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TLR7/8配体R-848体外诱导小鼠脾细胞产生IgG2a的研究 被引量:3
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作者 沈二霞 吴长有 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期674-678,共5页
目的检测TLR7/8配体R-848是否能够诱导naive小鼠的脾B细胞和纯化B细胞活化、增殖及产生抗体。方法磁珠分选出纯化的B细胞,将制备好的脾细胞或纯化B细胞,与R-848共培养,流式细胞术检测R-848对B细胞活化和增殖的影响;ELISA检测R-848是否... 目的检测TLR7/8配体R-848是否能够诱导naive小鼠的脾B细胞和纯化B细胞活化、增殖及产生抗体。方法磁珠分选出纯化的B细胞,将制备好的脾细胞或纯化B细胞,与R-848共培养,流式细胞术检测R-848对B细胞活化和增殖的影响;ELISA检测R-848是否能够诱导脾细胞产生IgG2a和IgG1,并检测与抗体产生相关的细胞因子的产生。结果 R-848上调B细胞表面活化分子CD25和CD80的表达,促进B细胞活化和分裂;R-848以剂量依赖方式诱导小鼠脾细胞产生IgG2a和IgG1;同时诱导脾细胞产生IFN-γ、IL-12P40、IL-10和IL-6。结论 R-848直接作用于B细胞促进其活化和分裂;R-848促进脾细胞产生大量的IgG2a,可能与其增强IFN-γ、IL-6和IL-10的产生有关。 展开更多
关键词 r-848 B细胞 IGG2A IFN-Γ
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TLR7/8配体R-848体外抑制小鼠纯化B细胞产生IgE的机制研究
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作者 沈二霞 吴长有 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期640-644,共5页
目的:观察TLR7/8配体R-848对小鼠纯化B细胞产生IgE的调节作用及其可能机制。方法:制备小鼠脾细胞悬液,用磁珠分选出脾细胞中的CD19+B细胞;纯化的B细胞在基础培养液、含anti-CD40+IL-4加或不加R-848的培养液:采用ELISA的方法检测IgE的浓... 目的:观察TLR7/8配体R-848对小鼠纯化B细胞产生IgE的调节作用及其可能机制。方法:制备小鼠脾细胞悬液,用磁珠分选出脾细胞中的CD19+B细胞;纯化的B细胞在基础培养液、含anti-CD40+IL-4加或不加R-848的培养液:采用ELISA的方法检测IgE的浓度;流式细胞术检测B细胞的活化情况;CFSE标记B细胞,培养后检测细胞的分裂情况。结果:R-848以剂量依赖方式抑制anti-CD40+IL-4诱导的B细胞产生IgE,增强anti-CD40+IL-4诱导的B细胞的活化。R-848能够直接作用于B细胞,抑制anti-CD40+IL-4诱导的B细胞分裂。结论:R-848抑制B细胞产生IgE,可能与其抑制anti-CD40+IL-4诱导的B细胞的分裂有关。 展开更多
关键词 r-848 纯化B细胞 IGE 机制
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Inhibitory effects of TLR7/8 ligand R-848 on IgE production of murine in vivo
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作者 Shen Erxia Wu Changyou 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期2081-2083,2086,共4页
Objective To investigate whether R-848 could inhibit IgE production of mice immunized with OVA plus ALUM in vivo.Methods BALB/c mice were immunized s.c on the back with PBS,OVA,OVA plus R-848,OVA plus CpG,OVA plus ALU... Objective To investigate whether R-848 could inhibit IgE production of mice immunized with OVA plus ALUM in vivo.Methods BALB/c mice were immunized s.c on the back with PBS,OVA,OVA plus R-848,OVA plus CpG,OVA plus ALUM,and OVA plus ALUM in R-848 or CpG every two weeks for three times.The blood from the mice was harvested after the last immunization,and the concentration of OVA specific or total IgE,IgG1 and IgG2a in the sera was determined;the splenocytes from the immunized mice were harvested and cultured with or without OVA for 3 days,and the concentration of IL-4 and IFNγ in the supernatants was determined.Results Firstly,we investigated that R-848 as Th1 adjuvant could enhance the production of OVA specific IgG2a in mice immunized with OVA.Secondly,further study showed that R-848 could inhibit the production of OVA specific IgE and total IgE,and promote the production of OVA specific IgG2a in the sera of mice immunized with OVA plus ALUM.Moreover,the results of ELISA showed that R-848 inhibiting IgE production was related to its reducing IL-4 production and enhancing IFNγ production.Conclusion R-848 could inhibit IgE production of mice immunized with OVA plus ALUM in vivo. 展开更多
关键词 《重庆医学》 期刊 摘要 编辑部
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R-848对儿童支气管哮喘急性发作期TRPV1基因表达和炎症因子水平的影响及临床意义
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作者 李奕 程振宇 沈照波 《华南国防医学杂志》 CAS 2021年第7期479-483,共5页
目的分析R-848对儿童支气管哮喘急性发作期外周血中白细胞介素33(interleukin 33,IL-33)、IL-6和免疫球蛋白E(immunoglobin E,IgE)的水平及瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)表达水平的影响及... 目的分析R-848对儿童支气管哮喘急性发作期外周血中白细胞介素33(interleukin 33,IL-33)、IL-6和免疫球蛋白E(immunoglobin E,IgE)的水平及瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)表达水平的影响及临床意义。方法收集2019-01/2020-08月,在作者医院接受治疗的急性发作期哮喘患者84例,临床缓解期患者30例,分离培养急性发作期患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分别检测患儿外周血中IL-33、IL-6和IgE水平以及TRPV1 mRNA的相对表达水平。Pearson检测IL-33、IL-6和IgE与TRPV1 mRNA的相关性。ELISA和RT-qPCR实验分别检测不同浓度R-848(0、5、10、20、40 mg/L)刺激PBMC 48h后IL-33、IL-6、IgE与TRPV1 mRNA的相对表达水平。ELISA和RT-qPCR实验分别检测R-84820 mg/L刺激PBMC细胞24、48、72、96 h后IL-33、IL-6、IgE水平和TRPV1 mRNA相对表达水平的变化。结果急性发作期哮喘患者外周血中IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA水平高于临床缓解期患者(t=20.700、10.205、32.526、9.652,P均<0.001);急性发作期外周血中IL-33、IL-6和IgE与TRPV1 mRNA呈正相关(r=0.805、0.880、0.805,P均<0.001)。不同浓度R-848刺激PBMC细胞48 h后,R-8485 mg/L时,IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA的水平低于R-8480 mg/L(t=8.407、4.592、9.434、4.273,P=0.000、0.009、0.000、0.013),R-84810 mg/L时,IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA的水平低于R-8485 mg/L(t=7.415、5.021、3.547、3.402,P=0.000、0.000、0.037、0.041),R-84820 mg/L时,IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA的水平低于R-84810 mg/L(t=12.474、9.503、19.981、8.452,P均=0.000),R-84820 mg/L时,IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA的水平与R-84840 mg/L相比无统计学差异(P>0.05),R-848(0~20 mg/L)处理PBMC细胞48 h后可呈剂量依赖性抑制IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA的水平。R-84820 mg/L作用于PBMC 48 h后IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA水平低于R-84820 mg/L作用于PBMC 24 h(t=21.407、12.574、19.035、5.392,P均=0.000),R-84820 mg/L作用于PBMC 72 h后IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA水平低于R-84820 mg/L作用于PBMC 48 h(t=3.754、3.543、7.043、3.412,P=0.031、0.039、0.000、0.044),R-84820 mg/L作用于PBMC 96 h后IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA水平低于R-84820 mg/L作用于PBMC 72 h相比无统计学差异(P>0.05),R-84820 mg/L处理PBMC细胞24~72 h内可呈时间依赖性抑制IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA的水平。结论R-84820 mg/L作用于PBMC 72 h可显著抑制急性发作期患者外周血中PBMC分泌IL-33、IL-6、IgE的水平和TRPV1的表达,发挥一定的抗炎作用,有望应用于儿童支气管哮喘的治疗中。 展开更多
关键词 儿童支气管哮喘 急性发作期 r-848 瞬时受体电位香草酸亚型1 炎症因子
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