针对非洲猪瘟病毒K205R基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为了快速、准确检测非洲猪瘟病毒(African swin fever virus,ASFV),本文根据我国流行毒株ASFV SY18(GenBank ID:MH766894.1)已公布的K205R基因序列设计并合成特异性引物及探针,建立针对K205R基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法。经过特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测试验分析显示,本文建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法Ct值与标准品在1×10^(11)~1×10^(2)copies/μL范围内具有很好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-2.797,检测下限为10^(2)copies/μL,与其他能引起相似临床症状的猪源病毒无交叉反应。重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于1.53774%,重复性好。本方法适用于临床样品及本实验室构建的表达ASFV K205R基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴定及检测,对ASFV快速检测及ASF早期诊断有重要意义。

基于4R理论对“K12线上教育”营销策略的研究——以作业帮为例

“K12线上教育”近年来发展迅猛,但一直存在问题。本文以作业帮为例,运用4R营销理论研究该行业的营销策略,寻找其问题所在,并根据理论提出优化策略,尝试为行业健康发展寻找正确方向。研究表明,K12线上教育行业要让营销策略以学习服务为中心、以教育服务为基石。降低行业的功利性、淡化营销色彩、专注教育本身、与用户互利共赢,是K12线上教育行业健康发展的必由之路。

基于迁移学习与改进的Mask R-CNN液晶屏缺陷检测方法

针对液晶屏生产过程中出现的表面划痕、脏点、裂痕等细微缺陷,在有限数据集下探寻一种既能提高液晶屏表面缺陷的检测精度和速率又能满足实际工厂检测要求的检测方法,意义重大。基于此,本文提出一种基于迁移学习与改进的Mask R-CNN液晶屏缺陷检测方法,可解决传统的图像缺陷检测方法无法有效利用特征信息进行高精度检测与漏检的问题。设计K-means算法对缺陷液晶屏标注框进行聚类以获得合适的长宽比和锚框个数,并对改进的Mask RCNN模型应用本文数据集对缺陷区域特征提取并进行训练分类。为加速模型收敛,利用迁移学习思想将DAGM 2007数据集在本文改进模型上预训练并得到最优权重且迁移到液晶屏缺陷检测任务中。同时与主要目标检测方法进行对比,结果表明:通过引入迁移学习与改进的Mask R-CNN方法,能在样本较少的情况下准确识别背景复杂且微小瑕疵缺陷,测试集缺陷识别达到95.25%,较改进前综合提升5%。

以原核表达的非洲猪瘟病毒pK205R蛋白为包被抗原的间接ELISA抗体检测方法的建立

为建立快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的血清学方法,本研究原核表达ASFV pK205R重组蛋白,并以其为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种快速的ASFV间接ELISA检测方法。结果显示,原核表达的ASFV pK205R蛋白约为44 ku,western blot证实表达蛋白具有良好的反应原性;以其作为包被抗原建立的ASFV抗体间接ELISA方法仅对ASFV血清检测为阳性,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、副猪嗜血杆菌及猪大肠杆菌阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性;该方法检测灵敏度为1∶2 560;批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%;利用该方法对临床样品检测的结果与国外商品化试剂盒检测结果符合率为100%。本研究建立的ASFV抗体间接ELISA方法为防止该病传入我国以及ASFV的实时监测提供技术储备。

负载型TiO_2膜太阳光光催化降解活性深蓝K-R的研究

采用抛物线槽型反应装置,研究了玻璃弹簧和微珠负载型TiO2膜太阳光催化降解活性深蓝K-R,结果表明,由于玻璃弹簧具有良好的光透距离,脱色性能显著优于玻璃微珠,玻璃弹簧为载体,水溶液浓度为15 mg/L,pH为3,流速为20 mL/s,太阳光强度在1200μW/cm2以上,光降解6 h时,脱色率达到96%;该降解反应可用一级反应动力学方程进行描述,反应速率常数(K)与光强I的关系为:K∝I1.92。

非1B/1R类型和1B/1R类型小麦K型雄性不育系比较研究

利用非 1B/ 1R类型小麦 K型不育系 KTSP3314A和 1B/ 1R类型小麦 K型不育系 K3314A,分别与10个普通小麦品种 (系 ) 2 5 9,36 6 5 ,TB90 2 ,F10 7,J18,R2 0 5 ,L783,5 0 3,3380和 78115杂交 ,测定和比较其恢复性、单倍体发生频率和主要农艺性状。结果表明 ,非 1B/ 1R类型小麦 K型不育系比 1B/ 1R类型小麦 K型不育系更易恢复 ;不育系本身不产生单倍体 ,其杂交种 F1 产生极少或不产生单倍体 ;农艺性状除了株高具有明显的优势外 ,其他均无不利的遗传效应。

R树上溢结点增量式k均值聚类优化分裂方法

R树能较好地满足逆向工程、CAD/CAM、机器视觉等领域的动态数据维护及空间查询需求,而CR树是其优秀的变体之一。针对CR树的上溢结点分裂算法存在的聚类结果不理想以及计算代价过高等问题,提出一种主元分析导向的增量式k均值算法,可在既有分类中心附近的第一主元方向上搜索新的初始分类中心。将该算法与Silhouette指标相结合应用于求解由上溢结点分裂问题所转化的点集聚类问题,能以较小的计算代价自适应获取近似全局最优的点集聚类结果。试验结果表明,基于增量式聚类的R树上溢结点分裂算法在R树构建效率、存储利用率及空间查询等方面的综合性能优于CR树与RR*树。

随机正则(k,r)-SAT问题的可满足临界

研究k-SAT问题实例中每个变元恰好出现r=2s次,且每个变元对应的正、负文字都出现s次的严格随机正则(k,r)-SAT问题.通过构造一个特殊的独立随机实验,结合一阶矩方法,给出了严格随机正则(k,r)-SAT问题可满足临界值的上界.由于严格正则情形与正则情形的可满足临界值近似相等,因此得到了随机正则(k,r)-SAT问题可满足临界值的新上界.该上界不仅小于当前已有的随机正则(k,r)-SAT问题的可满足临界值上界,而且还小于一般的随机k-SAT问题的可满足临界值.因此,这也从理论上解释了在相变点处的随机正则(k,r)-SAT问题实例通常比在相应相变点处同规模的随机k-SAT问题实例更难满足的原因.最后,数值分析结果验证了所给上界的正确性.

MapReduce框架下基于R-树的k-近邻连接算法

针对大规模空间数据的高性能k-近邻连接查询处理,研究了MapReduce框架下基于R-树索引的k-近邻连接查询处理.首先利用无依赖并行和串行同步计算的形式化定义抽象了MapReduce并行编程模型,基于此并行计算模型抽象,分别提出了R-树索引快速构建算法和基于R-树的并行k-近邻连接算法.在索引构建过程中,提出一种采样算法以快速确立空间划分函数,使得索引构建符合无依赖并行和串行同步计算抽象,在MapReduce框架下非常容易进行表达.在k-近邻连接查询过程中,基于构建的分布式R-树索引,引入k-近邻扩展框限定查询范围并进行数据划分,然后利用R-树索引进行k-近邻连接查询,提高了查询效率.从理论上分析了所提出算法的通信和计算代价.实验与分析结果表明,该算法在真实数据集的查询上具有良好的效率和可扩展性能,可以很好地支持大规模空间数据的k-近邻连接查询处理,具有良好的实用价值.

IL-27通过信号通路p38 MAPK和PI3K途径调节中性粒细胞Mac-1、fMLP-R及IL-1β表达

本研究探讨IL-27调节人外周血中性粒细胞中黏附分子Mac-1、趋化因子受体fMLP-R和促炎因子IL-1β表达的信号通路。采用Ficoll密度梯度离心及低渗裂解残存红细胞方法分离高纯度的外周血中性粒细胞。用RT-PCR方法检测中性粒细胞IL-27受体(WSX-1/TCCR和gp130)mRNA表达。分别应用IL-27及信号通路p38 MAPK、PI3K和ERK抑制剂SB203580、LY294002、U0126处理中性粒细胞,用实时定量RT-PCR检测作用前后fMLP-R和IL-1βmRNA水平变化;应用放射免疫法检测作用前后培养上清液中IL-1β的水平变化;流式细胞术检测作用前后Mac-1表达水平变化。结果表明:人外周血中性粒细胞协同表达IL-27受体的两个亚单位WSX-1/TCCR和gp130,IL-27下调中性粒细胞表面黏附分子Mac-1表达(p<0.05),SB203580阻断了IL-27对Mac-1的下调作用(p<0.05),而LY294002及U0126无阻断作用(p>0.05)。相反,IL-27上调中性粒细胞中fMLP-R和IL-1βmRNA的表达并能增加IL-1β释放(p<0.05),LY294002阻断了IL-27对fMLP-R和IL-1β的上调作用(p<0.05),而SB203580及U0126无阻断作用(p>0.05)。结论:IL-27与IL-27R相互作用,可能通过p38 MAPK和PI3K信号途径调节人外周血中性粒细胞中Mac-1、fMLP-R及IL-1β表达。

槲皮素对K562和K562R细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察槲皮素(Qu)对伊马替尼(IM)敏感细胞K562及耐药细胞K562R的增殖、凋亡、细胞周期的影响,探讨凋亡及细胞周期调控因子、Wnt/β-catenin信号通路及BCR-ABL的表达变化,为Qu的临床应用提供实验室依据。方法:应用台盼蓝染色法检测K562和K562R细胞的增殖水平;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的分布;荧光定量PCR及Western blot法分别检测Wnt/β-catenin信号通路成员、细胞凋亡及细胞周期相关因子的mRNA及蛋白的表达。结果:经Qu 5、10、20、40、80、160、320μmol/L作用于K562细胞后,K562细胞抑制率分别为5.07%、5.98%、11.09%、31.88%、56.89%、70.44%、86.63%;K562R细胞抑制率分别为4.99%、9.75%、10.54%、8.93%、25.13%、46.89%、68.60%。K562、K562R的IC50分别为76.4和230.2μmol/L。Qu 50、100和200μmol/L可诱导K562和K562R细胞凋亡(r=0.9914),使细胞周期阻滞于G1期(r=0.9871),且呈剂量依赖趋势。与对照组比较,Qu作用于K562后,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9及p21、p27 mRNA及蛋白(Caspase-9除外)表达均有升高(P<0.05),K562R细胞除p27外,其他mRNA和蛋白(Caspase-3除外)均表达增加。Wnt/β-catenin信号通路成员GSK-3β、β-catenin、Lef-1,下游靶向PPAR-δ、Cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05)。BCR-ABL mRNA表达降低,但BCR-ABL及p-BCR-ABL蛋白表达无明显变化。结论:Qu能够抑制K562及K562R细胞的增殖,降低其耐药性,增加敏感性,这与Qu抑制Wnt/β-catenin信号通路、激活凋亡途径及细胞周期因子相关。

GRkNN:空间数据库中组反k最近邻查询

反k最近邻(Reversek-Nearest-Neighbor,RkNN)查询是在k最近邻(k-Nearest-Neighbor,kNN)查询问题的基础上产生的,获得将查询对象作为kNN的数据对象集合,RkNN可以用于评价查询对象的影响力.根据实际应用中需要查询一组对象的RkNN,如评价连锁店或商业区的影响.文中提出了针对空间数据库的组反k最近邻(Group RkNN,GRkNN)的概念,并设计了相关算法.查询点集合是一组邻近的空间对象,计算查询对象的最小覆盖圆,将最小覆盖圆中的对象作为一个整体进行过滤,设计了基于R树的剪枝方法,通过提炼获取了最终的GRkNN结果.针对真实数据集进行的大量实验表明,提出的GRkNN算法的效率明显优于目前最好的RkNN算法.

粉煤灰的活化及其对活性深蓝K-R的吸附

以粉煤灰(FA)经碱熔融和酸处理制得活性粉煤灰(AFA),并将其用于模拟废水中活性深蓝K-R的吸附,探讨了AFA的制备条件和影响吸附的因素。结果表明:在m(Na2CO3)∶m(FA)为1∶5,焙烧温度为850℃,HCl浓度为4mol/L,搅拌溶解温度为80℃的制备条件下,所制得的AFA对3500mg/L活性深蓝K-R的吸附量为335.98mg/g,活性深蓝K-R去除率达94.5%;染料起始浓度、pH、吸附时间和温度均对吸附效果产生影响;吸附动力学可用准二级吸附动力学方程进行描述(R2=1.000);等温吸附符合Langmuir方程。AFA可有效去除水溶液中高浓度的活性深蓝K-R。

基于M-K检验法与R/S法的宜宾市降水量分析

依据宜宾市1963—2012年的年均降水量数据,运用Mann-Kendall法、R/S法对宜宾市的年均降水量变化趋势及特征进行分析.结果表明:宜宾市近50年年均降水量总体呈波状下降趋势,并以56.36 mm/10 a的速率递减.进一步对宜宾市的年均降水量进行Mann-Kendall突变分析,得出突变年份为1990年,R/S法分析发现宜宾市近50年年均降水量的Hurst指数为0.698 7,具有持续性特征,由此表明在将来一段时间内,其年均降水量仍具有持续下降趋势.同时诊断发现该序列存在变异点,变异年份在1982年.

TiO_2/凹土光催化剂降解活性深蓝K-R动力学

通过溶胶-凝胶法制备纳米TiO2,并将其负载在凹土上,制得TiO2/凹土光催化剂,用其处理活性深蓝K-R模拟印染废水,通过改变溶液初始浓度,考察TiO2/凹土光催化剂对活性深蓝K-R模拟印染废水的脱色情况,并进行动力学研究。结果表明:溶液初始浓度越低相对去除率越高,但绝对去除量随初始浓度的增大而增大;光催化降解符合一级动力学方程。

企业生态位K-r选择策略研究

企业生态位是企业在特定时期特定生态系统内与环境及其他企业相互作用过程中所占据的相对地位。企业在自然选择过程中,经历长期对市场环境的适应,分别形成K策略企业和r策略企业以及K-r策略连续系统。根据企业生态位K-r产业分类策略对我国制造业进行研究,发现我国制造业集中水平与K-r产业分类吻合程度较差,大中型企业行为远离企业生态位K-r策略。经济主管部门应当努力消除现存的r和!r产业的大型企业,提高K和!K产业的集中度,以促进制造业稳定、协调有序发展。

PI3K、ERK、IGF-1R和ER蛋白在宫颈癌细胞株中的表达及意义

目的研究体外特定细胞株(C33a、HaCaT及SiHa)中磷酸肌醇3激酶(PI3K)、细胞外调节激酶(ERK)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)和雌激素受体(ER)蛋白的表达量,分析各蛋白的表达与HPV16感染致癌的关系。方法培养C33a、HaCaT及SiHa 3种细胞,采用蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测IGF-1R、PI3K、ERK和ER蛋白在3种细胞株中的表达水平。结果 IGF-1R、PI3K和ERK蛋白在SiHa细胞株中的表达高于在C33a、HaCaT细胞株中的表达,差异有统计学意义(P<0.05),而在SiHa细胞株中ER的表达低于在C33a细胞株中的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PI3K、ERK、IGF-1R和ER蛋白在宫颈癌细胞株中呈现不同程度的表达,可能与HPV16感染后宫颈癌变存在一定的关系。

miR-155靶向调节PIK3R1对类风湿关节炎大鼠模型PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的 探讨miR-155靶向调节PIK3R1对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-155 agomir组、miR-155 antagomir组、miR-155阴性对照组,诱导RA模型,分组处理后,观察关节症状,检测关节炎指数及后足趾容积;HE染色观察大鼠关节组织病理形态;使用试剂盒检测大鼠关节组织炎性因子IL-6、IL-17及IL-18水平;免疫印迹检测大鼠关节组织PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白表达;qRT-PCR实验检测大鼠关节组织miR-155及PIK3R1 mRNA水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-155对PIK3R1的靶向调控作用。结果 与对照组比较,模型组大鼠关节炎症状明显,关节炎指数、后足趾容积、关节组织炎性因子IL-6、IL-17及IL-18水平、关节组织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt及p-mTOR/mTOR水平、关节组织miR-155水平明显升高(P<0.05),PIK3R1 mRNA水平明显降低(P<0.05)。与模型组、miR-155阴性对照组比较,miR-155 antagomir组大鼠上述指标得到明显改善(P<0.05);miR-155 agomir组与miR-155 antagomir组趋势相反(P<0.05)。结论 miR-155可靶向下调PIK3R1的表达,激活PI3K/Akt/mTOR信号,加重RA大鼠关节炎症损伤,下调miR-155表达,可抑制PI3K/Akt/mTOR信号激活及炎症反应发生发展,改善关节炎症状。

基于Voronoi划分的位置数据KNN查询处理方法

K最近邻(KNN)查询是空间数据查询研究的重要内容。目前的KNN查询方法在处理大规模的位置数据时,存在着更新和查找失衡的问题,导致查询效率较低。因此,提出基于Voronoi划分的位置数据KNN查询处理方法。首先,创建了一个二级空间索引结构VRI,包含VHash和VR树两部分。一级索引结构VHash表示Voronoi图的直邻;二级索引结构VR树,按照各Voronoi单元所在的最小矩形区域的重叠面积,自下而上地生成对应的R树。其次,基于VRI索引结构提出了位置数据的KNN查询算法及动态维护算法,在KNN查询方法中,采用VR树进行定位,VHash查找K近邻,能够有效地对查询点定位,查找速度快。再次,针对数据更新的情况,索引结构也能够及时更新,在更新的时间段内,对于位置数据随时间变化的KNN查询,提出了利用记录表进行有效查询的方法。最后,实验表明,提出的基于Voronoi划分的空间索引结构和其对应的KNN查询算法均具有较好的性能和适应性。

无K_(1,r)图中的哈密顿圈(英文)

本文借助于对图的本质独立集和图的部分平方图的独立集的研究,对无K1,r图中哈密顿圈的存在性给出了八个充分条件.我们将利用T-插点技术对这八个充分条件给出统一的证明.本文的结果从本质上改进了C-Q.Zhang于1988年利用次形条件给出的k-连通无爪图是哈密顿图的次型充分条件;同时,G.Chen和R.H.Schelp在1995年利用次型条件给出的关于k-连通无K1、4图是哈密顿图的充分条件也被我们的结果改进并推广到无K1,r图.