hsa-miR-20a低表达慢病毒载体的构建及其表达鉴定

目的:构建hsa-mi R-20a低表达慢病毒载体,检测其在HL-60中表达。方法:采用In-fusion重组交换克隆法设计并合成hsa-mi R-20a前体序列的扩增引物,扩增获得目的片段插入慢病毒GV159中,得到重组的LV-hsa-mi R-20a表达载体,通过与包装质粒共转染293T细胞,获得携带hsa-mi R-20a的重组慢病毒并测定病毒滴度。取对数生长期HL-60细胞根据病毒滴度及细胞MOI值感染慢病毒,感染后24 h、48 h、72 h、96 h镜下观察荧光表达情况,判断感染效率,q RT-PCR检测HL-60细胞hsa-mi R-20a的表达变化。结果:成功构建LV-hsa-mi R-20a低表达慢病毒载体,其病毒滴度为(8E+8)TU/m L。该病毒感染HL-60细胞的效率可高达到80%,并可有效降低HL-60细胞hsa-mi R-20a表达水平。结论:成功构建了hsa-mi R-20a低表达慢病毒载体,包被的慢病毒可以在HL-60细胞中实现低表达效果,为后续功能研究奠定了基础。

非小细胞肺癌组织中miR-19b与miR-20a的表达及临床意义

目的:检测mi R-19b与mi R-20a在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,探讨两者与肺癌临床病理的关系。方法:选择我院NSCLC肺癌患者50例,使用Real-time RT-PCR法对其癌组织及癌旁正常组织中mi R-19b和mi R-20a的含量进行检测,并利用2(-△△CT)法处理结果,分析与临床病理资料的关系。结果:相对于内参U6,mi R-19b基因在NSCLC组织中的表达量明显低于癌旁正常组织,而mi R-20a基因在NSCLC组织中的表达量明显高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05);在NSCLC组织标本中,mi R-19b基因表达量在临床分期I-II的标本中明显高于临床分期III,而mi R-20a基因表达量在临床分期I-II的标本中明显低于临床分期III,差异均就有统计学意义(P<0.05);mi R-19b基因表达量在肿瘤病理低分化组织中明显低于肿瘤病理高分化组织,而mi R-20a基因表达量在肿瘤病理低分化组织中明显高于肿瘤病理高分化组织,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:mi R-19b低表达和mi R-20a高表达与NSCLC的临床分期、病理分级具有密切关系,早期检测有助于NSCLC诊断和治疗。

16R-溴代孕甾-3S,20S-二醇二乙酸酯与碱的条件可控性反应

为了合理利用甾体皂甙元资源,系统地考察了16R-溴代孕甾-3S,20S-二醇二乙酸酯在不同反应条件下与碱的反应.给出了选择性地分别转化16R-溴代孕甾-3S,20S-二醇二乙酸酯成为孕甾-16-烯-3S,20S-二醇二乙酸酯、16R-溴代孕甾-3S,20S-二醇、孕甾-3S,16S,20S-三醇、孕甾-14,16-二烯-3S-醇乙酸酯和雄甾-16-烯-3S-醇等化合物的可控性反应结果.这些条件可控性反应结果不仅为甾体药物和生物活性天然甾体化合物合成提供了新的合成中间体,也为它们新合成策略和途径的设计提供了机遇.

苦楝甾醇及2α,3α,20R-三羟基孕甾-16β-甲基丙烯酸酯的合成

苦楝甾醇(3)及2α,3α,20R-三羟基孕甾-16β-甲基丙烯酸酯(4)都分离自苦楝根皮中,苦楝甾醇具有良好的驱虫效果,4则表现出一定抗肿瘤活性.以孕甾三醇为原料,发展了一条昆虫拒食剂苦楝甾醇等天然产物的合成路线.合成路线以关键的分子间SN2反应立体专一性构建C(20)位构型,并通过X射线证实C(20)位绝对构型,以底物控制的C(23)双键双羟化反应构筑C(23)-α-双羟基,总计11步完成苦楝甾醇及2α,3α,20R-三羟基孕甾-16β-甲基丙烯酸酯的合成,总收率分别为6%和7.5%.

TR-20PTA-3螺纹套管的设计研发

目前,世界上大多数国家的石油套管都采用美国石油学会(APISpec5CT)标准,螺纹则采用美国石油学会(APISpec5B)标准。随着石油开采向地层处的开发对,石油套管的要求越来越高,而API套管采用短圆螺纹、长圆螺纹、偏梯形和直连形形式,存在螺纹连接强度不高,各扣牙受力很不均匀,限制了其作业能力;同时12米长左右的套管端部直接加工螺纹,要达到螺纹密封,对机加工设备的要求很高,目前国内大部分公司不具备加工能力;另外这些螺纹采用单头螺纹,上紧时旋转的圈数较多,作业效率低。

Q开关激光重复照射治疗文身的研究进展

Q开关激光治疗文身的传统方法是激光扫描照射文身部位,将颜料颗粒击碎,同时也使正常组织产生轻度烧伤,因此一般不重复照射或重叠照射,以免对皮肤组织产生不可逆的损伤。治疗1次后通常需要等待数月,待损伤处的皮肤组织愈合后再进行照射,如此反复治疗数次,方能将文身的颜料颗粒基本祛除。这种传统方法的缺点是治疗次数多、疗程长,整个治疗时间跨度达1~2年甚至更长。近年有学者提出重复照射的新方法,即在每次治疗时重复照射患处几遍,可在不增加正常组织损伤的前提下,减少治疗次数、缩短疗程时间,总疗程时长可缩短到数月,取得更快的临床效果。