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R脊椎蛋白1协同Wnt3A通过Wnt/β-联蛋白信号通路促进成骨细胞分化 被引量:4
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作者 彭杨茜子 刘庆梅 +2 位作者 马彦云 贺玲玲 赵东宝 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期400-404,I0001,共6页
目的探究R脊椎蛋白1(RSPO1)在成骨分化中的作用及机制。方法利用xCELLigence系统研究RSPO1对C2C12细胞增殖及细胞活力的影响。通过磷酸酶检测试剂盒检测ALP活性,ELISA法检测护骨因子的表达,通过双荧光素酶报告基因检测系统,利用TOP... 目的探究R脊椎蛋白1(RSPO1)在成骨分化中的作用及机制。方法利用xCELLigence系统研究RSPO1对C2C12细胞增殖及细胞活力的影响。通过磷酸酶检测试剂盒检测ALP活性,ELISA法检测护骨因子的表达,通过双荧光素酶报告基因检测系统,利用TOPflash T细胞因子(TCF)报告质粒检测Wnt/β-联蛋白(β-catenin)信号通路活性。利用蛋白印迹法检测β-catenin蛋白累积情况。采用t检验进行统计学分析。结果RSPO1对C2C12细胞增殖及细胞活力无影响。RSPO1单独处理上调ALP活力(2.85±0.08和1.74±0.21,t=3.014,P〈0.05)及护骨因子表达能力(1.29±0.13和1.0±0.21,t=3.348,P〈0.05)较弱,而RSPO1及Wnt3A协同处理可显著增强ALP活力(81.37±5.08和1.74±0.21,t=31.31,P〈0.01)并上调护骨因子表达(5.26±0.60和1.00±0.21,t=6.99,P〈0.01)。RSPO1协同Wnt3A激活TCF活性并诱导β-catenin蛋白积累(3.28±0.18和1.00±0.21,t=10.94,P〈0.05)。但是,单独RSPO1对TCF的活性及β-catenin积累无影响(1.25±0.08和1.0±0.21,t=2.225,P〉0.05)。结论RSPO1可协同Wnt3A激活Wnt/β-catenin信号通路,诱导细胞成骨分化,提示RSPO1有望应用于RA的治疗。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 Wnt3A蛋白 成骨细胞 WNT信号通路 r脊椎蛋白1
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G蛋白耦联受体49在胰腺癌组织中的表达及其临床意义
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作者 田辛辛 李锐 +1 位作者 陶敏 居颂光 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期326-330,共5页
目的探讨G蛋白耦联受体49(GPR49)在胰腺癌组织中表达的临床意义及其生物学作用。方法采用组织芯片和免疫组织化学染色技术比较77例胰腺癌患者癌组织和癌旁组织中GPR49的表达,并分析其在不同病理分级和临床分期患者癌组织中的表达水... 目的探讨G蛋白耦联受体49(GPR49)在胰腺癌组织中表达的临床意义及其生物学作用。方法采用组织芯片和免疫组织化学染色技术比较77例胰腺癌患者癌组织和癌旁组织中GPR49的表达,并分析其在不同病理分级和临床分期患者癌组织中的表达水平。以GPR49阳性胰腺癌细胞株CFPAC-1为细胞模型,GPR49的配体R-脊椎蛋白1进行体外刺激,采用细胞计数方法分析其对CFPAC-1细胞的促增殖作用,并采用流式细胞术分析R-脊椎蛋白1对CFPAC-1细胞表达细胞膜CD44水平的影响。将R-脊椎蛋白1孵育后的CFPAD1细胞皮下接种于裸鼠,观察小鼠成瘤时间和肿瘤大小。统计学分析分别采用t检验和单因素方差分析。结果77份胰腺癌组织中普遍表达GPR49。胰腺癌组织中GPR49的免疫组织化学染色综合评分为(9.0±2.4)分,高于癌旁组织的(5.7±2.4)分,差异有统计学意义(t=8.995,P〈0.01)。GPR49的表达与患者肿瘤大小、病理分级、淋巴结转移、临床分期等无明显相关性(P均〉0.05)。体外实验表明,R-脊椎蛋白1可促进CFPAC-1细胞增殖,上调CFPAC-1表达CD44。体内实验表明,R-脊椎蛋白1刺激组小鼠在接种CFPAC-1细胞后30d的肿瘤体积为(606.0±188.0)mm3,大于PBS刺激组的(364.2±83.7)mm3,差异有统计学意义(t=2.616,P=0.031)。结论GPR49普遍表达于胰腺癌细胞,R-脊椎蛋白1/GPR49途径对胰腺癌细胞具有促增殖作用,提示其可能是干预胰腺癌生长的潜在靶点。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 G蛋白耦联受体49 r脊椎蛋白1 CD44
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