PPP1R3A基因多态性与中国维吾尔族人群精神分裂症关联性研究

目的探索蛋白磷酸酶1调节亚基3A(protein phosphatase 1 regulatory subunit 3A, PPP1R3A)基因外显子区域基因位点多态性与中国维吾尔族人群精神分裂症的关联性。方法利用多重PCR靶向捕获二代测序技术对528例维吾尔族精神分裂症患者及576名维吾尔族正常对照进行PPP1R3A基因外显子区域DNA扩增,Illumina HiSeq X Ten平台进行高通量测序,用阳性与阴性症状量表(positive and negative symptoms scale, PANSS)评估患者病情严重程度。结果患者组与对照组之间PPP1R3A基因rs1800000位点等位基因和基因型频率差异有统计学意义(P<0.05);rs1799999位点基因型频率在女性患者组与对照组间差异有统计学意义(P<0.05);rs8192686位点在男性患者组与对照组间等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PPP1R3A基因rs1800000位点多态性可能与中国维吾尔族人群精神分裂症的发生发展存在关联性;rs1799999位点多态性可能与中国维吾尔族女性精神分裂症的发病有关联性;rs8192686位点C等位基因可能与中国维吾尔族男性精神分裂症发病有关联性。

PPP2R3A基因在乙肝相关性肝癌中的表达及临床意义

目的探讨蛋白磷酸酶2A调节亚基B''α(protein phosphatase 2 regulatory subunit B″alpha,PPP2R3A)在乙肝相关性肝癌中的表达及临床意义。方法利用免疫组织化学方法检测PPP2R3A蛋白在70例乙肝相关性肝癌和40例良性肝病组织中的表达,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测PPP2R3A在肝癌患者外周血中的蛋白水平表达,运用统计学方法分析PPP2R3A蛋白水平的表达与乙肝相关性肝癌临床病理学指标的关系。结果PPP2R3A蛋白在肝癌组织中的表达主要定位于细胞质,其在肝癌组织中的表达明显高于癌周组织(P<0.001),并且PPP2R3A蛋白在肝癌组织中的表达明显高于良性肝病(P<0.001)。PPP2R3A蛋白的表达强度与肝癌患者的AFP值(r=0.256,P=0.032)具有统计学差异。ELISA结果也显示PPP2R3A蛋白在肝癌患者外周血中的表达量明显高于其在良性肝病中的表达(P=0.033),与免疫组织化学结果一致。结论PPP2R3A蛋白在乙肝相关性肝癌组织及血清中呈高表达,且与肝癌的临床病理特征有相关性,可能与肝癌的发生发展有关。

晚疫病过敏反应阻断突变体抗氧化酶与相关基因的变化分析

马铃薯抗晚疫病基因R3a和Avr3a互作符合基因对基因假说.为了解R3a和Avr3a基因互作后过敏反应(HR反应)发生机制,本实验利用一个在番茄中构建的MM-R3a-Avr3a系统,以两份筛选到的HR反应被阻断的突变体为材料,研究它们在喷施诱导剂地塞米松(DEX)诱导Avr3a基因表达后活性氧爆发、活性氧清除酶和抗氧化基因的变化情况.结果显示:MM-R3a-Avr3a在DEX处理后有O2-产生和H2O2累积并产生整株的HR反应并导致植株死亡,在突变体中也有O2-产生和H2O2累积却没有导致细胞死亡,说明突变基因与HR反应的发生关系密切;DEX处理后抗氧化酶基因SOD、PPO、CAT在转基因番茄MM-R3a-Avr3a和突变体中的变化有明显差异,由此推测番茄突变体中关键基因的突变导致活性氧清除酶和相关基因的表达发生变化.该研究为探索HR反应的发生机制及了解晚疫病抗病基因抗病机理的打下基础.

过表达蛋白磷酸酶的调节亚基B″α基因对肝癌细胞增殖和侵袭的影响

目的研究过表达蛋白磷酸酶2A的调节亚基B″α对肝癌细胞增殖与侵袭能力的影响。方法通过免疫组织化学法分析癌组织及癌周组织中PPP2R3A表达;用慢病毒载体构建稳定过表达PPP2R3A的肝癌细胞系(Huh-7和HepG2),通过CCK-8,流式细胞仪、transwell小室实验分别检测稳转肝癌细胞系增殖、周期、凋亡以及侵袭转移的生物学行为的改变,并构建裸鼠皮下瘤模型验证肝癌细胞生长情况。计量资料组间比较用/检验。结果人肝癌癌组织中PPP2R3A基因的表达高于癌旁;过表达PPP2R3A基因后,肝癌细胞的吸光度值⑺值)增加(P<0.05),细胞周期G期向S期转换显著增多,即细胞周期S期减少(Huh-7:t=3.04,P=0.0384,HepG2:t=4.06,P=0.0153),S期增多(Huh-7:t=3.47,P=0.0255;HepG2:t=4.46,P=0.0112);早期凋亡率减少(Huh-7:t=7.34,0.0018;HepG2:t=4.06,P=0.0153);Huh-7细胞中,迁移到下室的数目明显增多(t=3.18,P=0.0334),铺上基质胶后到达下室的细胞数目同样增多(t=2.84,P=0.0464),动物实验结果显示其过表达组的裸鼠皮下瘤生长显著增加(t=4.31,P=0.0035).蛋白质印迹法实验结果显示剪切体的PARP和P53蛋白表达减少,而β-catenin蛋白在肝癌细胞的积累增多。结论过表达PPP2R3A基因可能促进肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力,抑制凋亡,诱导G1/S期转换,参与影响肝癌细胞生物学行为。