、体内均具有消除作用,体内消除作用强于体外。

中药单方或复方对大肠埃希菌R质粒消除作用的研究

目的系统评价中药单方或复方对大肠埃希菌R质粒的消除作用。方法检索万方数据库、中国期刊全文数据库。纳入中药单方或复方对大肠埃希菌R质粒消除作用的实验研究。结果共纳入4个研究,中药消质剂包括:克痢痧、三黄片、止痢灵、盐酸小檗碱、千里光、黄芩等。Meta分析结果表明,中药消质剂消质效果优于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);相对危险度(95%可信区间)为20.91(15.06,29.02)。但总体上中药消质剂消质作用低于化学消质剂—十二烷基硫酸钠;复方中药消质剂消质效果优于非复方中药消质剂,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中药消质剂是消除大肠埃希菌R质粒影响的一个方向,采用复方是提高效果的有效方法。

由R质粒介导的大肠杆菌耐药性及消除

细菌的耐药性普遍存在,R质粒是介导大肠杆菌耐药性的主要遗传因子。本文就R质粒介导的大肠杆菌耐药性,R质粒的消除做一综述。旨在为细菌恢复对抗生素的敏感性提供参考。

黄芩对去污染小鼠体内痢疾杆菌R质粒消除试验研究

本文以去污染的瑞士小白鼠为模型用黄苓对福氏痢疾杆菌F13株的R质粒进行了体内消除试验。选用红霉素、四环素和利福平对小鼠肠道进行去污染,降低其定居阻力,然后用福氏痢疾杆菌F13株经口感染,同时利用四环素造成一种选择压力,以利于对四环素耐药的F13株菌生长繁殖。利用小鼠肠道菌群重建的间隙,进行R质粒的消除试验。结果表明,黄芩对福氏痢疾杆菌F13菌株R质粒在体内具有一定的消除作用。

中西药消除耐药质粒pR_(ST98)的研究

目的 用SouthernBlot杂交法检测中、西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒pRST98的结果。方法 用氧氟沙星和中药双黄连对携带pRST98的伤寒杆菌、大肠杆菌和鼠伤寒杆菌进行亚抑菌浓度的质粒消除试验 ;用地高辛标记的氨苄青霉素和四环素耐药基因探针进行SouthernBlot。结果 SouthernBlot杂交结果显示两种药物作用后pRST98上的耐药基因并未丢失 ,但同一质粒耐药基因在不同宿主菌中表达不同 ,导致最小抑菌浓度 (MIC)变化有明显差异。结论 氧氟沙星和双黄连能降低pRST98宿主菌的耐药性。

止痢灵对痢疾杆菌F_13株R质粒体外及体内消除作用的对比实验研究

应用中药止痢灵作为R质粒的消除剂,以痢疾杆菌F_(13)株为靶细菌进行R质粒的体内、体外消除实验。结果表明:止痢灵体外消除率AP为4.6％、TC为6.0％、SM为3.8％,止痢灵在去污染小鼠体内消除率AP为6.73％、TC为8.96％、SM为5.71％。从消除R质粒的表型来看,体内消除作用可表现为单一或多重耐药性的丢失,而体外试验仅表现为单一耐药性的丢失。

变形杆菌的耐药性及接合性R质粒的检测

本文报告了从烧伤病人感染创面分离、鉴定的35株变形杆菌的药敏试验及接合性R质粒的检测结果。35株变形杆菌双测试的6种抗菌药物都具有不同程度的耐药性。其中,对6种药物同时耐受的有26株(74.3％)。对其中的27株做了接合试验,接合性R质粒的检出率为70.4%。

黄芩和黄连对大肠杆菌R质粒消除作用的实验研究

目的：研究黄芩和黄连对大肠杆菌Ｒ质粒的消除作用。方法：以黄芩和黄连的提取物为质粒消除剂，携带Ｒ质粒的多重耐药性大肠杆菌Ｅ．１０２株为靶细菌，采用倍比稀释法和影印培养法及Ｋａｄｏ法，观察黄芩和黄连作用不同时间对大肠杆菌Ｒ质粒表达的影响。结果：黄芩和黄连作用２４ｈ，对大肠杆菌Ｒ质粒的消除率为５％～２．４２％，延长时间至４８ｈ，消除率为２６．１４％～２２．５７％。两个时间的消除率差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）。Ｒ质粒消除表型可以表现为单一或两种耐药性的丢失。

不同因素对奇异变形杆菌（PM10）R质粒消除的影响

本文报告了应用消除剂（ＳＤＳ．ＥＢ）和高温条件下对奇异变形杆茵ＰＭ１０Ｒ质粒的消除作用。实验结果表明：０．００１％ＳＤＳ对四种耐药性Ｒ质粒的消除率在０．４—０．８，消除类型为Ｋｍ＋Ｓｍ。ＥＢ和高温条件下未获得质粒消除株。

大蒜芦荟液消除R质粒的实验研究

目的:探讨大蒜芦荟混合液对大肠杆菌耐氯霉素(CM)R质粒和痢疾杆菌耐氯霉素(CM)R质粒消除作用。方法:将大蒜芦荟混合液作为R质粒消除剂,消除痢疾杆菌耐CM质粒和大肠杆菌耐CM质粒。结果:经大蒜芦荟液作用的大肠杆菌和痢疾杆菌在含CM中国蓝培养基和含CMSS培养基均不生长,但在不含CM中国蓝培养基和不含CMSS培养基都能生长。结论:大蒜芦荟混合液对大肠杆菌和痢疾杆菌的R质粒在体外均具有消除作用,说明大蒜芦荟液有预防肠道菌耐药性作用。

伤寒杆菌耐药质粒pR_(ST98)与细菌外膜泡的关系

目的 研究伤寒杆菌耐药质粒 pRST98与细菌外膜泡 (OMV)形成的关系。方法 将 ( 1)携带 pRST98的野生型耐药伤寒杆菌———ST1及ST2 ;( 2 )不含 pRST98的野生型敏感伤寒杆菌———ST3及ST4 ;( 3 )不含质粒的大肠杆菌———E .coliK12 W14 85;( 4)用十二烷基硫酸钠消除 pRST98的突变体菌株———ST1(R-)及ST2 (R-) ;和 ( 5 )经接合转移将pRST98导入敏感型伤寒杆菌及大肠杆菌的接合子———pRST98/ST3、pRST98/ST4 及pRST98/E .coliK12 W14 85用于实验 ,用透射电镜观测细菌在有无 pRST98时 ,OMV形成的差异。结果 携带 pRST98的耐药伤寒杆菌消除 pRST98前后 ,不含 pRST98的敏感伤寒杆菌和大肠杆菌在导入该质粒前后 ,细菌形成OMV的数量和形态均无明显变化。