miR-214/199a在消化系统肿瘤诊断中的作用

消化系统恶性肿瘤是危害人类健康的主要恶性肿瘤之一,mi R-214/199a可以以促癌因子或抑癌因子的角色参与肿瘤的发生、发展,并可作为肿瘤分子标志物在消化系统肿瘤诊断中发挥重要的作用。该文就mi R-214/199a在消化系统肿瘤诊断中的作用作一综述。

miR-214负向调控结肠癌细胞株LoVo中Sema4D的表达

目的:观察miR-214对人结肠癌细胞株LoVo中轴突导向因子4D(semaphorin 4D,Sema4D)表达水平的影响,探讨miR-214对Sema4D的调控作用.方法:设计并合成miR-214模拟物(miR-214mimics),miR-214抑制剂(miR-214 inhibitor),二者对照序列(mi-control,in-control),分别与以脂质体lipofectamine 2000包裹后转染人结肠癌细胞株LoVo.RT-PCR检测转染24 h后各细胞株内miR-214的表达及Sema4D mRNA的表达变化,并用Western blot检测Sema4D蛋白的表达变化.结果:LoVo细胞株转染miR-214 mimics、mi-control,inhibitor、in-control 24 h后miR-214的相对表达量为8.003±0.651,3.464±0.332,0.740±0.088,2.620±0.166,mimics组miR-214表达较其对照组升高,inhibitor组表达较其对照组降低(P<0.05).Sema4D mRNA的相对表达量为:0.420±0.027,0.851±0.062,1.243±0.087,0.660±0.042;Sema4D蛋白/β-actin分别为:0.163±0.037,0.550±0.038,1.137±0.112,0.457±0.046.Sema4D mRNA及蛋白mimics组表达较其对照组降低,inhibitor组较其对照组升高(P<0.05).结论:人结肠癌细胞株LoVo中,Sema4D受miR-214的调控,miR-214可负向调控Sema4D mRNA的表达水平进而影响其蛋白的表达,miR-214可能作为结肠癌治疗的新靶点.

miR-214在口腔鳞状细胞癌中的表达及功能研究

目的:探讨mi R-214在口腔鳞状细胞癌中的表达及其对口腔鳞癌细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡能力的影响。方法:实时荧光定量RT-PCR检测31例口腔鳞状细胞癌组织和7株口腔鳞状细胞癌细胞系中mi R-214表达水平,分析其与患者临床病理参数的相关性;评估mi R-214在7株细胞系中的基础表达水平,分别选择mi R-214高、低表达的细胞系进行后续研究。对选择的细胞系分别转染mi R-214 mimics和inhibitors,采用划痕实验、Transwell实验、流式细胞仪分别检测转染后细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡能力的变化。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学处理。结果:在口腔鳞状细胞癌中,mi R-214的表达与患者颈淋巴结转移情况和临床分期呈正相关(P<0.05);转染mi R-214mimics的UM1细胞侵袭、迁移能力显著高于对照组(P<0.05),转染mi R-214 inhibitors的SCC9细胞侵袭、迁移能力显著低于对照组(P<0.05);转染mi R-214 mimics的UM1细胞周期阻滞在G1期,凋亡水平无明显变化,转染mi R-214 inhibitors的SCC9细胞凋亡水平和细胞周期无明显变化。结论:mi R-214与口腔鳞状细胞癌恶性表型相关,可增强口腔鳞状细胞癌细胞的侵袭和迁移能力。

过表达MicroRNA-199a促进TNFα诱导的脂肪细胞凋亡

旨为探明micro RNA-199a(mi R-199a)对脂肪细胞凋亡的影响及核转录因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)在其中的作用。培养3T3-L1脂肪细胞,使用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)诱导细胞凋亡。在此基础上分别使用NF-κB阻断剂PDTC和mi R-199a mimic处理细胞,判断过表达mi R-199a对TNFα诱导的脂肪细胞凋亡的影响及NF-κB在其中的作用。使用流式细胞仪分析细胞凋亡率,试剂盒检测Caspase3/7酶活,双荧光素酶报告系统检测NF-κB活性,q RT-PCR检测mi R-199a的表达水平,Western blotting检测NF-κB相关蛋白变化。结果显示,TNFα可以诱导分化的脂肪细胞凋亡并同时激活NF-κB,激活的NF-κB在TNFα诱导的脂肪细胞凋亡中发挥负调控作用。在脂肪细胞过表达mi R-199a明显抑制NF-κB的激活进而显著促进TNFα诱导的凋亡。mi R-199a通过调控NF-κB活性参与TNFα诱导的脂肪细胞凋亡。

早期胰腺癌患者血清CA199、LAP和GGT的变化及价值

目的探讨早期胰腺癌患者血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)、r-谷氨酰转移酶(GGT)和CA199的变化及临床意义。方法对43例早期胰腺癌组、38例胰腺炎组和40例健康对照组血清分别采用速率法、酶法、发光法检测LAP、GGT和CA199含量。结果早期胰腺癌组LAP、GGT、CA199含量分别为(54.07±17.49)U/L、(138.25±45.69)U/L、(447.53±133.84)U/mL,高于胰腺炎组和对照组,差异均有统计学意义(P <0.05),但对于LAP胰腺炎组和对照组差异无统计学意义(P> 0.05),而对于GGT和CA199含量,胰腺炎组明显高于对照组(P <0.05);对于早期胰腺癌患者单项的敏感性最高的为GGT,敏感性为97.73%,特异性最高的为LAP,特异性为93.02%,联合检测的敏感性、特异性及约登指数均高于单项检测。结论 LAP、GGT、CA199联合检测对于早期胰腺癌的诊断具有重要价值。