片仔癀上调miR-200a抑制大肠癌耐药细胞转移的作用机制

目的:研究片仔癀对大肠癌耐药细胞转移的影响和对mi R-200a及其靶基因E盒结合锌指蛋白ZEB1/2和下游转移相关基因表达的调控作用。方法:MTT法检测不同浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对HCT-8/5-FU细胞和HCT-8细胞活力的影响;采用黏附实验和Transwell法检测细胞黏附、迁移和侵袭能力的改变;通过Q-PCR检测片仔癀对HCT-8/5-FU细胞mi R-200a的表达;采用免疫荧光检测mi R-200a靶基因ZEB1和ZEB2及其下游E-cadherin、N-cadherin的表达。结果:MTT检测结果显示不同浓度的5-FU干预可显著降低HCT-8细胞活力,对HCT-8/5-FU细胞活力影响较小;片仔癀干预显著降低HCT-8/5-FU细胞黏附、迁移和侵袭能力;可显著上调mi R-200a的表达和E-cadherin的表达,下调ZEB1、ZEB2和N-cadherin的表达。结论:片仔癀干预显著抑制大肠癌耐药细胞的转移,且通过调控mi R-200a/ZEB1/2通路及其下游E-cadherin、N-cadhrin的表达可能是其抑制大肠癌转移的重要内在机制。

miR-200c在子宫内膜癌组织中的表达及与ZEB2蛋白的相关性

目的:探讨miR-200c在子宫内膜癌组织中的表达及与ZEB2的相关性。方法:选取113例子宫内膜癌组织和癌旁组织标本,40例正常子宫内膜癌组织作为对照组,检测组织中miR-200c表达量,以及ZEB2基因和蛋白表达量,利用反义寡核苷酸技术抑制子宫内膜癌RL95-2细胞株中miR-200c表达,检测其对细胞侵袭力的影响,以及细胞中ZEB2基因和蛋白表达。结果:子宫内膜癌组织中miR-200c表达量、ZEB2基因和蛋白表达量均高于癌旁组织和对照组(P<0.05);反义miR-200c转染组穿膜细胞数少于阴性对照组和脂质体组(P<0.05);反义miR-200c转染组细胞中ZEB2基因和蛋白表达量均低于阴性对照组和脂质体组(P<0.05)。结论 :miR-200c在子宫内膜癌组织中呈高表达,可能是通过调控ZEB2而促进肿瘤细胞的浸润和转移。

miR-200b在肝癌中靶向调控Bmi1基因的实验研究

目的研究miR-200b在肝癌中对Bmi1的调控作用,并分析其结合位点。方法首先利用生物信息学软件预测人Bmi1 3′-UTR上mi R-200b可能的结合位点;然后构建Bmi1 3′-UTR野生型和突变型报告载体,应用双荧光素酶报告基因分析检测Bmi1 3′-UTR上mi R-200b的结合位点;最后利用real time PCR和Western blot在人肝癌细胞Hep G2中验证mi R-200b对Bmi1的调控作用。结果人Bmi1 3′-UTR上存在3个mi R-200b的潜在结合位点;双荧光素酶报告基因分析提示,转染mi R-200b-3p mimic后野生型组荧光素酶活性明显低于突变型组;real time PCR和Western blot结果提示在Hep G2细胞中过表达mi R-200b可明显下调Bmi1的表达。结论 mi R-200b在肝癌中可通过靶向结合Bmi1基因3′-UTR特异性调控Bmi1基因的表达。

上皮源性卵巢癌中4种miRNAs的表达及其临床意义

目的 分析上皮源性卵巢癌（EOC）组织中mi R-200a、mi R-141、mi R-205和mi R-34a的表达及其临床意义。方法 44例EOC患者按FIGO分期分为FIGOⅠ~Ⅱ（FIGO早期组）组15例和FIGOⅢ~Ⅳ（FIGO晚期组）组29例,用实时荧光定量PCR定量比较2组4种mi RNAs的表达差异并考察4种mi RNAs表达间的关联。以各组mi RNAs表达的中位数将EOC患者分为mi RNA高表达组和低表达组,比较2组患者间的生存差异。按年龄、FIGO分期、术后是否有残余瘤及术后化疗情况分组,进行Kaplan-Meier生存分析和Cox多因素分析。结果 FIGO晚期组mi R-141的表达高于早期组（P=0.036）。mi R-141的表达与mi R-200a、mi R-205呈正相关,与mi R-34a呈负相关（均P〈0.05）;mi R-200a与mi R-205的表达呈正相关（P〈0.05）。生存分析显示,mi R-200a的表达低,卵巢癌患者无进展生存期短（P=0.035）,FIGO早期组生存率高于FIGO晚期组（P〈0.05）。mi R-200a的表达水平、FIGO分期以及年龄与卵巢癌患者总生存期和无进展生存期有关,mi R-141、mi R-205和mi R-34a的表达水平、术后残余瘤以及化疗与患者生存无关。结论 mi R-200a的表达与卵巢癌患者预后有关,可能是卵巢癌患者预后预测的独立影响指标。

BBH-2R-200型预抽真空气体渗碳氮化炉温度均匀性的现场测定

一、概述BBH-2R-200型预抽真空气体渗碳氮化炉主要由前室、护带、加热室、油槽等部分组成。前室为真空室,工件进炉后,对前室进行预抽真空,然后通入氮气,保证内部压力等于大气压,以便于炉门的打开。氮气置换经检测残氧率合格后,工件经护带进入加热室加热,工艺温度要求为860℃±10℃,保温时间为10min。而后工件再经护带回到前室,