MicroRNA-451通过靶向RAB14抑制鼻咽癌细胞的生长、侵袭和迁移能力

目的:探讨mi R-451对鼻咽癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响。方法:选取正常鼻咽上皮细胞株NP69及4株鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2、5-8F、6-10B,荧光定量PCR检测mi R-451的表达量。选取鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2,分别转染mi R-451 mimics和阴性对照后,采用MTT法检测鼻咽癌细胞的增殖能力,划痕实验检测其侵袭能力,transwell迁移实验检测其迁移能力。通过生物信息学方法预测mi R-451的靶基因。结果:与正常鼻咽上皮细胞相比,mi R-451在鼻咽癌细胞株中的表达量明显降低。鼻咽癌细胞过表达mi R-451后,其增殖、侵袭和迁移能力均受到抑制。通过靶基因预测数据库预测RAB14为mi R-451的靶基因,并通过荧光素酶报告基因实验、RT-PCR、Western blot实验验证了这一结果。将RAB14低表达后,也在一定程度上抑制了鼻咽癌的增殖、侵袭和转移能力。结论:mi R-451通过靶向RAB14抑制了鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

RAB14在癌症中的研究进展

1 RAB14概述根据最新的统计数据显示,2020年全球估计有1930万新发癌症病例和近1000万癌症死亡病例(不包括非黑色素瘤皮肤癌)[1]。全球确诊率最高的癌症前三位分别是乳腺癌、肺癌和前列腺癌;死亡率最高的前三位分别是肺癌、肝癌和结直肠癌[2]。因此寻找新的治疗靶点和诊断、预后生物标志物非常重要。近年来RAB14因其特殊的生物学功能,受到众多研究者的关注。RAB14是RAB蛋白家族的成员之一,由小GTP结合蛋白(G蛋白)构成,其相对分子质量为(20~40)×10^(3)[3]。据研究RAB蛋白家族具有调节囊泡运输[4]、信号转导[5]和各种膜受体循环[6]等重要功能,如RAB鸟苷三磷酸酶(GTPases)依赖的内吞途径通过N-钙黏蛋白的转运来调节神经元细胞成熟和迁移[7]。

lncRNA SNHG14调节miR-361-5p/RAB14轴对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA宿主基因14(lncRNA SNHG14)靶向微小RNA-361-5p(miR-361-5p)/RAB14轴对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养人宫颈癌细胞HeLa作为研究对象,将其分为Control组、sh-NC组、sh-SNHG14组、sh-SNHG14+inhibitor-NC组、sh-SNHG14+miR-361-5p inhibitor组。各组细胞lncRNA SNHG14、miR-361-5p、RAB14 mRNA表达检测用RT-qPCR法进行;HeLa细胞增殖检测用CCK-8试剂盒进行,HeLa细胞凋亡检测用流式细胞术进行,HeLa细胞迁移检测用划痕实验进行,HeLa细胞侵袭检测用Transwell法进行,miR-361-5p与lncRNA SNHG14和RAB14的相互作用用双荧光素酶报告实验测定。结果与sh-NC组相比,sh-SNHG14组中lncRNA SNHG14、RAB14 mRNA、RAB14蛋白表达水平、OD值、划痕愈合率、细胞侵袭数降低,miR-361-5p水平、细胞凋亡率升高(P<0.05);与sh-SNHG14+inhibitor-NC组相比,sh-SNHG14+miR-361-5p inhibitor组中RAB14 mRNA、RAB14蛋白表达水平、划痕愈合率、OD值、细胞侵袭数增加,凋亡率和miR-361-5p水平下降(P<0.05),而lncRNA SNHG14水平无差异(P>0.05);lncRNA SNHG14靶向下调miR-361-5p,miR-361-5p靶向下调RAB14。结论在宫颈癌细胞中抑制lncRNA SNHG14的表达可靶向上调miR-361-5p,抑制RAB14的表达,进而促进宫颈癌细胞的凋亡,抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。

miR-144-5p对人结肠癌细胞生长和转移的抑制作用及机制

目的检测miR-144-5p在结肠癌中的表达,并研究其对结肠癌细胞生长和转移的抑制作用和机制。方法采用RT-qPCR技术检测结肠癌标本、癌旁组织及癌旁细胞中miR-144-5p的表达。使用噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,并使用Transwell分析评估细胞侵袭和迁移。结果miR-144-5p在结肠癌组织和细胞系中显著下调(P<0.01)。MTT检测发现,miR-144-5p可抑制细胞增殖。且miR-144-5p可以明显抑制小鼠荷瘤模型中结肠癌的生长。通过划痕实验发现,miR-144-5p可抑制肿瘤细胞迁移,且miR-144-5p还可以明显抑制结肠癌细胞在体外的侵袭。结论miR-144-5p可抑制结肠癌细胞的增殖和转移,并促进其凋亡,有望作为靶点用于结肠癌的临床治疗。