制冰片介导Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路改善心肌细胞H/R损伤

目的研究天竺黄制冰片对缺氧/复氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)诱导H9C2心肌细胞损伤的保护作用及潜在作用机制。方法通过给予H9C2心肌细胞不同的缺氧时间体外模拟缺血再灌注损伤,测定损伤后H9C2心肌细胞中超氧化物歧化酶(superioxide diamutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogense,LDH)水平,评估模型是否成功建立。MTT方法测定天竺黄、冰片及制冰片对H9C2细胞的安全浓度范围,并检测天竺黄、冰片及制冰片对H/R诱导后心肌细胞中MDA、SOD和LDH生成的影响。采用Real-time PCR和Western blot方法检测天竺黄制冰片对H/R诱导H9C2细胞中Bcl-2、Bax和Caspase-3基因和蛋白的表达。结果缺氧6 h,复氧4 h,心肌细胞存活率小于50%,细胞中MDA和LDH水平显著增加,SOD活性显著降低,成功模拟缺血再灌注模型。天竺黄、冰片及制冰片在12.5~100μg/mL浓度范围内,对心肌细胞活力均没有影响。天竺黄(6.25~100μg/mL)对H/R诱导的H9C2细胞活力没有显著影响;冰片(25~100μg/mL)显著增加H/R诱导的H9C2细胞活力(P<0.05),制冰片(25~100μg/mL)极显著增加了H/R诱导的H9C2细胞活力(P<0.01)。同时,与模型组相比,冰片和制冰片分别给药均降低了H/R诱导的心肌细胞中MDA和LDH的水平,提高了SOD的活性,且同浓度制冰片调节作用优于冰片。同时,天竺黄制冰片通过上调了Bcl-2基因和蛋白表达,下调Bax、Caspase-3基因和蛋白表达,发挥抑制细胞凋亡的作用。结论天竺黄制冰片可通过调控Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路阻碍心肌细胞凋亡,进而达到保护心肌的作用。

参附注射液对大鼠急性心肌梗死I/R损伤的心肌保护机制研究

目的研究参附注射液对大鼠急性心肌梗死(AMI)再灌注(I/R)损伤的心肌保护作用并探讨其机制。方法选取健康大鼠60只,随机分为空白组、模型组、参附组,各20只。模型组、参附组大鼠采用套扎左冠状动脉前降支以复制AMI模型。造模成功后,模型组给予常规口服阿司匹林肠溶片100 mg、硫酸氢氯吡格雷片75 mg、阿托伐他汀钙片20 mg,每天1次,连续1周;参附组在模型组治疗基础上给予股静脉注射参附注射液(2.1 ml/kg),每日2次,连续1周;空白组大鼠不进行造模处理,给予常规饲养,仅按造模组大鼠用药剂量于每日9时、17时给予腹腔注射等量生理盐水,连续1周。观察各组大鼠7 d内的存活情况,并于末次给药后24 h时处死3组大鼠,观察比较3组大鼠心脏组织病理学变化、心肌组织细胞凋亡指数、lncRNA-GAS5、miRNA-210以及EFNA3的表达及心肌细胞再生程度。结果参附组大鼠的存活率为70.00%,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色可见参附组心肌细胞形态较模型组相比更为接近空白组心肌细胞形态;参附组大鼠的细胞凋亡率、lncRNA-GAS5和EFNA3表达量较模型组明显下降,而miRNA-210相对表达量较模型组明显升高,心肌细胞再生程度显著升高,与模型组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论参附注射液在改善急性心肌梗死I/R心肌细胞功能方面具有重要保护作用,为中医药在急性心肌梗死心肌损伤治疗靶点提供思路。

IL-33通过miR-19a-3p/MAPK6通路影响心肌缺氧/复氧损伤的机制研究

目的 探讨白细胞介素-33(IL-33)通过miR-19a-3p/MAPK6通路对心肌缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及可能的分子机制。方法 建立H/R诱导的新生小鼠心肌细胞体外模型,使用IL-33进行预处理,向心肌细胞中转入miR-19a-3p mimic,以上调miR-19a-3p表达,转入miR-19a-3p inhibitor,以抑制miR-19a-3p表达,转入pc DNA-MAPK6以上调MAPK6表达。通过Caspase-3活性、细胞凋亡ELISA法和原位细胞凋亡染色检测心肌细胞凋亡。Target Scan数据库预测miR-19a-3p的潜在靶点,双荧光素酶检测报告显示miR-19a-3p与MAPK6之间关系;RT-qPCR法检测心肌细胞miR-19a-3p和MAPK6 mRNA表达,Western blot法检测MAPK6蛋白表达。结果 IL-33预处理可以抑制H/R诱导的miR-19a-3p表达下调和细胞凋亡。双荧光素酶测定报告显示,miR-19a-3p靶向调控MAPK6。IL-33抑制了H/R诱导的MAPK6表达上调,过表达MAPK6减弱了IL-33对H/R的抗凋亡作用。过表达miR-19a-3p抑制了H/R诱导的MAPK6表达上调,而敲低miR-19a-3p可以消除IL-33对H/R诱导的MAPK6表达下调。结论 IL-33通过调控miR-19a-3p/MAPK6信号通路,减少H/R诱导的心肌细胞凋亡。

谷氨酰胺对肠黏膜上皮细胞I／R损伤细胞凋亡及其基因表达和信号转导的影响

本研究旨在观察谷氨酰胺（Gin）对肠上皮I／R损伤细胞凋亡及其基因表达和信号转导的影响，现报道如下。

心梗损伤保护的新进展(下)——粘附分子、内皮细胞和局部RAS

这里将在上篇的基础上继续讨论与I/R损伤过程关系十分密切的几个因素:a)粘附分子Cell Ad-hesion Molecules;b)内皮素和一氧化氮Endothelinand Nitric Oxide;c)局部肾素-血管紧张素系统Renin angiotension System,RAS,并对心肌I/R损伤的保护做出综合评价.

飞行时间质谱技术在肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤研究中的应用

目的应用MALDI-TOFMS技术检测和探讨肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠血清中蛋白质组学的变化。方法制备大鼠肾脏I/R模型后,分别于再灌注后6、12、24h选取各组血清样本,经MALDI-TOFMS分析检测,并对各组具有差异的多肽指纹图谱鉴定分析。用SPSS13.0软件对数据进行处理。同时采用Mascot Search进行蛋白质数据库检索以确定其性质。结果①本研究中血清经IMAC-Cubead处理后,在m/z为2081Da处,检测得到具有统计学意义的多肽指纹图谱;②采用Mascot Search,进行了蛋白质数据库检索,均鉴定为大鼠纤维蛋白原片段。结论纤维蛋白原在肾脏缺血/再灌注损伤中可能起重要作用。

肠缺血再灌注损伤的病理机制研究进展

肠缺血再灌注（ischemiaReperfusion,I/R）损伤是急性肠梗阻、创伤、休克、肠套叠、急性肠系膜动脉栓塞等常见疾病重要的病理生理过程,其病理机制复杂,包括炎症、凋亡、坏死等.在缺血时,细胞代谢障碍及组织结构发生损害.但是重新恢复血液灌注时,会加重缺血的组织细胞损伤.根据缺血再灌注损伤的相关机制,诸多实验已经进行有效肠I/R损伤的治疗,减轻肠道损伤[1,2].

肝脏缺血再灌注损伤与氧化应激

肝脏缺血再灌注损伤（ I/R）是指各种原因导致的肝脏组织经历一段时间的缺血后恢复其血供，此时不仅不能使肝脏的生理功能得到恢复，反而加重其结构和功能损伤的病理生理过程。肝脏I/R常常继发于肝移植、失血性休克、肝切除等临床问题，具有较高的发病率和病死率[1]。为改善肝脏I/R患者的预后，国内外学者进行了大量的系统研究，肝脏I/R损伤也因此成为普外科的重要研究热点之一。目前的研究指出，肝脏I/R损伤的发病机制与体内氧自由基（ ROS）的大量产生和抗氧化系统功能失衡导致的氧化应激损伤密切相关[2]。本文就此内容进行文献综述如下。

缺血后处理对小肠缺血-再灌注损伤大鼠肠系膜微循环的影响

目的:观察缺血后处理对小肠缺血/再灌注损伤大鼠肠系膜微循环变化的影响。方法:64只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、缺血/再灌注(I/R)组、缺血后处理(I-postC)组及缺血预处理(IPC)组,分别于再灌注2h、12h观测肠系膜微循环、肠壁血流量和血流动力学的变化,并按Hackel氏分度法判定肠道出血损伤情况。结果:与Sham组比较,I/R组平均动脉压、±dp/dtmax明显降低(P<0.05),小肠明显水肿、出血,Hackel氏分度显著升高(P<0.01);I-postC组与IPC组动脉压和±dp/dtmax明显高于I/R组(P<0.05),上述小肠病理变化明显减轻(P<0.05);I-postC明显减轻I/R所致的细动静脉收缩(P<0.05)、血流速度减慢(P<0.05)和微血管内白细胞贴壁滚动、粘附;肠缺血再灌注2h时,I-postC组肠壁血流量降低程度较I/R组减轻(P<0.05),与IPC的保护效果接近。结论:I-postC通过改善微循环减轻小肠I/R损伤。

肝细胞中Steap3敲除通过抑制TAK1保护肝脏缺血再灌注损伤

【据《Hepatology》2020年3月报道】题:肝细胞中Steap3敲除通过抑制TAK1保护肝脏缺血再灌注损伤(作者Guo WZ等)肝脏缺血再灌注(I/R)损伤仍然是影响肝移植预后的主要挑战。目前尚无有效的策略来改善肝脏I/R损伤后的肝功能障碍。前列腺六跨膜上皮抗原3(Steap3)是调节铁代谢的关键因子,研究报道其参与多种细胞的免疫和凋亡过程。然而,Steap3在肝脏I/R损伤中的作用仍不清楚。

小肠缺血再灌注损伤的研究进展

缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤是在缺血的基础上恢复血流后,组织器官的损伤反而加重的现象,是外科常见的一种损伤.由于小肠为体内最大的细菌库和淋巴库,小肠缺血再灌注除了会引起局部组织的损伤外,更会由于细菌和毒素的释放,移位到体循环而引起网状内皮系统发生系列反应,甚至发生多系统器官功能不全综合征(SIRS),故对于小肠的I/R损伤研究目前倍受重视.对于小肠缺血再灌注损伤机制人们先后提出了能量衰竭、氧自由基损伤、白细胞黏附、内皮细胞损伤与递质病等一系列学说.在近几年提出的细胞层面、基因层面和病理生理学层面上的一些新论断,使机制的研究进一步完善和准确.目前对于小肠缺血再灌注损伤的病理生理机制尚不清楚,人们先后提出了一系列学说,并针对可能的机制进行了许多研究,提出了许多防治的方法,有预处理法、药物疗法、祖国传统医药疗法及一些基因、细胞层次上的疗法,也都取得了很好的效果.本文就小肠缺血再灌注损伤的机制、防治方法这两方面研究现状作一概述.

乌司他汀对肝脏缺血再灌注损伤的防护作用

目的探讨肝脏缺血再灌注(I/R)损伤的发生机制,观察乌司他汀(UTI)对肝脏I/R损伤的保护作用。方法选择外伤性肝破裂手术中行肝门阻断术患者38例,随机分为I/R组和UTI组各19例。观察肝脏I/R后血清TNF、MDA、AST、ALT变化及再灌注肝组织多形核白细胞(PMN)浸润和肝组织形态学变化。结果I/R组:血清TNF、MDA、AST、ALT显著升高,肝组织PMN浸润明显增加。电镜下可见肝窦内皮细胞破坏,肝细胞线粒体结构改变。UTI组:血清TNF、MDA、AST、ALT明显降低。肝组织PMN浸润明显减少,肝组织超微结构明显改善。结论肝脏I/R诱导TNF产生。UTI能明显减轻PMN依赖性肝脏I/R损伤。

离体人睾丸缺血再灌注损伤模型

目的 建立离体人睾丸的缺血再灌注 (I/R)损伤模型 ,为研究抗I/R损伤药物的作用及机理提供一实质器官灌注模型。方法 采用 13例捐赠尸睾 ,用 2 5 0ml 0℃～ 4℃高渗枸橼酸盐嘌呤液灌洗后冷存 ,再以 5 0 0ml 3 7℃该液进行再灌注 ,不同时间点取材作组织学及酶组织化学检查。结果 4℃冷缺血 12h开始出现血管内皮细胞肿胀、变圆、空泡样变 ,2 4h内皮细胞变性脱落 ,睾丸曲细精管基膜与生精上皮剥离 ,生精细胞变性脱落 ,间质水肿等 ,病变随冷缺血时间延长而加重。酶组化结果显示 ,单纯冷保存 18h后 ,睾丸组织乳酸脱氢酶 (LDH )活性升高 ,琥珀酸脱氢酶 (SDH )活性2 4h后升高 ,经 3 7℃复温再灌注后损伤明显加重。结论 离体人睾丸可替代人体其它实质器官作为研究I/R损伤的离体灌注模型。

参附注射液对犬肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

肝脏缺血再灌注（ischaemic reperfusion injury，I／R）损伤是一个重要的临床问题，在严重感染、创伤、休克、心肺功能不全、器官移植等疾患的病理演变中起重要作用。I／R损伤使肝脏组织发生一系列代谢、结构和功能的损伤，甚至导致肝功能衰竭。是影响疾病预后、手术成败和患者存活的主要因素之一。因此探讨I/R损伤的发病机制及防治措施已成为医学领域的重要课题。参附注射液（SF）为人参和黑附子的提取物，具有多种药理效应，目前广泛应用于抗休克、I／R器官损伤的保护甚至多器官功能衰竭（MODS）的救治。但其作用机制尚无定论。本研究拟探讨SF预处理对犬I／R损伤的保护作用及机制。

丙酮酸干预小肠缺血/再灌注损伤的研究进展

肠道缺血/再灌注（I/R）损伤一直是基础研究和临床实践中的重要问题.近年来大量研究证实丙酮酸钠（NaPyr）中丙酮酸根[Pyr-]可改善心肌、肾脏以及肝脏损伤后引起的功能障碍[1].同时,丙酮酸对机体其他各脏器如小肠、脑、肺脏等的I/R损伤具有保护作用,并且可以改善严重休克的预后.但这种保护机制尚不十分清楚,可能与丙酮酸具有抗氧化、抑制氧自由基,提供能量等有关.本文对丙酮酸对小肠I/R损伤的保护作用及机制的相关研究进展综述如下.

翻白草总黄酮对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究翻白草总黄酮对小鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及其可能机制。方法小鼠随机分为4组,即假手术组、模型组及翻白草总黄酮高、低剂量组。采用双侧颈总动脉阻断法制备小鼠I/R损伤模型,Y型迷宫检测小鼠学习记忆能力,酶联免疫标记法检测小鼠脑组织中髓过氧化物酶(MPO)活性及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6的含量。结果翻白草总黄酮可改善小鼠学习及记忆能力,降低I/R损伤小鼠脑组织MPO活性及TNF-α、IL-6的含量。结论翻白草总黄酮对I/R损伤小鼠有保护作用,其机制与其抗炎作用有关。

右美托咪定对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤心肌组织炎症反应和氧化应激损伤的影响

目的探讨右美托咪定(Dex)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤(I/R)心肌组织炎症反应和氧化应激损伤的影响。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、I/R组和Dex组,采用Langendoff灌流系统构建心脏I/R模型。观察I/R期间心功能各项指标,测定心肌组织中炎症因子细胞肿瘤因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量以及氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。蛋白质印迹(Western Blot)和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌组织中核转录因子κB p65(NF-κB p65)和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白和mRNA表达情况。结果与I/R组相比,Dex组可改善I/R所致的心功能损伤,减少心肌组织中TNF-α、IL-6、MDA产生和NF-κB p65表达,增强SOD活性和HO-1表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论右美托咪定对离体心脏I/R损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与下调NF-κB p65炎症通路及上调HO-1抗氧化有关。