MC5R介导鹅肌肉对营养/能量水平变化的响应

为探究黑皮质素受体MC5R在鹅营养/能量代谢中的作用及其机制,着重检测禁食/再饲喂模型中鹅胸肌和营养/能量代谢相关因子处理后鹅原代胸肌细胞中MC5R的mRNA表达水平,通过过表达MC5R后的转录组测序分析筛查MC5R调控的基因与通路,以及检测活体和细胞模型中MC5R下游基因的mRNA表达量。结果表明:肌肉中MC5R的表达为禁食所诱导,而这种诱导可被再饲喂所抑制;鹅原代肌细胞中MC5R的表达可被葡萄糖和油酸所诱导,但被甲状腺素所抑制;MC5R过表达影响的差异表达基因主要富集于糖脂代谢和炎症相关的通路;在鹅活体和细胞模型中筛选到的PLA2G4A、PTGS2、TRAF2、IL6和PLPP4基因可能介导MC5R的生物学作用。综上,MC5R可能通过糖脂代谢和炎症相关通路介导鹅肌肉中营养/能量水平变化所引起的生物学效应。

猪MC5R基因在7个群体中的基因型分布研究

MC5R基因是黑素皮质素受体家族的一员,与动物肥胖相关。利用PCR-RFLP技术,对该基因在猪7个不同群体的多态性进行了检测,发现在大白、梅山、大梅和梅大群体只有AA型,长大只有AB型,在长白猪群体则3种基因型均有分布。

鸡、鸭、鹅MC5R真核表达载体及突变型的构建及信号通路初探

试验旨在构建鸡、鸭、鹅黑素皮质素受体5(Melanocortin Receptor-5,MC5R)及其突变体的真核表达载体,并比较野生型与突变体MC5R在人源胚胎肾细胞(HEK293T)中的表达及功能的差异。从三种家禽血液中分别提取全基因组DNA,以其为模板,用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因编码区。用同源重组方法将扩增的目的基因片段定向插入表达载体pcDNA3.1(+)中。单点突变构建pcDNA3.1(+)-MC5Rs突变型。用脂质体法将三种禽类野生型和突变型重组质粒pcDNA3.1(+)-MC5Rs分别瞬时转染入HEK293T细胞中,用双萤光素酶报告基因法检测胞内第二信使cAMP水平的变化来反应受体的表达和激活情况。结果表明:成功构建了鸡、鸭、鹅MC5R真核表达载体与各3个突变型(D119A、F254A和H257A)。在HEK293T细胞中表达时,与野生型相比,F254A的基础活性大幅升高,D119A与H257A的基础活性变化不大;D119A与H257A对激动剂α-MSH的反应活性完全丧失,F254A对于激动剂α-MSH的反应活性降低,为进一步研究体外鸡、鸭、鹅MC5R功能奠定基础。

小尾寒羊GDF5和MC2R基因多态性与产羔数的关联分析

旨在探究小尾寒羊生长分化因子5(GDF5)基因g.64245490A>G位点多态性和黑皮质素受体2(MC2R)基因g.43896005C>T位点多态性与小尾寒羊产羔数之间的关系,为绵羊高繁殖力机理研究和多羔新品系的选育提供参考。采用重测序和Sequenom MassARRAY^(■)SNP技术对380只小尾寒羊GDF5基因g.64245490A>G位点和MC2R基因g.43896005C>T位点进行多态性检测,并与产羔数进行关联分析。结果表明,GDF5基因g.64245490A>G位点存在AA、AG和GG三种基因型,频率分别为0.40、0.16和0.44,MC2R基因g.43896005C>T位点存在CC和CT两种基因型,频率分别为0.95和0.05;群体遗传学分析结果表明,g.64245490A>G位点为中度多态性(0.25<PIC<0.5),g.43896005C>T位点则表现为低度多态性(PIC<0.25);卡方适合性检验结果表明,g.64245490A>G位点在小尾寒羊群体中处于哈代-温伯格不平衡状态(P<0.05),g.43896005C>T位点处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05);关联分析表明,GDF5基因g.64245490A>G位点和MC2R基因g.43896005C>T位点的多态性与小尾寒羊各胎产羔数之间均无显著性关联(P>0.05)。综上可知,GDF5基因g.64245490A>G位点和MC2R基因g.43896005C>T位点与小尾寒羊产羔数性状没有显著关联,即此2个位点均不适用于小尾寒羊多羔性状的选育。

Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞增殖作用的影响

目的探讨Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞系Mc3细胞生长与增殖作用的影响及其作用机制。方法免疫组织化学方法及流式细胞术细胞内因子检测法检测Mc3细胞Slit2及Robo1蛋白的表达;在Robo1受体胞外区的单克隆抗体R5作用下,以细胞计数法与软琼脂克隆形成实验观察Mc3细胞生长变化及用流式细胞术细胞内因子检测法检测增殖相关蛋白PCNA的表达。结果 Mc3细胞表达Slit2及Robo1蛋白,并且在R5单克隆抗体作用下,Mc3细胞体外生长能力受到抑制,增殖能力明显减弱,PCNA蛋白表达水平下降。结论 Slit-Robo信号可能影响Mc3细胞的生长增殖能力,对肿瘤细胞内的PCNA有正调控作用,提示该信号可能参与粘液表皮样癌的发生及发展过程。

Slit-Robo信号对黏液表皮样癌细胞凋亡作用的影响

目的:探讨Slit-Robo信号对黏液表皮样癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:免疫组织化学方法检测Mc3细胞Slit2及Robol蛋白表达,R5单克隆抗体作用Mc3细胞,采用FITC-AnnexinV/PI法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测细胞周期,DNA梯状电泳及Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡发生,流式细胞仪细胞内抗原检测法检测Caspase-3蛋白含量。结果:Mc3细胞表达Slit2及Robol蛋白,R5抗体作用下细胞凋亡率增高,达到33.6%,形态学观察凋亡细胞明显增多并出现坏死细胞,电泳结果出现梯状条带,S期细胞明显增多,Caspase-3表达水平上调,平均荧光强度达到64%。结论:黏液表皮样癌中Slit-Robo信号可能以抑制细胞凋亡的形式参与肿瘤的形成过程,而这可能是通过Caspase-3蛋白的表达调控实现的。

摇摆下自然循环矩形双通道系统核热耦合不稳定性研究

将海洋条件热工水力分析程序RELAP5/MC与三维物理瞬态输运程序TDOT-T采用并行方式耦合,对摇摆条件下自然循环矩形双通道系统核热耦合不稳定性进行计算分析。结果表明,系统存在同相和异相2种振荡模式,分别由摇摆运动和密度波振荡(DWO)引起。核反馈对第1类DWO和两相区的同相振荡有抑制作用,但对第2类DWO和单相区的同相振荡几乎没有影响。基于非线性理论对计算结果进行分析,发现耦合核反馈后系统非线性增强,由于摇摆导致系统流量波动与DWO叠加,其现象非常复杂,摇摆条件下的核热耦合不稳定性会出现非线性振子耦合中的同步化与混沌现象。

基于单片机的窄带电力线载波通信模块设计

设计了基于通用单片机的电力线载波通信模块。首先给出了载波模块的总体设计,其次进行了详细的软硬件设计,最后进行了模块测试。载波模块采用瑞萨高性能单片机R5F100BE、UTC的解调芯片MC3361BPL及外围电子元器件,设计了过零检测电路、载波耦合电路、载波发送放大电路、载波解调电路,形成了先进的低成本电力线载波模块硬件。软件采用了BFSK调制、直接扩频技术,设计了单芯片三信道通信软件流程,在有限的计算资源下实现了三信道通信互不影响,并给出了发送与接收模块程序设计、DFT解码算法设计,实现了高灵敏度的421±15 kHz频率的电力线载波通信。该设计具有实现成本低、研发投入小等优势,在电力线物联网领域具有一定的实用价值。

金点口蘑子实体提取物(22E,24R)-麦角-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇对小鼠成骨细胞系MC3T3-E1的刺激作用

对39种日本秋田县产蘑菇的提取物诱导小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞的分化活性进行筛选，以期寻找抗骨质疏松的化合物。