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在抑郁症大鼠模型中MiRNA-103-3p调控Rab10促进神经细胞自噬
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作者 张叶明 张袁祥 +2 位作者 沈学彬 王国栋 朱磊 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1315-1326,共12页
目的探讨与神经保护相关的基因Rab10在抑郁症体内外模型中发挥的功能和作用机制。方法选取36只大鼠作为慢性应激模型组(CUMS组),每只大鼠单笼饲养,进行6周慢性不可预测温和应激,另选取12只作为对照组。CUMS组大鼠完成6周CUMS刺激后,根... 目的探讨与神经保护相关的基因Rab10在抑郁症体内外模型中发挥的功能和作用机制。方法选取36只大鼠作为慢性应激模型组(CUMS组),每只大鼠单笼饲养,进行6周慢性不可预测温和应激,另选取12只作为对照组。CUMS组大鼠完成6周CUMS刺激后,根据旷场实验数据和体质量分成3组(12只/组):CUMS+生理盐水组、CUMS+AAV载体组和CUMS+AAV过表达Rab10组,CUMS+saline组大鼠侧脑室注射生理盐水;CUMS+AAV组大鼠侧脑室注射AAV空病毒载体;CUMS+AAV-oe-Rab10组大鼠侧脑室注射AAV过表达Rab10载体实现Rab10基因过表达,CUMS刺激在整个实验期间持续进行。对照组大鼠始终不进行任何刺激。利用大鼠行为学指标的变化评价大鼠抑郁状态。构建CORT诱导的PC12细胞模型,CCK-8法检测细胞活力。通过TargetScan数据库预测与Rab10相互作用的miRNA及miRNA结合位点,并结合双荧光素酶和RIP实验探究miRNA-103-3p与Rab10的相互作用。在CORT刺激的PC12细胞中过表达Rab10,或在转染miRNA-103-3p inhibitor基础上沉默Rab10,qRT-PCR法检测miRNA-103-3p和Rab10的表达水平;Western blotting检测细胞中Rab10、BDNF、CREB、p62、Beclin-1、Wnt3a、Gsk3β、磷酸化(p)-Gsk3β和β-catenin的蛋白含量。结果病毒过表达Rab10后明显改善CUMS大鼠行为学指标(P<0.05)。qRT-PCR和Western blotting证实Rab10基因在CUMS大鼠海马与CORT诱导的PC12细胞中表达下调(P<0.05)。生物信息学结合双荧光素酶和RIP实验证实miRNA-103-3p靶向Rab10(P<0.05)。过表达Rab10或沉默miRNA-103-3p激活了Wnt/β-catenin信号通路,上调BDNF、CREB和Beclin-1的含量,下调p62蛋白的表达(P<0.05);下调miRNA-103-3p的基础上沉默Rab10逆转了miRNA-103-3p的作用(P<0.05)。结论miRNA103-3p靶向Rab10激活Wnt/β-catenin信号通路,改善神经细胞的可塑性,促进细胞自噬,从而对抗CORT诱导的PC12细胞损伤。 展开更多
关键词 rab10 miRNA-103-3p 神经可塑性 自噬 抑郁症
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RAB10对胰腺癌细胞生物学功能的影响及临床意义
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作者 匡鹏 张钦泉 +7 位作者 程盛 董毅 王理承 张思璐 叶家欣 马丹丹 李中虎 张智勇 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期2038-2044,共7页
目的研究RAS癌基因家族成员RAB10在胰腺癌中的表达情况及其对人胰腺癌细胞系SW1990细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法利用癌症基因数据库GEPIA和TCGA中胰腺癌的数据分析RAB10 mRNA在胰腺癌组织中的表达;Cox回归分析RAB10 mRNA... 目的研究RAS癌基因家族成员RAB10在胰腺癌中的表达情况及其对人胰腺癌细胞系SW1990细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法利用癌症基因数据库GEPIA和TCGA中胰腺癌的数据分析RAB10 mRNA在胰腺癌组织中的表达;Cox回归分析RAB10 mRNA表达水平与胰腺癌患者预后关系;靶向RAB10的小干扰RNA(RAB10-siRNA)作为沉默组、构建过表达RAB10质粒(RAB10-OE)作为过表达组;使用Q-PCR检测沉默及过表达效果;Western blot实验检测蛋白表达水平;EdU细胞增殖实验、划痕实验、Transwell实验、流式细胞实验分别分析RAB10对SW1990增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果胰腺癌组织中RAB10 mRNA的表达量明显高于正常胰腺组织(P<0.05);EdU细胞增殖实验结果显示,RAB10-OE组的SW1990细胞的增殖率明显高于对照组,RAB10-siRNA组SW1990细胞的增殖率低于对照组(P<0.05);Transwell实验和划痕实验结果显示,RAB10-OE组细胞侵袭率及迁移率均高于对照组,RAB10-siRNA组细胞迁移率及侵袭率均低于对照组(P<0.05);流式细胞实验结果显示,RAB10-OE组细胞凋亡率低于对照组,RAB10-siRNA组细胞凋亡率高于对照组(P<0.05);RAB10高表达组生存时间低于RAB10低表达组(P<0.05);单因素Cox回归分析结果显示,临床分级、T分期、M分期及RAB10 mRNA表达水平与胰腺癌患者预后相关(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,RAB10 mRNA的表达水平为影响胰腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论RAB10在胰腺癌组织中高表达,是胰腺癌患者预后的独立危险因素且能够促进胰腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并抑制胰腺癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 胰腺癌 rab10 增殖 凋亡 迁移 侵袭 预后
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人肝细胞癌中PCNA和RAB10水平上调miR-224表达下调 被引量:3
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作者 单长民 刘同慎 +2 位作者 李娟 荣先国 杨军厚 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2020年第1期41-45,共5页
目的为了进一步揭示肝癌发生的分子机理,探讨肝癌中细胞增殖与miR-224、RAB10表达之间的关系。方法选取确诊的肝细胞癌患者8例,手术后分别获得其肝细胞癌和癌旁组织,免疫组织化学检测代表细胞增殖的PCNA和癌基因产物RAB10的表达,实时定... 目的为了进一步揭示肝癌发生的分子机理,探讨肝癌中细胞增殖与miR-224、RAB10表达之间的关系。方法选取确诊的肝细胞癌患者8例,手术后分别获得其肝细胞癌和癌旁组织,免疫组织化学检测代表细胞增殖的PCNA和癌基因产物RAB10的表达,实时定量PCR检测miR-224的表达。结果在肝细胞癌中,细胞增殖水平非常显著地高于癌旁组织;miR-224表达显著地低于癌旁组织,但RAB10水平显著高于癌旁组织。结论肝细胞癌发生可能在于肝细胞中下调的miR-224对其靶基因rab10沉默作用降低,使其高水平表达RAB10;高水平RAB10作为细胞癌基因产物促进细胞的增殖、发生肝癌。 展开更多
关键词 肝细胞癌 细胞增殖 PCNA miR-224 rab10
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RAB10在人肝癌组织中的表达及对患者预后的影响 被引量:1
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作者 杨大业 唐世磊 李宏武 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2021年第4期331-334,共4页
目的:研究RAB10在人肝癌组织中的表达及其与患者临床预后的关系。方法:Western Blot检测肝癌组织与正常肝组织中RAB10的表达情况,利用TCGA数据库分析RAB10的表达与肝癌患者临床病理特征的关系以及对预后的影响,进一步分析与RAB10高表达... 目的:研究RAB10在人肝癌组织中的表达及其与患者临床预后的关系。方法:Western Blot检测肝癌组织与正常肝组织中RAB10的表达情况,利用TCGA数据库分析RAB10的表达与肝癌患者临床病理特征的关系以及对预后的影响,进一步分析与RAB10高表达可能相关的ATG蛋白。结果:与正常肝脏组织相比,RAB10在肝癌组织中的表达显著升高;RAB10的表达情况与肿瘤TNM分期显著相关,表达越高,分期越差(P<0.01);Kaplan-Meier分析显示在肝癌组织中RAB10高表达的患者无病生存期(DFS)、总生存期(OS)均显著低于低表达的患者(P<0.001)。在肝癌组织中,RAB10与多种ATG的表达呈明显的正相关性。结论:RAB10在肝癌组织中的表达明显上调可能预示肝癌患者预后差。RAB10可作为肝癌预后检测的分子标志物及治疗的潜在靶点。RAB10的高表达与肝癌患者不良预后的关系可能通过与ATG家族成员发生相互作用有关。 展开更多
关键词 肝癌 rab10 预后
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大鼠弥漫性轴索损伤后大脑皮层rab10的表达及意义
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作者 赵永林 宋锦宁 +4 位作者 马旭东 张斌飞 张明 李丹东 庞宏刚 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期11-15,22,共6页
目的研究大鼠弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后小G蛋白rab10在大脑皮层的表达变化规律,探讨DAI后rab10在神经修复中的作用及意义。方法采用头颅瞬间旋转损伤装置建立大鼠DAI模型,随机分为1d、3d、7d组及对照组。采用Gles... 目的研究大鼠弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后小G蛋白rab10在大脑皮层的表达变化规律,探讨DAI后rab10在神经修复中的作用及意义。方法采用头颅瞬间旋转损伤装置建立大鼠DAI模型,随机分为1d、3d、7d组及对照组。采用Gless嗜银染色和TUNEL染色分别观察DAI后神经轴索形态和凋亡变化;采用Western blot、免疫组化等方法检测大鼠大脑皮层rab10的分布及表达,并采用免疫荧光双标染色分析大脑皮层神经元内rab10的表达变化。结果嗜银染色显示DAI后1d神经轴索形态损伤最严重,3~7d时损伤逐渐减轻;TUNEL染色显示DAI后1d凋亡细胞数开始升高,3~7d时凋亡数量更高,呈迟发性改变。Western blot及免疫组化结果均提示DAI后1d大脑皮层rab10的表达显著增加,3d后稍降低,7d后明显降低,但仍高于正常(P〈0.05);免疫荧光双标染色提示正常神经元内几乎不表达rab10,DAI后神经元内rab10表达在1~3d较高,7d时较前降低。结论大鼠DAI后大脑皮层rab10表达水平先增加,随后降低;神经元内rab10的表达变化可能与DAI后神经轴索修复有关。 展开更多
关键词 弥漫性轴索损伤 rab10 神经元 皮层 大鼠 颅脑损伤 细胞凋亡
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RAB10与肿瘤发生发展的研究进展
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作者 章坤(综述) 王小林(审校) 《癌症进展》 2022年第9期880-883,共4页
RAB10属于RAS超家族的小GTP酶,是一种GTP结合蛋白,其通过不断结合与水解ATP的循环过程,调节细胞内囊泡的运输,有利于不同细胞器之间的蛋白质转运。RAB10在肝癌、胶质瘤、宫颈癌、骨肉瘤等多种恶性肿瘤中均有不同程度的高表达,参与肿瘤... RAB10属于RAS超家族的小GTP酶,是一种GTP结合蛋白,其通过不断结合与水解ATP的循环过程,调节细胞内囊泡的运输,有利于不同细胞器之间的蛋白质转运。RAB10在肝癌、胶质瘤、宫颈癌、骨肉瘤等多种恶性肿瘤中均有不同程度的高表达,参与肿瘤的发生、发展,并且与肿瘤预后相关。RAB10还可以促进自噬及自噬相关基因5的定位。因此,综合其在肿瘤发生发展和细胞自噬中的特殊作用,RAB10可能是一个重要的肿瘤治疗靶点,因而日益被重视。本文综述了RAB10的生物学作用、在肿瘤细胞中的作用及机制等方面的研究进展。 展开更多
关键词 rab10 肿瘤 自噬
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miR-409-3p和Rab10在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达和临床意义
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作者 蔡青照 艾丽梅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第6期914-919,共6页
目的 探讨miR-409-3p和Rab10对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的影响。方法 qRT-PCR检测转染miR-409-3p模拟物(miR-409-3p mimic)、无关序列模拟物(mimic NC)、miR-409-3p抑制物(miR-409-3p inhibitor)、无关序列抑制物(inhibitor NC)和空白... 目的 探讨miR-409-3p和Rab10对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的影响。方法 qRT-PCR检测转染miR-409-3p模拟物(miR-409-3p mimic)、无关序列模拟物(mimic NC)、miR-409-3p抑制物(miR-409-3p inhibitor)、无关序列抑制物(inhibitor NC)和空白对照组(control组)后miR-409-3p的表达水平,使用Targetscan 7.2和miRNA靶基因预测数据库(miRDB)预测miR-409-3p的下游靶基因,Western blot检测Rab GTP酶10(Rab10)的表达,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)和流式细胞仪用来检测细胞增殖和凋亡,然后使用免疫组化(IHC)检测石蜡包埋组织中Rab10的表达水平并进一步分析Rab10与DLBCL患者临床特征的关系。结果 miR-409-3p可以促进细胞凋亡,抑制细胞增殖;过表达miR-409-3p后Rab10的表达增加;Rab10在DLBCL组织中的表达水平高于淋巴结反应性增生(RHL)组织,高水平乳酸脱氢酶(LDH)、高水平β2微球蛋白(β2-MG)和淋巴瘤国际预后评分(IPI)高的患者Rab10的表达相对较高。结论 miR-409-3p可以促进细胞凋亡及Rab10的表达,Rab10与患者的不良预后有关。 展开更多
关键词 DLBCL miR-409-3p rab10 增殖 凋亡 不良预后
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Rab10通过介导肝癌细胞上皮间质转化促进肝癌转移
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作者 高明萱 雍遇乐 +1 位作者 刘泽昆 陆蒙 《转化医学杂志》 2021年第3期129-134,共6页
目的探讨Rab10在肝细胞肝癌转移中的作用,为晚期肝癌的治疗提供新靶点。方法利用美国癌症基因组图谱(Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达汇编(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库分析Rab10在肝癌组织和癌旁组织的表达及表达与肝癌患... 目的探讨Rab10在肝细胞肝癌转移中的作用,为晚期肝癌的治疗提供新靶点。方法利用美国癌症基因组图谱(Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达汇编(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库分析Rab10在肝癌组织和癌旁组织的表达及表达与肝癌患者的生存关系。Western Blot检测HCC-LM3细胞在正常培养条件和转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)刺激下,干涉Rab10后上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Snail的表达水平。采用Transwell迁移和侵袭实验检测Rab10对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响。结果Rab10在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.0001)。高表达Rab10肝癌患者的生存率低于Rab10低表达的患者(P<0.0001)。干涉Rab10,E-cadherin表达上调,N-cadherin和Snail表达下调,并显著降低HCC-LM3细胞的迁移(P=0.0009)和侵袭(P=0.0139)能力。另外,Rab10下调可抑制由TGF-β1促进的肝癌细胞迁移(P<0.0001)、侵袭(P<0.0001)和肝癌细胞的上皮间质转化。结论Rab10在肝癌组织中表达升高,其高表达能通过调控肝癌细胞上皮间质转化进而促进肝癌细胞转移,Rab10可作为预测肝癌发生转移进展的潜在分子标志物。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 rab10 上皮间质转化 肝癌转移
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Rab10对禽偏肺病毒C型复制影响的研究
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作者 亓宇翔 于瀚哲 +3 位作者 张正洲 王如嘉 孟闯 冯旭飞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期292-299,共8页
为探究Rab10对禽偏肺病毒C型(aMPV/C)在A549细胞中复制的影响,将pCMV-GFP-Rab10转染A549细胞后接种aMPV/C,并进行激光共聚焦显微镜观察,结果显示,Rab10和aMPV/C在细胞质中存在多个共定位荧光点,而未接毒对照中未观察到aMPV/C信号和共定... 为探究Rab10对禽偏肺病毒C型(aMPV/C)在A549细胞中复制的影响,将pCMV-GFP-Rab10转染A549细胞后接种aMPV/C,并进行激光共聚焦显微镜观察,结果显示,Rab10和aMPV/C在细胞质中存在多个共定位荧光点,而未接毒对照中未观察到aMPV/C信号和共定位荧光点。用Image J软件进行共定位系数分析,结果显示,Rab10与aMPV/C的共定位系数极显著高于未接毒组(P<0.05);将pCMV-Flag-Rab10、p CMV-Flag、siRab10以及siNC分别转染A549细胞后接种aMPV/C,48 h后收集上清和细胞样品,分别采用荧光定量PCR(q PCR)、Western-blot和TCID50检测aMPV/C N基因转录水平、aMPV/C N和Rab10蛋白的表达水平以及病毒效价。结果显示,过表达Rab10后aMPV/C N基因转录水平、Rab10和N蛋白表达水平以及病毒效价均极显著升高(P<0.05);相反,干扰Rab10表达后N基因的转录水平、Rab10和N蛋白的表达水平以及病毒效价均极显著降低(P<0.05)。这些结果表明,Rab10调控aMPV/C的复制。将pCMV-mcherry-Rab10分别与可融合表达GFP的aMPV/C结构蛋白的重组载体共转染A549细胞,24 h后采用激光共聚焦显微镜观察。结果显示,Rab10可与多个aMPV/C蛋白(N、F、M、G、SH、P、M2-1、M2-2、L1、L2、L3)在细胞质中存在共定位荧光信号,而与L4蛋白无明显共定位。将pCMV-Flag-Rab10分别与可融合表达GFP的aMPV/C结构蛋白的重组载体共转染HEK293T细胞,36 h后收集细胞样进行免疫共沉淀试验。结果显示,IP样品中表达P和M2-1蛋白的样品出现了特异性条带,其他蛋白无特异性条带。上述结果表明,Rab10与aMPV/C P和M2-1蛋白存在互作。综上所述,Rab10通过与aMPV/C P和M2-1蛋白互作从而调控病毒的复制,相关研究结果可为深入阐明Rab10调控aMPV/C复制的分子机理提供研究基础。 展开更多
关键词 rab10 禽偏肺病毒C型 复制 表达水平 互作
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