miR-92a通过下调RAB3B表达促进肝癌细胞增殖、迁移的机制分析

目的分析miR-92a通过下调RAB3B表达促进肝癌细胞增殖、迁移的机制。方法将miR-92a mimics及miRNA control分别转染至肝癌细胞SKHep-1,分别设为miR-92a组及miR-92a NC组,未经转染的SKHep-1细胞为对照组。采用荧光素酶报告基因检测miR-92a与RAB3B的靶向关系,利用实时荧光定量PCR(q PT-PCR)分析各组细胞miR-92a与RAB3B的表达水平,MTT法检测细胞增殖情况,划痕实验分析细胞迁移,Western blot检测各蛋白表达水平。结果 RAB3B是miR-92a的下游靶基因。相比较于对照组及miR-92a NC组,miR-92a组细胞miR-92a表达量明显升高,而相应的RAB3B表达量明显降低(P <0.05)。miR-92a组细胞不同时间细胞增殖数及划痕愈合率均明显高于对照组及miR-92a NC组(P <0.05)。相比较于对照组及miR-92a NC组细胞,miR-92a组细胞中RAB3B蛋白表达量明显降低(P <0.05),而Ki67、VEGF、MMP-2及MMP-9蛋白对表达量明显升高(P <0.05)。结论MiR-92a可通过靶向下调RAB3B表达实现对肝癌细胞增殖及迁移的促进作用,而其作用机制可能与提升Ki67、VEGF、MMP-2及MMP-9蛋白表达有关。

siRNA screening of Rab GTPases reveal a role of Rab3b and Rab3c positive vesicles in cross presentation

Antigen cross-presentation in dendritic cells is a complex intracellular membrane transport process, but the underlying molecular mechanisms remain to be thoroughly investigated.