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腺病毒介导RA538基因转移及其诱导肿瘤细胞凋亡的研究 被引量:1
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作者 邢嵘 林晨 +3 位作者 牟巨伟 程金科 付明 吴旻 《大连医科大学学报》 CAS 2000年第1期1-3,6,共4页
RA538是从维甲酸诱导终末分化的人食管癌细胞系中分离出的一个与分化相关的基因。通过重组体腺病毒将RA538基因成功地转导到人肺腺癌细胞系 (GLC - 82 )中 ,经X -gal染色证实转导效率达 10 0 % (MOI为 2 5) ,转导RA538基因后的GLC - 82... RA538是从维甲酸诱导终末分化的人食管癌细胞系中分离出的一个与分化相关的基因。通过重组体腺病毒将RA538基因成功地转导到人肺腺癌细胞系 (GLC - 82 )中 ,经X -gal染色证实转导效率达 10 0 % (MOI为 2 5) ,转导RA538基因后的GLC - 82肿瘤细胞生长受到明显的抑制 ,抑制率为 77 2 %。经流式细胞计数 (FCM)及TUNEL检测证实RA538可诱导肿瘤细胞发生凋亡 ,凋亡率为 59 4%。利用Westernblot法检测转导了RA538基因GLC - 82肿瘤细胞中癌基因蛋白发现 ,c -myc基因蛋白表达下调。结果提示 :RA538作为抑癌基因将有可能应用于肿瘤基因治疗。 展开更多
关键词 ra538基因 腺病毒载体 肿瘤 基因治疗 凋亡
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腺病毒介导RA538基因转移及其对肿瘤的抑制作用
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作者 邢嵘 林晨 +4 位作者 牟巨伟 程金科 张雪艳 付明 吴旻 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第4期246-249,共4页
目的:RA538是从维甲酸诱导终末分化的人食管癌细胞系中分离出的一个与分化相关的基因,本研究探讨了其抗癌作用.方法:利用腺病毒介导基因转移观察对肿瘤细胞的抑制效应.结果:通过重组体腺病毒将RA538基因转导到人肺腺癌细胞系(GLC-82)和... 目的:RA538是从维甲酸诱导终末分化的人食管癌细胞系中分离出的一个与分化相关的基因,本研究探讨了其抗癌作用.方法:利用腺病毒介导基因转移观察对肿瘤细胞的抑制效应.结果:通过重组体腺病毒将RA538基因转导到人肺腺癌细胞系(GLC-82)和人结肠癌细胞系(HCY)中,获得较高的转导效率,显示出较明显的抑制肿瘤生长作用,抑制率分别为77.2%和77.9%,并能降低两细胞系体内肿瘤形成能力.流式细胞计数、DNA片段化分析及TUNEL检测证实RA538可诱导肿瘤细胞发生凋亡.Westem blot分析表明,RA538具有明显下调c-myc基因表达的作用,结论:研究结果提示,RA538是一个较广谱的抑癌基因,可以作为肿瘤基因治疗的一个新目的基因,具有良好的应用前景. 展开更多
关键词 ra538 腺病毒载体 肿瘤 基因治疗 细胞凋亡
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重组RA538腺病毒对人胃癌细胞的体内及体外分子治疗研究
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作者 陈洁平 徐采朴 +5 位作者 林晨 张雪艳 付明 邓友平 程金科 吴旻 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期309-313,共5页
目的:研究重组RA538腺病毒对胃癌细胞的体内外生物学作用。方法:采用LacZ基因X-gal染色、MTT、克隆形成试验、DNA梯度降解试验、原位末端标记、流式细胞仪、裸鼠致瘤性、裸鼠皮下移植瘤模型实验等方法,对RA5... 目的:研究重组RA538腺病毒对胃癌细胞的体内外生物学作用。方法:采用LacZ基因X-gal染色、MTT、克隆形成试验、DNA梯度降解试验、原位末端标记、流式细胞仪、裸鼠致瘤性、裸鼠皮下移植瘤模型实验等方法,对RA538重组腺病毒在人胃癌SGC7901细胞系中的作用进行体内外研究。结果:Ad-RA538对SGC7901细胞产生明显的生长抑制作用,MTT显示生长抑制率为76.3%。DNA梯度降解试验、原位末端标记、流式细胞仪显示Ad-RA538诱导了SGC7901细胞凋亡。经Ad-RA538处理的SGC7901细胞裸鼠致瘤性消失。Ad-ASc-myc对裸鼠皮下移植瘤模型瘤内注射能有效降低肿瘤的生长速度,生长抑制率为60.66%。结论:Ad-RA538对胃癌细胞具有显著的体内外生长抑制及凋亡诱导作用。 展开更多
关键词 腺病毒 基因治疗 维甲酸 胃肿瘤 ra538
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重组RA538、反义c-myc腺病毒对不同细胞系转染效率与作用及其机制的研究
4
作者 陈洁平 林晨 +5 位作者 徐采朴 张雪艳 付明 隗玥 邓友平 吴旻 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第1期63-64,共2页
关键词 食管癌 肾癌 腺病毒载体 ra538 反义C-MYC
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腺病毒介导的RA538基因转移及其对人结肠癌细胞HCT的抑瘤作用
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作者 邢嵘 林晨 +4 位作者 程金科 牟巨伟 张雪艳 付明 吴日 《实用癌症杂志》 2000年第1期1-3,共3页
目的 进一步研究RA538 对人结肠癌细胞系的生物学效应,选用介导RA538 重组体腺病毒,观察其对人结肠癌细胞系HCT 的作用。方法 通过重组体腺病毒将RA538 基因转导到人结肠癌细胞系HCT 中,观察转染RA538 ... 目的 进一步研究RA538 对人结肠癌细胞系的生物学效应,选用介导RA538 重组体腺病毒,观察其对人结肠癌细胞系HCT 的作用。方法 通过重组体腺病毒将RA538 基因转导到人结肠癌细胞系HCT 中,观察转染RA538 基因后的肿瘤细胞生长情况。经流式细胞仪、DNA 片段化分析及TUNEL 检测分析抑瘤机制。结果 由重组体腺病毒AdRA538 介导基因RA538 转导在HCT 获得较高的转导效率, MOI 为100 时可使80 % 细胞转染,并显示对肿瘤细胞生长有明显的抑制作用,抑制率为74 % 。裸鼠皮下注射RA538 处理的HCT 细胞肿瘤形成能力为20 % 。DNA 片段化分析、TUNEL 和流式细胞仪检测,结果证明RA538诱导肿瘤细胞发生凋亡。Western blot 分析表明,RA538 具有明显下调cm yc 基因表达的作用。结论 RA538 对人结肠肿瘤细胞有抑制生长和诱导凋亡的作用,可以作为结肠肿瘤基因治疗的1 种新的治疗基因。 展开更多
关键词 ra538基因 腺病毒载体 细胞凋亡 结肠癌
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Effects and Safety of High-efficiency Gene and Highlevel Expression of RA538 in Human Gastric Carcinoma Cells by Recombinant
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作者 ChenJie-ping LinChen +1 位作者 XuCai-pu WuMing 《胃肠病学》 2000年第B08期191-192,共2页
关键词 高效基因 基因表达 ra538 胃癌 癌细胞 重组器官 消化系统
全文增补中
重组RA538、反义c-myc腺病毒对bcl-2高表达细胞系的作用及分子机制 被引量:4
7
作者 陈洁平 林晨 +4 位作者 邓友平 张雪艳 付明 徐采朴 吴旻 《中华肿瘤杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期279-282,共4页
目的 研究重组RA5 38(Ad RA5 38)、反义c myc腺病毒 (Ad ASc myc)在bcl 2高表达细胞系中的作用及其分子机制。方法 采用细胞形态学观察、MTT、RT PCR和Northernblot等方法 ,研究RA5 38、反义c myc重组腺病毒在bcl 2高表达的人宫颈癌... 目的 研究重组RA5 38(Ad RA5 38)、反义c myc腺病毒 (Ad ASc myc)在bcl 2高表达细胞系中的作用及其分子机制。方法 采用细胞形态学观察、MTT、RT PCR和Northernblot等方法 ,研究RA5 38、反义c myc重组腺病毒在bcl 2高表达的人宫颈癌细胞系HeLa bcl2和SiHa bcl2以及在其亲本细胞中的生物学作用及其分子机制。结果 以Lipofectin转染bcl 2真核表达质粒建立的bcl 2基因高表达细胞系HeLa bcl2和SiHa bcl2 ,均能高效、稳定地表达bcl 2。Ad RA5 38和Ad ASc myc对HeLa和SiHa均有明显的生长抑制及凋亡诱导作用 ,并可以抑制HeLa细胞bcl 2和c myc基因的表达。但Ad RA5 38、Ad ASc myc对高表达bcl 2的HeLa bcl2和SiHa bcl2细胞bcl 2和c myc基因表达虽有一定抑制作用 ,但对其生长抑制及诱导凋亡的作用轻微 ,未能抵消高表达的bcl 2抑制细胞凋亡的作用。结论Ad RA5 38、Ad ASc myc可能是通过抑制bcl 2及c 展开更多
关键词 腺病毒 重组ra538 反义C-MYC 基因治疗 肿瘤
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携带RA538的重组体腺病毒体外及体内安全性研究 被引量:1
8
作者 张海增 林晨 隗玥 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期927-930,共4页
研究携带RA5 3 8的重组腺病毒Ad RA5 3 8潜在的副作用 ,评价其安全性 ,为其进一步进入临床试验提供依据。方法 体外病毒扩增实验 :预先用Ad RA5 3 8感染HeLa细胞 ,制备细胞提取液后反复两次感染HeLa细胞 ,观察Ad RA5 3 8的繁殖、扩增... 研究携带RA5 3 8的重组腺病毒Ad RA5 3 8潜在的副作用 ,评价其安全性 ,为其进一步进入临床试验提供依据。方法 体外病毒扩增实验 :预先用Ad RA5 3 8感染HeLa细胞 ,制备细胞提取液后反复两次感染HeLa细胞 ,观察Ad RA5 3 8的繁殖、扩增以及对HeLa细胞的作用 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测其DNA的转录 ;确定Ad RA5 3 8对作为正常细胞的人胚肺二倍体细胞 2BS的感染能力 ,绘制细胞生长曲线 ,观察Ad RA5 3 8对正常细胞的毒性 ;给BalB/C小鼠腹腔注射重组腺病毒后 ,每日观察一般状况 ,化验肝、肾功能 ,PCR检测重组腺病毒在重要脏器中的分布 ,显微镜观察重要脏器的病理学变化。结果 Ad RA5 3 8是一复制缺陷型腺病毒 ,能高效感染 2BS细胞 ,但并不影响其生长 ,小鼠体内应用后 ,并无急性毒性症状发生 ,肝、肾功能没有变化 ,在肝、肾、胃、脾内可检测到腺病毒的分布 ,但仅在注射 10 9pfu第 6天、第 12天的小鼠肝组织内可观察到轻微炎症。结论 Ad RA5 3 8应用是安全的 ,可以进入临床试验。 展开更多
关键词 重组腺病毒载体 安全性 ra538 基因治疗
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腺病毒介导RA538基因转移及其肿瘤抑制作用
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作者 程金科 林晨 +5 位作者 张雪艳 邢嵘 牟巨伟 隗玥 王秀琴 吴旻 《中国科学(C辑)》 CSCD 1999年第2期194-200,共7页
采用同源重组方法构建RA5 3 8cDNA重组体腺病毒 ,通过转导人卵巢癌细胞系SK OV 3和人黑色素瘤细胞系WM 983A ,证实腺病毒可高效转导RA5 3 8基因 ,能显著抑制肿瘤细胞的生长 ,其抑制率分别达 85 %和 73 % ;并显著降低两细胞系的集落形成... 采用同源重组方法构建RA5 3 8cDNA重组体腺病毒 ,通过转导人卵巢癌细胞系SK OV 3和人黑色素瘤细胞系WM 983A ,证实腺病毒可高效转导RA5 3 8基因 ,能显著抑制肿瘤细胞的生长 ,其抑制率分别达 85 %和 73 % ;并显著降低两细胞系的集落形成能力 .对两细胞系的裸鼠皮下移植瘤进行治疗实验结果表明 ,RA5 3 8能明显抑制肿瘤的生长 .流式细胞计数和DNA片段化分析证实 ,RA5 3 8可引起肿瘤细胞G1期阻滞和 /或凋亡 .对c myc蛋白的Westernblot分析发现 ,RA5 3 8有明显下调c myc基因表达的作用 .根据这些结果 ,我们认为RA5 3 8重组体腺病毒有可能成为有应用价值的肿瘤基因治疗药物 . 展开更多
关键词 肿瘤 基因转移 腺病毒载体 ra538 基因治疗
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Adenovirus-mediated transfer of RA538 gene and its antitumor effect
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作者 程金科 林晨 +5 位作者 隗玥 张雪艳 邢嵘 牟巨伟 王秀琴 吴旻 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1999年第2期202-208,共7页
The RA538 cDNA was transferred into human ovarian cancer cell line SK-OV-3 and human melanoma cell line WM-983A by its recombinant adenoviral vector constructed through homologous recombination. It was demonstrated th... The RA538 cDNA was transferred into human ovarian cancer cell line SK-OV-3 and human melanoma cell line WM-983A by its recombinant adenoviral vector constructed through homologous recombination. It was demonstrated that the recombinant adenovirus could transfer RA538 gene with high efficiency, and could obviously inhibit tumor growth, with the inhibiting rates of 85% and 73% respectively, at the same time greatly repress the colony forming ability of the cells. The therapeutic experiments on transplanted subcutaneous tumor model in nude mice demonstrated that RA538 could significantly inhibit tumor growth. Flow cytometry and DNA fragmentation analysis indicated that RA538 could induce the cell cycle Gl arrest/apoptosis of the tumor cells. The expression of c-myc gene was found pronouncedly reduced by Western blot analysis. These results suggest that the RA538 recombinant adenovirus could be a promising drug in cancer gene therapy. 展开更多
关键词 ADENOVIRAL vector ra538 HUMAN ovarian cancer CELL HUMAN melanoma CELL GENE therapy.
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腺病毒介导的分化基因RA-538诱导肝癌细胞增殖抑制和凋亡的研究
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作者 张海增 林晨 +5 位作者 邵永孚 隗月 付明 张雪艳 梁肖 吴旻 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期453-455,共3页
目的 研究携带分化基因RA 53 8的重组腺病毒 (Ad RA53 8)对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法 Ad RA53 8感染人肝癌细胞系BEL 740 2和QSG 770 1 ,绘制生长曲线 ,克隆形成实验评价Ad RA53 8对肝癌细胞增殖的抑制作用 ,应用流式细胞术、... 目的 研究携带分化基因RA 53 8的重组腺病毒 (Ad RA53 8)对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法 Ad RA53 8感染人肝癌细胞系BEL 740 2和QSG 770 1 ,绘制生长曲线 ,克隆形成实验评价Ad RA53 8对肝癌细胞增殖的抑制作用 ,应用流式细胞术、DNA原位末端标记、梯形DNA研究细胞周期及细胞凋亡情况 ,逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)和免疫印迹法 (Westernblot)检测相关基因的表达。结果 感染Ad RA53 8后 ,RA53 8在肝癌细胞内获得了表达 ,并且降低了c myc的表达。肿瘤细胞的增殖受到明显抑制 ,感染Ad RA53 85d后 ,BEL 740 2的活细胞数为(1 0 .0± 3 .7)× 1 0 4,对照组为 (1 72 .7± 1 1 .9)× 1 0 4(P <0 .0 0 1 ) ;QSG 770 1感染Ad RA53 83d后的活细胞数为 (2 3 .0± 4.3 )× 1 0 4,对照组为 (91 .7± 7.2 )× 1 0 4(P <0 .0 0 1 ) ;感染Ad RA53 8后BEL 740 2和QSG 770 1形成的克隆数分别为 1 3± 4和 1 5± 2 ,明显少于对照组的 1 88± 9和 1 75± 9(P <0 .0 0 1 ) ,而且还出现了细胞周期的阻滞和凋亡。结论 Ad RA53 8对肝癌细胞具有明显的抑制作用 。 展开更多
关键词 重组腺病毒载体 基因治疗 ra538基因 肝癌细胞
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杂志信息
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《中华医学信息导报》 1999年第24期12-14,共3页
据《中华医学杂志》1999年12月79卷第12期报道 中国医学科学院肿瘤研究所张海增、林晨等教授,为研究携带RA538的重组体腺病毒Ad-RA538潜在的副作用,评价其安全性,为其进一步进入临床试验提供依据。
关键词 FAS基因 心肌细胞凋亡 抗一HEV 善得定 ra538 缺血预处理 心肌再灌注 多药耐药 急性白血病 重组腺病毒
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