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非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:11
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作者 王西西 吴映彤 +3 位作者 吴竞 陈鸿军 郭晓宇 朱鸿飞 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第5期10-15,共6页
本研究旨在采用原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1毒株毒力基因UK,获得重组蛋白(DP96R),进一步制备并鉴定DP96R重组蛋白的多克隆抗体。首先构建原核重组表达质粒pET-28a-UK并转化BL21感受态... 本研究旨在采用原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1毒株毒力基因UK,获得重组蛋白(DP96R),进一步制备并鉴定DP96R重组蛋白的多克隆抗体。首先构建原核重组表达质粒pET-28a-UK并转化BL21感受态细胞,在16℃、0.4 mmol/L IPTG条件下诱导10 h后,检测到目的蛋白以可溶性表达为主,蛋白分子量约为15 kDa。然后采用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗DP96R蛋白多克隆抗体。ELISA结果表明制备的多抗具有良好反应性,Western blot和免疫荧光实验(immunofluorescence assay,IFA)表明制备的多抗能特异性识别真核表达的DP96R蛋白。DP96R重组蛋白及多克隆抗体的制备为进一步研究DP96R蛋白的生物学功能以及建立ASFV毒株鉴别诊断的血清学检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 UK基因 DP96R蛋白 原核表达 多克隆抗体
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Panax notoginseng saponins protect against chronic ethanol-induced hepatic steatosis 被引量:3
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作者 丁仁博 鲍娇琳 +3 位作者 曹怡纬 何承伟 王一涛 万建波 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2014年第6期361-368,共8页
Chronic alcohol consumption induces hepatic steatosis, the early stage of alcoholic liver disease (ALD). The aim ofpresent study is to investigate the protective effect ofPanax notoginseng saponins (PNS) against c... Chronic alcohol consumption induces hepatic steatosis, the early stage of alcoholic liver disease (ALD). The aim ofpresent study is to investigate the protective effect ofPanax notoginseng saponins (PNS) against chronic ethanol-induced hepaticsteatosis in vivo. Mice were pair-fed a modified Lieber-DeCarli liquid diet containing alcohol or isocaloric maltose dextrin ascontrol diet with or without PNS (200 mg/kg, BW) for 8 weeks. Animals supplemented with PNS were protected against hepaticlipid accumulation induced by chronic ethanol exposure. Accordingly, PNS could significantly decrease the elevation of plasmatriglyceride, plasma enzyme activities, i.e. alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST), and hepaticTNF-ct and IL-6 levels which were induced by chronic alcohol exposure. In addition, PNS markedly reduced the lipolysis ofwhite adipose tissue (WAT) that stimulated by alcohol feeding through the inhibiting protein expression of phosphorylation ofhormone-sensitive lipase (p-HSL), rather than total HSL. Furthermore, alcohol exposure also enhanced fatty acid uptake capacityin liver by elevated hepatic CD36 expression, which could attenuated by PNS treatment. These results demonstrate that PNSsupplementation protects against chronic ethanol-induced hepatic steatosis, which is associated with ameliorating dysfunctionallipid metabolism of WAT and the reduced inflammatory cytokines. Our findings suggested that PNS might be potential to bedeveloped as an effective agent for the treatment of chronic alcoholic steatosis. 展开更多
关键词 Alcoholic fatty liver Panax notoginseng saponins LIPOLYSIS InflammationCLC number: r96 Document code: A Article ID: 1003-1057(2014)6-361-08
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黄芩苷磷脂复合物在Caco-2细胞模型中的吸收机制 被引量:5
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作者 李楠 杜青青 蒋学华 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期58-59,共2页
目的考察黄芩苷、黄芩苷磷脂物理混合物、黄芩苷磷脂复合物在Caco-2细胞单层模型的吸收机制。方法采用Caco-2细胞单层模型研究3种载药体系中黄芩苷由绒毛面(AP侧)到基底面(BL侧)的转运过程,采用HPLC法测定药物在BL侧的累积量,计算表观... 目的考察黄芩苷、黄芩苷磷脂物理混合物、黄芩苷磷脂复合物在Caco-2细胞单层模型的吸收机制。方法采用Caco-2细胞单层模型研究3种载药体系中黄芩苷由绒毛面(AP侧)到基底面(BL侧)的转运过程,采用HPLC法测定药物在BL侧的累积量,计算表观渗透系数(Papp)。结果 3种体系中的黄芩苷皆以被动扩散为主要跨细胞转运方式,黄芩苷磷脂复合物中的黄芩苷Papp高于其他两组。结论磷脂复合物可以促进黄芩苷的跨膜转运。 展开更多
关键词 黄芩苷磷脂复合物 CACO-2细胞模型 跨膜转运 渗透系数
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蒽环类抗生素糖基化的研究进展
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作者 刘芷瑜 《生物技术世界》 2014年第9期131-133,135,共4页
蒽环类抗生素普遍具有良好的抗肿瘤活性,但同时这些药物常伴有心脏毒性和多重抗药性等副作用,通过对这类化合物的糖基化改造来获得生物活性更好、抗药性更低的新型药物成为一种重要的研究途径。糖基转移酶是催化糖基化反应的主要工具,... 蒽环类抗生素普遍具有良好的抗肿瘤活性,但同时这些药物常伴有心脏毒性和多重抗药性等副作用,通过对这类化合物的糖基化改造来获得生物活性更好、抗药性更低的新型药物成为一种重要的研究途径。糖基转移酶是催化糖基化反应的主要工具,对蒽环类抗生素糖基转移酶结构、功能的研究为开发新型抗肿瘤药物的热点。本文主要对糖基转移酶及其编码基因在蒽环类抗生素生物合成的应用情况进行了阐述,并且对蒽环类抗生素糖基化的应用前景进行展望。 展开更多
关键词 蒽环类抗生素 糖基转移酶 糖基化 r96
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非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的表达与单克隆抗体的制备 被引量:5
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作者 赵少若 王孟月 +5 位作者 白晶晶 郝丽影 梁严予 关洋 邓均华 田克恭 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第2期77-81,共5页
为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)DP96R蛋白单克隆抗体,根据大肠杆菌密码子优化后的DP96R基因序列设计引物,PCR扩增后连接表达载体pET28a-SUMO构建pET-SUMO-DP96R原核表达质粒,将该质粒转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导,获得可溶性的DP96R蛋白... 为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)DP96R蛋白单克隆抗体,根据大肠杆菌密码子优化后的DP96R基因序列设计引物,PCR扩增后连接表达载体pET28a-SUMO构建pET-SUMO-DP96R原核表达质粒,将该质粒转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导,获得可溶性的DP96R蛋白。通过Western blot鉴定该蛋白可与ASFV阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性。将纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,共制备了14株针对DP96R蛋白的单克隆抗体。单克隆抗体重链亚类分别为IgG1、IgG2a,轻链亚类均为κ。采用DP96R蛋白为抗原的间接ELISA方法检测抗体的效价均不低于1∶2 560 000, 14株单克隆抗体均能够特异性识别DP96R蛋白。本试验为进一步研究DP96R蛋白生物学功能及ASFV基因缺失疫苗开发提供了重要的生物材料。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 原核表达 DP96R蛋白 单克隆抗体
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