miR-181a靶向Bcl-2调控氧糖剥夺/再灌注模型诱导的SH-SY5Y神经细胞凋亡

目的皮层是响应脑缺血缺氧最为敏感的组织之一,基于前期深度测序技术,我们筛选获得响应脑缺血缺氧应激的皮层区目标基因miR-181a及Bcl-2。本研究旨在SH-SY5Y细胞株氧糖剥夺/复糖复氧模型验证二者靶向调控关系及功能,明确miR-181a—Bcl-2调控网络在OGD/R诱导的神经细胞凋亡中的作用。方法采用线栓法构建大鼠缺血缺氧再灌注损伤模型,脑切片TTC染色及行为学评分法评估模型。应用qRT-PCR及Western Blot验证目标基因的表达。生物信息学分析miR-181a与Bcl-2的靶向结合位点并比对结合位点的保守性,双荧光素酶报告基因实验验证miR-181a与Bcl-2靶向结合的特异性。采用OGD/R细胞模型体外模拟脑缺血再灌注损伤,检测凋亡相关蛋白表达及Hoechst荧光染色评估细胞凋亡。结果大鼠大脑中动脉阻塞后miR-181a、Bcl-2表达变化趋势相反。RNA hybird软件预测miR-181a可结合Bcl-2的3′-UTR区,且结合区域高度保守。双荧光素酶报告基因实验发现,相对于Bcl-23′UTR-WT与mimic-NC共转染组,Bcl-23′UTR-WT与miR-181a mimic共转染后的荧光活性更低(P<0.001),而Bcl-2-Mut与miR-181a mimic共转染组,荧光活性无显著差异(P>0.05)。分别用miR-181a的模拟物及抑制物转染OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞,miR-181a可以抑制Bcl-2 mRNA及其蛋白的表达水平(P<0.001)。过表达miR-181a显著增加了SH-SY5Y细胞的凋亡(P<0.001),而抑制miR-181a表达可使SH-SY5Y细胞凋亡显著降低(P<0.001)。结论miR-181a可靶向结合Bcl-2,下调miR-181a可通过促进Bcl-2的表达进而抑制SH-SY5Y神经细胞OGD/R损伤诱导的细胞凋亡。

五华热矿泥提高湿热证大鼠抗感染能力的实验研究

用五华热矿泥治疗湿热证模型大鼠 ,对湿热证大鼠血中G -CSF与R -SH的含量变化进行研究 ,且设正常组、普通黄泥组为对照 ,结果提示湿热证模型血中的G -CSF明显高于对照组而R -SH则低于对照组 ,五华热矿泥治疗组与正常组无显著差异 ,表明湿热证发病与体内G -CSF和R -SH含量的关系密切 ,五华热矿泥能起到较好治疗湿热类疾病的作用 ,普通黄泥没有治疗湿热证的作用。

基于低复杂度卷积神经网络的星载SAR舰船检测

星载SAR(合成孔径雷达)舰船检测广泛应用于海上救援和国土安全防护等领域.鉴于传统的检测方法仍存在虚警率高等缺点,本文将具有强大表征能力的卷积神经网络(CNN)引入到星载SAR舰船检测中,面向SAR舰船检测的精准快速的需求,提出了基于低复杂度CNN的星载SAR舰船检测算法.算法结合星载SAR图像的特点,利用ROI提取方法实现目标粗提取,得到可疑目标切片及其对应的位置信息;通过构建的低复杂度CNN对所有的可疑目标切片进行精确分类,确定舰船目标,从而实现舰船目标检测.实验测试结果表明:本文提出的算法可以实现精准的星载SAR舰船检测;与传统双参数CFAR目标检测和基于现有深度网络框架(LeNet、GoogLeNet)的检测算法相比,该算法检测性能更好、检测时间更短,可有效降低检测漏检率和虚警率.

抑制miR-181a对鱼藤酮诱导的SH-SY5Y多巴胺能细胞损伤的保护作用

目的:通过抑制mi R-181a表达研究其对鱼藤酮诱导SH-SY5Y的细胞损伤、内质网应激以及未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)的影响,为mi R-181a在帕金森病治疗方面提供初步的实验依据。方法:不同浓度的鱼藤酮诱导SH-SY5Y作用12、24、48、72 h;mi R-181a类似物和mi R-181a抑制剂及0.4μmol/L鱼藤酮诱导SH-SY5Y作用24 h;采用CCK-8法检测细胞存活率;Annexin V/PI双染检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测mi R-181a与葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 k D,GRP78)的靶标关系;q RT-PCR检测mi R-181a和GRP78 m RNA表达水平;Western Blot检测GRP78、肌醇需酶1α(inositol-requiring enzyme 1,IRE1α)、X-盒结合蛋白1(X box-binding protein 1,XBP1)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein,CHOP)的蛋白表达水平。结果:(1)CCK-8结果显示:随着鱼藤酮浓度(>0.1μmol/L)增加,SH-SY5Y存活率降低,并存在浓度和时间依赖性;其中0.4μmol/L作用24 h后存活率已降为0.6(P<0.05),加入mi R-181a抑制剂后细胞存活率升高达0.8(P<0.05);(2)Annexin V/PI双染结果显示:抑制mi R-181a表达,细胞的凋亡降低至0.23(P<0.05);(3)双荧光素酶报告基因检测显示:mi R-181a与GRP78存在直接的靶标关系;(4)q RT-PCR结果显示:0.4μmol/L鱼藤酮作用24 h后细胞mi R-181a呈高表达(P<0.05),抑制mi R-181a表达可上调GRP78 m RNA水平(P<0.05);(5)Western Blot结果显示:抑制mi R-181a表达可上调GRP78和下调p IRE1α、XBP1和CHOP的蛋白表达(P<0.05)。结论:抑制mi R-181a表达可减轻鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤,其机制可能通过上调GRP78进而调节内质网应激以及抑制UPR相关信号通路,从而发挥对神经元细胞的保护作用。

shR-377联合细胞因子诱导人脂肪间充质干细胞向神经干细胞定向分化

目的探索sh R-377联合细胞因子诱导人脂肪间充质干细胞(HADMSCs)向神经干细胞(NSCs)定向分化。方法采用吸脂术获取健康青年人腹部大网膜脂肪组织,胶原酶消化法分离HADMSCs,行表型鉴定和细胞周期检测。sh R-377转染第三代HADMSCs,48 h后流式检测nestin表达率,72 h后行RT-q PCR和免疫细胞化学测定nestin和musashi,并对转化后细胞增殖培养分析。结果流式结果显示HADMSCs表面标志CD45及CD117表达呈阴性,CD29及CD44呈阳性,诱导24 h后nestin表达率为(64.6±3.2%);RT-q PCR结果表明诱导72 h后神经干样细胞球nestin、musashi表达阳性,免疫细胞化学染色可见nestin染色阳性。神经干样细胞球增殖培养7 d可见多个克隆球。神经干样细胞球进一步分化培养,可见到很明显的细长突触,双极或多极神经元样形态。结论 sh R-377联合细胞因子的诱导方法可以使HADMSCs定向分化为NSCs,诱导时间约48 h。转化时间和转化率比传统方法有较大提高,为体外大量获得NSCs提供了实验依据。

电极处加入CaCl_2溶液对高岭土电渗试验的影响

为了研究高岭土电渗过程中在电极处加入CaCl_2溶液对电流、排水量、界面电阻、土体电阻率及最终抗剪强度等的影响,开展了相关室内试验。结果表明:电极处加入CaCl_2溶液后,电流的减小趋势得到有效控制,电渗过程中电流大小与加入CaCl_2溶液的量有关,也可能与阳极所加CaCl_2溶液所占比例或者与CaCl_2溶液加入的时间有关;排水量变大,本试验条件下电渗排水量提高了10.9%;电极处加入CaCl_2溶液对阴极处界面电阻的减小很明显;电极处加入CaCl_2溶液后土体总电阻率下降较为明显,而阴极附近土体电阻率的下降对土体总电阻率下降起主要贡献;阳极和中部土体最终抗剪强度提高比较明显,尤其是阳极土体最终抗剪强度提高了16.4 k Pa,但阴极土体抗剪强度无明显提高,因此可以考虑用反转电极的方法来加固阴极土体。该研究可为高岭土电渗试验提供新思路。

带竖向接缝的混凝土箱梁桥抗剪性能试验研究

为了解竖向接缝对预应力混凝土箱梁桥抗剪性能的不利影响及改进措施,以七里坪湘江大桥预应力混凝土梁为原型,设计制作4片预应力混凝土模型梁进行跨中单点加载试验,分析各模型梁在试验过程中的裂缝发展情况、破坏形态和抗剪承载力,研究交界面粗糙度和普通钢筋配筋率对抗剪性能的影响。结果表明:各模型梁的裂缝发展过程基本相似,破坏形态均为弯剪破坏;带竖向接缝梁的抗裂性能比整体浇筑梁差,但各梁的抗剪承载力相差不大;带竖向接缝梁的刚度低于整体浇筑梁的刚度;增加接缝处混凝土交界面粗糙度和普通钢筋配筋率可以提高带竖向接缝梁的抗裂性能和刚度。

人参皂苷Rb1通过调控Nrf2/ARE信号通路抗氧糖剥夺/复氧后神经细胞焦亡的研究

目的从Nrf2/ARE抗氧化信号通路探讨人参皂苷Rb1抗氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后SH-SY5Y细胞焦亡的作用机制。方法野生型SH-SY5Y细胞设立对照组、模型组、不同剂量人参皂苷Rb1组,CCK-8法检测细胞存活率。构建Nrf2沉默SH-SY5Y(si-Nrf2-SH-SY5Y)细胞,设立对照组、模型组、人参皂苷Rb1组、si-Nrf2-SH-SY5Y模型组、si-Nrf2-SH-SY5Y人参皂苷Rb1组。CCK-8法检测细胞存活率;LDH漏出率、Hoechst/PI染色和caspase-1蛋白的表达评价细胞焦亡;免疫荧光染色检测Nrf2蛋白活化;Western blot法检测全细胞Nrf2和HO-1蛋白的表达。结果人参皂苷Rb1能够提高OGD/R后细胞存活率,降低细胞焦亡,上调Nrf2蛋白的表达,维持HO-1蛋白的高表达。沉默Nrf2基因可导致细胞损伤和细胞焦亡进一步加重,同时人参皂苷Rb1激活Nrf2/ARE信号通路和抗细胞损伤、细胞焦亡的作用受到抑制。结论Nrf2/ARE抗氧化信号通路负调控OGD/R后SH-SY5Y细胞焦亡,人参皂苷Rb1通过调控Nrf2/ARE抗氧化信号通路,从而发挥抗细胞焦亡的作用。

高职室内设计专业现代学徒制人才培养模式探索

现阶段,我国许多高职院校都开始推行校企联合培养的现代学徒制,以有效的增加高职教育供给,提升高职教育质量。在概述校企联合培养的现代学徒制相关概念的基础上,分析了我国高职院校室内设计专业推行校企联合培养的现代学徒制的必要性,同时提出了校企联合培养的现代学徒制的具体实施策略,探索校企联合培养的现代学徒制新教学模式。

类锗烯H_2GeLiCl与RH(R=Cl,SH,PH_2)的插入反应

应用DFT B3LYP和QCISD方法研究类锗烯H2GeLiCl与RH(R=Cl,SH,PH2)的插入反应.在B3LYP/6-311+G(d,p)水平上优化反应势能面上所有驻点的构型,并用QCISD/6-311++G(d,p)方法计算单点能,并考察溶剂化效应对反应的影响.结果表明,类锗烯H2GeLiCl与RH(R=Cl,SH,PH2)插入反应势能面上存在1个过渡态(TS)和1个中间体(IM)连接反应物和产物.气相条件下,3个插入反应的势垒分别为93.47(R=Cl),133.32(R=SH)和212.25(R=PH2)kJ/mol,表明相同条件下发生插入反应时,反应活性由大到小的物质为H-Cl,H-SH,H-PH2;溶剂极性越大,插入反应越容易进行.

斜拉桥异型拱塔施工临时横撑方案比选

南宁青山大桥主桥为主跨430m的双塔混合梁斜拉桥,桥塔采用钢筋混凝土异型拱结构,塔柱采用全自动液压爬模施工,施工中沿塔柱高度方向布置了5道临时横撑。为有效控制施工过程中桥塔的变形和应力,提出4种(3种水平横撑和1种"横撑+斜撑")临时横撑方案,采用ANSYS软件建立桥塔的空间有限元模型,模拟桥塔施工全过程,分析临时横撑和塔柱的位移和应力。结果表明:"横撑+斜撑"方案的临时横撑横向和竖向位移最小,受到的应力水平最低,最能有效控制桥塔的应力和变形。因此,采用"横撑+斜撑"方案。分析该方案下横撑对桥塔的位移和空间受力影响可知:塔柱的压、拉应力分别控制在10.0 MPa和0.7 MPa内;桥塔横桥向最大位移为7.8mm,倾斜度约为1/17 600,均满足施工要求。

合成气气氛下含水量对锡林浩特煤液化性能的影响

在合成气气氛下考察了含水量对锡林浩特煤液化性能的影响。结果表明:在合成气气氛下,煤中适当含水可促进煤在液化过程中的转化。当含水量为7.5%(质量分数)时,锡林浩特煤的液化转化率最高,为84.59%;当煤中含水量较高时,煤的转化率明显降低。此外,煤中适当含水更有利于水煤气变换反应的进行。当含水量为7.5%时,合成气中的CO转化率最高,为26.00%;但随着煤中含水量的增加,CO转化率降至16.93%。通过沥青烯与前沥青烯的红外光谱发现:沥青质中存在大量羟基,煤中的水促进了煤中官能团侧链断裂;但当煤中含水量大于15.0%时,沥青质发生缩聚反应导致煤的液化产率有所降低。

精神型领导与员工创造力关系研究:领导—成员交换的中介作用

文章研究了精神型领导对员工创造力的影响,探讨了精神型领导通过领导—成员交换对员工创造力的间接作用。借助结构方程模型,分析393份问卷发现,精神型领导正向影响员工创造力、领导—成员交换,领导—成员交换与员工创造力正相关,领导—成员交换在此过程中具有部分中介作用。这对提高精神型领导效率、增强组织和个体的创造活力具有重要意义。

基于平面梁单元的分阶段成形结构线形控制方程

为探讨分阶段成形结构最终目标线形与无应力状态量的关系,选择目标线形以大地坐标为参照,将外力势定义为外力相对于坐标轴的力势,以单元无应力状态作为起点计算结构总应变能。由势能驻值原理建立结构线形控制方程,该方程根据目标线形可以惟一确定结构中各个单元的无应力状态量,只要保证各个单元按照无应力状态量对应的单元构形进行安装,成形后的线形必将自动逼近目标线形,与具体的成形过程无关。通过数值分析表明,所建立的线形控制方程是准确可靠的,可用于分阶段成形结构的线形控制计算。

左旋盐酸去甲基苯环壬酯对MPTP诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用(英文)

目的探究M4受体选择性拮抗剂左旋盐酸去甲基苯环壬酯(R-DM8021)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导人多巴胺能神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用。方法预先给予不同浓度R-DM8021(1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6)mol·L^(-1))孵育SH-SY5Y细胞1 h后,加入MPTP1 mmol·L^(-1)共孵育24 h,MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量,TUNEL法观察细胞凋亡形态,Western蛋白印迹法检测细胞凋亡相关蛋白Bax和胱天蛋白酶3前体蛋白表达水平。结果 MTT结果显示,与细胞对照组相比,MPTP 1 mmol·L^(-1)作用SH-SY5Y细胞24 h,细胞存活率显著降低至(44.5±2.7)%(P<0.01);与MPTP组相比,预先给予R-DM8021(1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6)mol·L^(-1))均可逆转MPTP对SH-SY5Y细胞的损伤作用,细胞存活率分别提高至(80.5±4.7)%,(71.5±8.1)%,(74.4±6.5)%和(61.3±3.2)%(P<0.01)。流式细胞检测结果显示,与细胞对照组相比,MPTP 1 mmol·L^(-1)作用SH-SY5Y细胞24 h,细胞内ROS含量显著升高至129±22(P<0.01);与MPTP组相比,预先给予R-DM8021(1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6)mol·L^(-1))显著降低MPTP诱导的胞内ROS释放,细胞内ROS含量降低至84±12,86±15,86±6和88±8(P<0.05)。TUNEL检测显示,与细胞对照组相比,MPTP 1 mmol·L^(-1)作用SH-SY5Y细胞24 h,贴壁细胞染色质皱缩,核膜裂解,并产生大量凋亡小体;与MPTP组相比,预先给予R-DM8021 1 nmol·L^(-1)可显著改善MPTP诱导的细胞凋亡,凋亡小体显著减少。Western蛋白印迹结果显示,与MPTP组相比,R-DM8021 1 nmol·L^(-1)可显著抑制MPTP诱导SH-SY5Y细胞凋亡,降低Bax和胱天蛋白酶3前体蛋白的表达(P<0.01)。结论 R-DM8021能有效对抗MPTP诱导的SH-SY5Y细胞损伤,其机制与提高细胞存活率,降低胞内ROS含量,抑制细胞凋亡有关。

SWOT工具下的地方绿茶品牌营销策略——以乳山绿茶为例

运用SWOT分析工具,对乳山绿茶自身的优势、劣势以及外部环境带来的机会、威胁进行分析,为乳山绿茶企业的发展提供相关建议,以实现地区茶叶经济的提高。

《林海雪原》中姓名称谓语的英译特征研究——以《中国文学》中沙博理英译文为例

采用了《中国文学》中翻译家沙博理的节选译本(3~8章),借助平行语料库,通过定性与定量相结合的方法,对两个文本进行详细的对比与分析,深入探究了小说《林海雪原》中姓名称谓语的英译特征,认为沙博理在处理姓名称谓语的翻译时呈现出两种倾向,对于重塑人物形象、显示人物关系、深化小说主旨产生了一定的影响。

“狂人”高二适的“君子之学”

20世纪书法史上,高二适在章草方面的造诣和研究至为深刻。他不仅著有《新定急就章及考证》,还开创了狂草新体,自命为"草圣"而被贴上了"狂人"的标签。考察高二适的书学观念,可发现其理念及方法与理学家曾国藩极为相似。高二适对章草的研究和传习,严谨而率性;在对书家的评论和审美趣味的追求上,他抑怀素而褒杨凝式,推崇的是"中和"的观念,可以说,高二适的书学之道并不是"狂",而是"君子之学"。

精品资源共享课对我国MOOC建设的启示

自2012年起,MOOC因在课程建设方面取得了突破性和创新性的成果而引起国内外各界的广泛关注。作为开放教育资源的最新研究成果,MOOC是在精品资源共享课进一步发展面临诸多挑战的背景下兴起的,通过不断地探索与创新,MOOC对精品资源共享课进行了转型与升级,加快了在线教育前进的步伐。但此次转型升级只突破了部分难题,还需要在国家前期精品资源共享课建设成果的基础上进行更深入的研究,以使MOOC在未来的在线教育领域内发挥出更大价值并取得长足发展,进而逐步探索出适合我国MOOC发展的道路。

高迁移率蛋白-1在全身炎症反应综合征患者中的价值分析

目的 观察全身炎症反应综合征(SIRS)患者血清高迁移率蛋白-1(HMGB1)在疾病不同程度分组中的差别及与感染存在的相关性.方法 符合SIRS诊断标准的病人60例,入院后做可疑感染分泌物和排泄物等细菌培养,同时肘静脉穿刺取血进行HMGB1测定和APACHE-Ⅱ评分.根据疾病严重程度分为三组:轻度SIRS组,重度SIRS组和休克组,再根据细菌培养结果分为脓毒症组和非脓毒症组,并设对照组.结果 轻度SIRS组,重度SIRS组,休克组HMGB1含量与对照组之间的差异具有统计学意义(P【0.01);重度SIRS组和休克组HMGB1含量与轻度SIRS组之间的差异具有统计学意义(P【0.01);而重度SIRS组和休克组之间的差异无统计学意义(P】0.05).APACHE-Ⅱ评分在三组之间的差异均具有统计学意义(P【0.01).脓毒症组和非脓毒症组抵抗素含量之间的差异具有统计学意义(P【0.01),两组与对照组之间的差异均具有统计学意义(P【0.01).结论 HMGB1可作为判断SIRS患者疾病的严重程度和预后指标,也可作为区分脓毒症和非脓毒症SIRS的参考指标.