Rspo3/Lgr5促进N-钙黏蛋白表达参与小鼠肝损伤

目的本文旨在研究在损伤肝组织中,特异性顶部盘状底板反应蛋白3(R-spondin3,Rspo3)上调周细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin,Ncad,基因名Cdh2)表达,从而参与小鼠肝损伤。方法采用反转录实时定量聚合酶链反应法(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)测定Rspo3,小鼠肝组织富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 5,Lgr5)和Cdh2 mRNA表达情况;采用蛋白质免疫印迹方法以及免疫荧光染色方法测定Ncad定位以及表达情况;分离并培养小鼠原代骨髓间充质细胞(bone marrow mesenchymal stromal cell,BMSC),采用靶向Lgr5的RNA干扰实验以确定Rspo3是否通过作用于Lgr5上调Ncad表达。结果在损伤小鼠肝组织中,Rspo3及其受体Lgr5显著上调;肝损伤时黏附连接蛋白Ncad表达上调,且与Rspo3及Lgr5表达量呈正相关;Ncad主要定位于损伤肝脏的周细胞;使用Rspo3处理小鼠原代BMSC能够上调Ncad表达,Lgr5 siRNA能使Ncad水平下降。结论在小鼠损伤肝组织中,Rspo3通过作用于受体Lgr5,上调周细胞中Ncad表达,从而影响小鼠肝损伤。

R钙粘蛋白抑制涎腺腺样囊性癌的侵袭和转移

目的 明确R钙粘蛋白(R-cadherin,R-cad)在涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)中的作用。方法 首先通过免疫组织化学染色比较R-cad在涎腺腺样囊性癌组织和癌旁正常涎腺组织中的表达差异。之后,选取涎腺腺样囊性癌高转移细胞株SACC-LM,通过siRNA干扰技术有效下调R-cad表达,通过迁移小室迁移实验和侵袭小室侵袭实验以及裸鼠肺转移瘤模型实验,检测R-cad表达下调后,SACC-LM细胞迁移和侵袭能力的改变。结果 免疫组织化学染色显示,相对于癌旁正常涎腺组织,R-cad在涎腺腺样囊性癌组织中的表达量降低;迁移小室和侵袭小室实验证明,Rcad表达下调后,SACC-LM细胞的迁移能力和侵袭能力增强;裸鼠肺转移瘤模型实验证明,R-cad表达下调的SACC-LM细胞在裸鼠体内形成更多的肺转移灶。结论 在涎腺腺样囊性癌中R-cad可能有抑制涎腺腺样囊性癌细胞迁移、侵袭和远处转移的作用。

E-cadherin和γ-catenin的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的研究E-钙黏附素(E-cad)和γ-连环素(γ-cat)在胃癌组织中的表达及其与胃癌侵袭转移的关系。方法用SP免疫组织化学方法检测45例胃癌组织及20例癌旁组织中E-cad和γ-cat的表达。结果胃癌组织中E-cad和γ-cat的阳性率均显著低于癌旁组织(P<0.05)。E-cad和γ-cat的表达均与胃癌的分化程度、浸润深度、临床分期、淋巴结转移、是否有远处器官转移密切相关(P<0.05)。胃癌组织中E-cad和γ-cat的表达呈正相关(P<0.05)。结论 E-cad,γ-cat的表达在胃癌演进、浸润及侵袭转移等方面起着重要作用,检测其表达对胃癌的早期诊断和预后有重要的临床应用价值。

宫颈上皮内瘤变组织IL-12B和E-cadherin 及ALOX12B与HPV感染的关系

目的探讨白细胞介素-12B(IL-12B)、上皮型钙黏素(E-cadherin)和12(R)-脂加氧酶(ALOX12B)在宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达及其与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法选取2019年7月-2020年7浙江省台州医院收治的238例CIN患者为研究组,同期进行宫颈组织活检的188例宫颈炎患者为对照组。研究组患者根据宫颈病变程度,分为Ⅰ级组59例、Ⅱ级组137例、Ⅲ级组42例;根据HPV感染情况,分为无感染组38例、低危HPV感染组49例、高危HPV感染组151例,根据ALOX12B mRNA水平检测情况分为高表达组187例和低表达组51例。采用免疫组化法和聚合酶链反应(PCR)测定两组宫颈组织中IL-12B、E-cadherin和ALOX12B蛋白和表达mRNA含量,分析其与CIN级别、HPV感染的关系。结果研究组ALOX12B免疫组化乘积和mRNA含量均高于对照组,IL-12B和E-cadherin免疫组化乘积和mRNA含量均低于对照组(P<0.05)。Ⅲ级组患者ALOX12B免疫组化乘积,mRNA含量高于Ⅰ级组和Ⅱ级组;Ⅲ级组患者IL-12B和E-cadherin免疫组化乘积、mRNA含量均低于Ⅰ级组(P<0.05)。高危HPV感染组患者ALOX12B免疫组化乘积、mRNA含量均高于无感染组,IL-12B和E-cadherin表达低于无感染组(P<0.05)。ALOX12高表达患者CIN宫颈组织中PI3K、ERK1、Ki67的mRNA含量高于ALOX12B低表达组(P<0.05)。结论 CIN宫颈组织中ALOX12B表达上调、IL-12B和E-cadherin表达下调或缺失,可能参与高危HPV感染导致宫颈癌的发生发展过程。