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基于RACE模型的跨境电商独立站运营推广策略 被引量:3
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作者 谢雪莲 林世宾 《全国流通经济》 2023年第11期41-44,共4页
当前跨境电商企业在选择独立站过程中面临着不亚于第三方平台的重大竞争压力,即使在实施了众多的网站营销策略与方法后收获仍然甚微,无法解决其窘迫的现状。本文以国内跨境电商公司在海外跨境电商企业独立站为例,基于RACE模型,通过对独... 当前跨境电商企业在选择独立站过程中面临着不亚于第三方平台的重大竞争压力,即使在实施了众多的网站营销策略与方法后收获仍然甚微,无法解决其窘迫的现状。本文以国内跨境电商公司在海外跨境电商企业独立站为例,基于RACE模型,通过对独立站进行分析,并依托模型提出有效的针对性解决方案,改善独立站运营效果,助力跨境电商企业独立站提高效益。 展开更多
关键词 race模型 跨境电商 独立站 网站营销
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香蕉枯萎和细菌性软腐病菌的多重PCR检测
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作者 蒲小明 张景欣 +4 位作者 沈会芳 孙大元 刘平平 林壁润 杨祁云 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期211-218,231,共9页
香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.cubense和细菌性软腐病菌Dickeya zeae的复合侵染为害给香蕉产业发展带来严重挑战,有必要建立相关病害的多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction, multiplex PCR)检测技术。本文... 香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.cubense和细菌性软腐病菌Dickeya zeae的复合侵染为害给香蕉产业发展带来严重挑战,有必要建立相关病害的多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction, multiplex PCR)检测技术。本文基于尖孢镰刀菌古巴专化型1号生理小种(F.oxysporum f.sp.cubense race 1,FOC1)基因组contig 438区间(35 631-37 693 bp)(GenBank:AMGP01000438.1)和4号生理小种(F.oxysporum f.sp.cubense race 4,FOC4)基因组contig 195区间(4 028-6 126 bp)(GenBank:AMGQ01000195.1)存在160 bp插入序列差异设计特异扩增引物FOC-F/-R,同时以香蕉细菌性软腐病菌D.zeae的促旋酶B亚单位基因(the subunit B of gyrase gene)(GenBank:JQ284039)序列设计特异扩增引物gyrB-F/-R。多重PCR检测结果显示:本技术可在一次PCR扩增反应内同时检测香蕉枯萎病菌1号、4号生理小种和细菌性软腐病菌;多重PCR的灵敏度结果表明:检测香蕉枯萎病菌的DNA浓度最低限为0.1 ng/μL,细菌性软腐病菌的灵敏度为103cfu/mL;检测结果稳定可靠。因此,本研究建立的多重PCR检测方法可有效应用于检测香蕉发病组织中的香蕉枯萎病菌和细菌性软腐病菌,也可用于香蕉种苗和田间土壤带病菌的监测,为香蕉种植保驾护航。 展开更多
关键词 香蕉 尖孢镰刀菌古巴专化型1号生理小种 尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种 玉米迪基氏菌 多重PCR 促旋酶B亚单位基因
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广西苦瓜白粉病菌优势生理小种鉴定及ITS序列分析
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作者 冯诚诚 陈小凤 +5 位作者 黄熊娟 琚茜茜 黄玉辉 梁家作 刘杏连 黄如葵 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期96-104,共9页
【目的】明确广西苦瓜主产区白粉病病原菌种类和生理小种,为苦瓜白粉病防治及抗病育种提供科学依据。【方法】2016—2021年,在广西南宁、柳州、桂林、北海、玉林、贺州、崇左和贵港8个苦瓜产区采集并分离白粉病病原菌246份,通过显微镜... 【目的】明确广西苦瓜主产区白粉病病原菌种类和生理小种,为苦瓜白粉病防治及抗病育种提供科学依据。【方法】2016—2021年,在广西南宁、柳州、桂林、北海、玉林、贺州、崇左和贵港8个苦瓜产区采集并分离白粉病病原菌246份,通过显微镜观察分生孢子形态及ITS序列分析构建系统进化树明确苦瓜白粉病菌种类,并采用国际通用的13个甜瓜白粉病菌生理小种鉴别寄主和鉴别标准体系对白粉病菌的生理小种进行鉴定;通过调查白粉病菌优势生理小种在广西苦瓜栽培品种桂农科6号、清脆277、翠华和海加仕183上的危害程度和致病力分析,明确广西苦瓜主产区白粉病菌种类及生理小种的分化。【结果】通过形态学与分子生物学相结合的方法确定广西苦瓜白粉病病原菌为单囊壳白粉菌(Sphaerotheca fuliginea),存在小种1和2F两个生理小种,其中,2016—2021年生理小种1的平均分离频率为95.72%,是广西苦瓜白粉病菌的优势小种,生理小种2F仅在贵港苦瓜种植基地发现,平均分离频率为4.29%。苦瓜白粉病菌优势小种致病力测定结果显示,4个广西苦瓜栽培品种的病情指数逐年增加,生理小种1致病力强度呈上升趋势,田间病害发生较严重。【结论】导致广西苦瓜白粉病的病原菌为单囊壳白粉菌,存在小种1和2F两个生理小种,其中生理小种1为广西苦瓜白粉病菌优势小种。广西苦瓜白粉病菌菌株的遗传进化与地域有一定关系,但差异不明显。 展开更多
关键词 苦瓜 白粉病 单囊壳白粉菌 生理小种 ITS序列分析 广西
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家蚕素斑品种菁松的茶斑限性定向转育
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作者 廖鹏飞 李琼艳 +7 位作者 罗顺高 刘敏 朱红涛 李继娅 白红英 陈海佺 范永慧 董占鹏 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期1032-1040,共9页
为在家蚕现行素斑品种菁松的幼虫发育早期进行雌雄性别鉴别,实现雌雄分养分缫差异化利用目的,用普斑限性品系云蚕7A的雌与茶斑品系Cb的雄杂交后,再分别与现行素斑品系菁松A、菁松B杂交,其后代连续数次回交素斑亲本后自交,结合分类选择... 为在家蚕现行素斑品种菁松的幼虫发育早期进行雌雄性别鉴别,实现雌雄分养分缫差异化利用目的,用普斑限性品系云蚕7A的雌与茶斑品系Cb的雄杂交后,再分别与现行素斑品系菁松A、菁松B杂交,其后代连续数次回交素斑亲本后自交,结合分类选择进行个体和蛾区选择淘汰,将云蚕7A的普斑限性基因和Cb的茶斑基因转入现行素斑品种菁松中,定向转育得到菁A茶限和菁B茶限。结果表明:转育过程中,幼虫斑纹分化成颜色与形状易于分辨的茶斑与非茶斑2种类型,转育得到的菁A茶限和菁B茶限幼虫在3龄初期就会呈现茶斑颜色深浅明显不同的分化,能准确分辨雌雄,其虫蛹率分别为96.91%和96.40%,全茧量分别为1.62 g和1.56 g,茧层率分别为23.78%和23.26%,经济性状与其轮回亲本的差异较小,表现出健康好养、茧质优良等特性。研究结果可为创建特殊性状的育种材料、差异化利用雌雄蚕,以及降低雄蚕种繁育成本奠定基础。 展开更多
关键词 家蚕品种 普斑限性 素斑 茶斑限性 定向转育
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香蕉枯萎病菌内源报告基因Foc4carS的鉴定及其应用
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作者 彭军 曾凡云 +5 位作者 王艳玮 漆艳香 丁兆建 王少伶 谢艺贤 张欣 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期873-885,共13页
香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴转化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Foc)引起的香蕉毁灭性土传病害,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的香蕉品系,危害最严重。carS基因通过调控下游car结构基因参与调控镰刀菌类胡萝卜素的生... 香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴转化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Foc)引起的香蕉毁灭性土传病害,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的香蕉品系,危害最严重。carS基因通过调控下游car结构基因参与调控镰刀菌类胡萝卜素的生物合成,本研究克隆鉴定了Foc4carS基因(FOIG_05085),Foc4carS蛋白具有典型的RING-finger蛋白结构域。利用分割标记法(Split-marker PCR)获得Foc4carS基因的融合片段,同时构建含有Foc4carS基因sgRNA591序列的pUC-fFuCas9-HTBNLS-hph-Foc4carS基因编辑载体,通过PEG介导的原生质体转化获得该基因的敲除突变体、回补突变体以及基因编辑敲除体,并对敲除和回补突变体的生物学特性和致病力进行分析。结果显示:ΔFoc4carS突变体的菌落直径、产孢量和致病力等生物学表型与野生菌株Foc4无显著差异,而ΔFoc4carS突变体菌落颜色呈深橙色,Foc4carS基因的缺失影响了次生代谢产物类胡萝卜素的生物合成;基因编辑的ΔFoc4carS(HDR)突变体不论是再生筛选板还是继代后的PDA平板,其菌落均出现典型的深橙色,表明Foc4carS可作为内源报告基因,在香蕉枯萎菌Foc4中进行基因质粒型CRISPR/Cas9编辑可行。 展开更多
关键词 香蕉枯萎菌Foc4 Foc4carS基因 类胡萝卜素 基因敲除 CRISPR/Cas9基因编辑
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径向油孔结构对环下润滑高速轴承内部流动特性的影响研究
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作者 朱鹏飞 姜乐 +2 位作者 吕亚国 公平 刘振侠 《推进技术》 EI CSCD 北大核心 2024年第1期201-211,共11页
为了研究径向油孔结构对环下润滑高速轴承内部流动特性的影响规律,根据高速轴承内部流动特征建立了数值计算方法,针对包含输油通道、径向油孔和轴承组件的物理仿真模型开展了油气两相流动计算,对比并讨论了不同径向油孔结构下轴承内部... 为了研究径向油孔结构对环下润滑高速轴承内部流动特性的影响规律,根据高速轴承内部流动特征建立了数值计算方法,针对包含输油通道、径向油孔和轴承组件的物理仿真模型开展了油气两相流动计算,对比并讨论了不同径向油孔结构下轴承内部的油气分布和黏性摩擦损失。数值模拟结果表明,径向油孔孔径增大后轴承内部的平均滑油体积分数单调增加且滑油分布更均匀。径向油孔布设在周向油槽的同侧有利于提升轴承内部的平均滑油体积分数,同时滑油沿周向分布的均匀性较好。轴承组件表面扩展参数受径向油孔结构的影响,其变化趋势与平均滑油体积分数的变化相似。全部采用经验公式预测得到的黏性摩擦损失整体偏高,且不能反映径向油孔结构参数的影响,数值模拟和经验公式相结合计算得到的黏性摩擦损失与直接采用数值模拟获得的结果表现出较好的一致性。 展开更多
关键词 高速轴承 环下润滑 径向油孔 油气两相流 流体黏性摩擦
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科学家与美国政府的冷战政策
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作者 赵学功 《华中师范大学学报(人文社会科学版)》 北大核心 2024年第2期57-66,共10页
美国科学家无论是在冷战的起源、演进及结束过程中都扮演了非常重要的角色,基本形成了支持和反对美国冷战政策的两派。一派科学家反对军备竞赛,主张对核武器实施国际管制,全面禁止核试验,通过国际合作谋求东西方关系的缓和;另一派则力... 美国科学家无论是在冷战的起源、演进及结束过程中都扮演了非常重要的角色,基本形成了支持和反对美国冷战政策的两派。一派科学家反对军备竞赛,主张对核武器实施国际管制,全面禁止核试验,通过国际合作谋求东西方关系的缓和;另一派则力主通过技术进步来确保美国的国家安全,主张大力发展核力量,谋求对苏联的绝对优势,以此威慑苏联,并在必要时使用核武器以实现美国的政治和军事意图。两派都通过各种渠道对美国政府的政策施加影响,双方之间的较量贯穿于整个冷战时期。 展开更多
关键词 奥本海默 特勒 科学家 冷战 核军备竞赛
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希腊色雷斯民间体育比赛研究
8
作者 朱亚成 《四川体育科学》 2024年第1期79-84,共6页
目的:描述和探究希腊北部不确定族群的赛马、摔跤、竞走等民间体育比赛项目的起源与发展,同时力求客观反映和呈现色雷斯民间体育比赛情况,为后续研究色雷斯体育赛事提供参考依据。方法:运用文献资料和历史研究等方法,对已发表的有关该... 目的:描述和探究希腊北部不确定族群的赛马、摔跤、竞走等民间体育比赛项目的起源与发展,同时力求客观反映和呈现色雷斯民间体育比赛情况,为后续研究色雷斯体育赛事提供参考依据。方法:运用文献资料和历史研究等方法,对已发表的有关该主题的文献进行深入研究,同时查阅了同时期色雷斯的历史文化和宗教等有关文献资料,全面分析色雷斯民间体育比赛情况。结果:色雷斯人主要通过摔跤比赛或赛马活动来庆祝节日和庆祝活动,这些体育比赛往往是在宗教节日上进行的,得胜者奖品多为羊羔和山羊。结论:色雷斯人以自然为灵感,以民族文化为指导,组织和参与了民间体育比赛,没有遵循当今体育赛事的比赛规则和形式。这些自发的体育运动和体育比赛与宗教有关,因为它们经常在宗教节日举行。由于这些民间游戏,希腊的体育赛事一直延续到今天,作为青年人日常活动的一种表现,作为他们身体和心理正直的一种表现。 展开更多
关键词 摔跤比赛 赛马比赛 竞走比赛 民间体育 希腊体育 色雷斯文化
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新时代中华传统体育文化传承与发展的实践困境与优势突破研究
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作者 姚辉波 杨明欣 张波 《体育科技文献通报》 2024年第5期271-274,共4页
本文运用文献资料法、逻辑分析法、案例分析法等研究方法,在阐明新时代中华传统体育文化的时代价值基础上,分析了新时代中华传统体育文化传承与发展的实践困境:发展传承方式单一,传承主体缺失;城镇化变革对中华传统体育文化的挑战;社会... 本文运用文献资料法、逻辑分析法、案例分析法等研究方法,在阐明新时代中华传统体育文化的时代价值基础上,分析了新时代中华传统体育文化传承与发展的实践困境:发展传承方式单一,传承主体缺失;城镇化变革对中华传统体育文化的挑战;社会价值认知不足与教育体系缺位;资金资源不足与商业化运作。据此,提出了新时代中华传统体育文化传承与发展的优势突破:新时代中华传统体育文化传承体系的多元化、新时代国际环境下文化软实力提升的政策导向、新时代科技与传媒应用下体育文化的重振再生、新时代学校育人理念下中华传统体育文化的课程融入。 展开更多
关键词 新时代 中华传统体育文化 困境 突破 龙舟
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“一带一路”框架下藏族赛马节的保护和传承研究
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作者 朱亚成 《四川体育科学》 2024年第2期106-112,共7页
主要运用文献资料、实地调研等方法对“一带一路”框架下藏族赛马节保护和传承的价值、困境及策略进行了深入分析,旨在为“一带一路”人文交流和藏族赛马节保护传承提供参考。“一带一路”框架下藏族赛马节保护和传承的意义和价值主要... 主要运用文献资料、实地调研等方法对“一带一路”框架下藏族赛马节保护和传承的价值、困境及策略进行了深入分析,旨在为“一带一路”人文交流和藏族赛马节保护传承提供参考。“一带一路”框架下藏族赛马节保护和传承的意义和价值主要表现在保护和弘扬藏族赛马文化的重要利器,助力藏族赛马节申报非物质文化遗产;满足藏族人民对美好体育生活的向往,搭建“一带一路”人文交流互动平台;推进体育赛事创新发展,打造“一带一路”概念中西藏及涉藏省份体育品牌。本文从政策、文化、经济、生态4个维度分别提出加强藏族赛马节与“一带一路”倡议的深度融合、夯实藏族赛马节保护和传承的体育文化土壤环境、打造西藏和四省涉藏州县赛马节保护区域共同体、健全藏族赛马节保护和传承的社会生态保障体系等策略。 展开更多
关键词 “一带一路”倡议 藏族赛马节 非物质文化遗产 赛马文化 保护 传承
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空间威慑到空间威胁:防止外空军备竞赛的规则解释与中国因应
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作者 高国柱 高岚 《北京航空航天大学学报(社会科学版)》 2024年第3期109-120,共12页
目前,外空军控规则的走向出现了明显分歧。一些国家提出所谓的“空间威胁”概念,意图推进“负责任外空行为准则”。威慑与威胁密切相关,没有威胁就没有威慑。当代国际法承认有限度威慑的合法性,也就意味着承认部分威胁的合法性。《联合... 目前,外空军控规则的走向出现了明显分歧。一些国家提出所谓的“空间威胁”概念,意图推进“负责任外空行为准则”。威慑与威胁密切相关,没有威胁就没有威慑。当代国际法承认有限度威慑的合法性,也就意味着承认部分威胁的合法性。《联合国宪章》中的威胁主要是指“武力威胁”,如果适用于外空领域,必须对空间威胁的所有可能要素加以分析,包括主观(意图)、实施主体(是否可归结为国家)、行为表现(可衡量、可归因、可证明)、损害后果、因果关系等,换言之,需达到一定的门槛——必须具备诉诸武力的极大可能性。一些国家列举的所谓“空间威胁”具有选择性和针对性,存在着覆盖不全和依赖主观判断的缺陷,依照现有国际法进行解释,这些所谓的“空间威胁”不能被确认为国际不法行为。当代国际外空军控规则是大国奉行威慑战略下彼此达成妥协的结果,如果无视这一历史趋势,强行推进有利于某些国家保持太空军事优势的规则,必然会破坏战略稳定与平衡,最终严重损害国际社会防止外空军备竞赛(PAROS)的集体努力。 展开更多
关键词 空间威慑 空间威胁 防止外空军备竞赛(PAROS) 威慑战略 外空军控规则
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美国加州K-12族裔研究课程探绎
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作者 杨捷 欧吉祥 《沈阳师范大学学报(教育科学版)》 2024年第1期24-35,共12页
近年来,美国加州政府开展了一项极具话题性和挑战性的基础教育课程改革,即在K-12阶段推行族裔研究课程。K-12族裔研究课程以批判性种族理论为理论基础,主张通过“反叙事”打破白人对主流课程的叙事控制、文化独裁和知识霸权;超越教育机... 近年来,美国加州政府开展了一项极具话题性和挑战性的基础教育课程改革,即在K-12阶段推行族裔研究课程。K-12族裔研究课程以批判性种族理论为理论基础,主张通过“反叙事”打破白人对主流课程的叙事控制、文化独裁和知识霸权;超越教育机会与过程平等,力主教育结果平等;揭露、反对教育中的“色盲”现象。为保障K-12族裔研究课程的实施,加州教育厅研制了《族裔研究示范课程》,从目标、原则等方面对课程进行了规范与指导。在加州政府的支持下,K-12族裔研究课程在合法化、制度化的进程中取得了初步成果,但仍面临多方面争议,其发展前景尚不明朗,实际成效仍有待考察。围绕K-12族裔研究课程展开的“大辩论”是美国无休止“文化战争”扩大化的缩影,它折射出当前美国社会的紧张和分裂。 展开更多
关键词 K-12族裔研究课程 批判性种族理论 文化战争 种族
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藏族赛马节赋能乡村振兴的价值、困境与策略
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作者 朱亚成 《鹿城学刊》 2024年第2期24-26,50,共4页
藏族赛马节契合以文化产业赋能乡村经济社会发展的要求,是文化产业赋能乡村振兴的鲜活案例和生动样本。藏族赛马节赋能乡村振兴的价值体现在助力乡村振兴的重要抓手、传承地方文化的重要载体、提升社会经济效益的重要方式等方面;困境表... 藏族赛马节契合以文化产业赋能乡村经济社会发展的要求,是文化产业赋能乡村振兴的鲜活案例和生动样本。藏族赛马节赋能乡村振兴的价值体现在助力乡村振兴的重要抓手、传承地方文化的重要载体、提升社会经济效益的重要方式等方面;困境表现在传统与现代冲突、资源保护问题、乡村发展阻碍以及社会认知误解等。鉴于此,提出坚持保护与传承相结合、旅游与文化融合相结合、农牧业与产业联动相结合、社区参与与自治相结合等促进策略。 展开更多
关键词 藏族赛马节 乡村振兴 价值 困境 策略
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赛车空气动力学套件全局优化策略研究
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作者 范沁红 牛博 +1 位作者 连晋毅 陈殿民 《汽车实用技术》 2024年第9期67-74,共8页
大学生方程式赛车空气动力学套件的优化对于赛车的燃油经济性和操纵稳定性有着重要的影响。从全局角度出发,选取前翼、后翼、侧翼各翼片攻角共10个设计变量,横向对比了不同的试验设计方法、近似模型搭建方法以及多目标优化方法,之后通... 大学生方程式赛车空气动力学套件的优化对于赛车的燃油经济性和操纵稳定性有着重要的影响。从全局角度出发,选取前翼、后翼、侧翼各翼片攻角共10个设计变量,横向对比了不同的试验设计方法、近似模型搭建方法以及多目标优化方法,之后通过圈速仿真进行验证,选择出最适合翼型攻角优化问题的优化策略,并以此策略对整车进行优化。对比优化前后整车气动性能,最终赛车的气动负升力增加19%,阻力增加2.03%,较好地改善了赛车的空气动力学性能。结果表明,此种优化策略可以为赛车翼片攻角的选定提供一定的指导。 展开更多
关键词 赛车空气动力学套件 全局优化 气动性能 优化策略
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直线加速赛车动力系统匹配设计
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作者 郑颖 郑显锋 杨文兴 《农业装备与车辆工程》 2024年第2期79-81,共3页
以直线加速赛车为研究对象,以赛车的动力性能指标最优为目标,结合直线加速大赛要求,对动力系统主要零件——电动机、电池进行参数计算以及选型,同时计算传动系统参数,完成动力系统参数匹配设计。利用ADVISOR软件对整车的动力性及电池性... 以直线加速赛车为研究对象,以赛车的动力性能指标最优为目标,结合直线加速大赛要求,对动力系统主要零件——电动机、电池进行参数计算以及选型,同时计算传动系统参数,完成动力系统参数匹配设计。利用ADVISOR软件对整车的动力性及电池性能进行仿真分析,结果表明各项参数匹配均处于合理的范围内,设计满足要求。 展开更多
关键词 直线加速赛车 动力性能 动力匹配 ADVISOR 仿真分析
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基于持续强化学习的自动驾驶赛车决策算法研究 被引量:1
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作者 牛京玉 胡瑜 +1 位作者 李玮 韩银和 《高技术通讯》 CAS 北大核心 2024年第1期1-14,共14页
赛道形状与路面材质变化对自动驾驶赛车的行为决策带来了严峻挑战。为应对道路间的动力学差异,本文提出一种基于持续强化学习(CRL)的高速赛车决策算法。该算法将不同道路看作独立任务。算法的第1训练阶段负责提取描述不同任务上赛车动... 赛道形状与路面材质变化对自动驾驶赛车的行为决策带来了严峻挑战。为应对道路间的动力学差异,本文提出一种基于持续强化学习(CRL)的高速赛车决策算法。该算法将不同道路看作独立任务。算法的第1训练阶段负责提取描述不同任务上赛车动力学的低维特征,从而计算出任务间的相似性关系。算法的第2训练阶段负责为策略学习过程提供2个持续强化学习约束:其一是权重正则化约束,策略网络中对于旧任务重要的权重将在新任务学习期间被限制更新,其限制力度由任务相似性自适应调节;其二是奖励函数约束,鼓励在新任务学习期间策略的旧任务性能不下降。设计不同任务排序下的赛车实验和持续强化学习评价指标以评估算法性能。实验结果表明,所提算法能在既不存储旧任务数据也不扩展策略网络的条件下获得比基准方法更出色的驾驶性能。 展开更多
关键词 强化学习(RL) 持续学习 行为决策 自动驾驶赛车 动力学特征提取
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湖羊lncRNA-269的鉴定及转录调控分析
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作者 舒嘉傲 曹少先 +6 位作者 孟春花 钱勇 张俊 张建丽 丁强 李隐侠 李齐发 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期174-182,共9页
[目的]本文旨在研究湖羊长链非编码RNA-269(long no-coding RNA-269,lncRNA-269)序列特征、表达模式和转录调控,为后续开展lncRNA-269的功能研究提供理论基础。[方法]以湖羊为研究对象,采用5′/3′RACE结合PCR扩增方法获得其序列全长,利... [目的]本文旨在研究湖羊长链非编码RNA-269(long no-coding RNA-269,lncRNA-269)序列特征、表达模式和转录调控,为后续开展lncRNA-269的功能研究提供理论基础。[方法]以湖羊为研究对象,采用5′/3′RACE结合PCR扩增方法获得其序列全长,利用RT-qPCR方法鉴定其在湖羊组织中的表达模式,并利用PCR方法扩增其启动子区,鉴定其启动子区特征,分析其转录调控情况。[结果]湖羊lncRNA-269全长3 146 bp,组织表达谱显示其在湖羊各组织中广泛表达,且在健康卵泡中显著高表达,其表达水平与NR5A1 mRNA水平和血清中雌二醇(E_(2))水平呈正相关。荧光素酶活性分析发现在lncRNA-269启动子区的-359~-17 nt有1个转录激活基序,在-1 485~-942 nt有1个转录抑制基序。JASPAR软件预测发现在lncRNA-269转录抑制启动子区域存在FOXO3、PDX1等转录因子结合位点,在转录激活区域有SMAD4、YY1等转录因子结合位点。过表达SMAD4可显著提升lncRNA-269启动子区荧光素酶活性,染色质免疫沉淀(ChIP)-PCR试验进一步确认了SMAD4特异性与lncRNA-269启动子区结合。[结论]湖羊lncRNA-269在健康卵泡中显著高表达,其启动子区存在一个转录激活区域和一个转录抑制区域,转录因子SMAD4可通过与lncRNA-269启动子区结合显著上调lncRNA-269的启动子活性。 展开更多
关键词 湖羊 卵巢卵泡 lncRNA-269 5′/3′race 染色质免疫沉淀(ChIP)
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RACE法分离团头鲂生长抑素全长cDNA及其序列测定 被引量:20
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作者 俞菊华 夏德全 +3 位作者 杨弘 贺艳辉 陈勇军 吴婷婷 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期533-539,共7页
生长抑素具有抑制脑垂体GH释放的作用,是调控鱼类生长的主要激素之一。本研究采用RT和RACE(rapid amplification of cDNA ends)法,分离和测定了团头鲂脑中生长抑素PSSI cDNA的全长核苷酸序列,并对该基因进行了结构和系统进化分析。3’R... 生长抑素具有抑制脑垂体GH释放的作用,是调控鱼类生长的主要激素之一。本研究采用RT和RACE(rapid amplification of cDNA ends)法,分离和测定了团头鲂脑中生长抑素PSSI cDNA的全长核苷酸序列,并对该基因进行了结构和系统进化分析。3’RACE扩增得到700bp左右的片段,5’RACE分离得到500bp左右的片段,把3’片段与5’片段拼接得到全长cDNA。cDNA全长735bp[不含poly(A)],5’端非翻译区有100nt,3’端290bP[不包含poly(A)],阅读框(open reading frame,ORF)345bp。该序列与金鱼PSSI cDNA序列同源性为90%,主要差异在5’端非翻译区。团头鲂生长抑素mRNA阅读框编码114个氨基酸,包括一些酶切位点,产生26个氨基酸的大分子态生长抑素,进一步加工成与人等结构相似的14个氨基酸的生长抑素;团头鲂生长抑素前体氨基酸序列与金鱼、虹鳟、鲶鱼、鮟鱇、蛙、牛、鼠、鸡、猴、人等的比较发现,它与金鱼的同源性最高达95%,与鮟鱇最低50%,与人68%。这说明生长抑素基因在长期的进化中相当保守,同时,也因为鱼类生活环境多样导致基因变异较大。 展开更多
关键词 race 分离鉴定 团头鲂 生长抑素 CDNA 序列测定
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RACE技术在钓取白血病相关基因LRP16全长cDNA中的应用 被引量:26
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作者 韩为东 于力 +4 位作者 楼方定 王全顺 赵瑜 史子江 靳海杰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第1期18-21,共4页
LRP16是我们应用甲基化敏感的限制性界标基因组扫描 (restrictionlandmarkgenomicscanning ,RLGS)技术时发现的一个与白血病复发相关的新基因。为钓取这一新基因的全长cDNA ,本实验采用了cDNA末端快速扩增法 (rapidamplificationofcDNAe... LRP16是我们应用甲基化敏感的限制性界标基因组扫描 (restrictionlandmarkgenomicscanning ,RLGS)技术时发现的一个与白血病复发相关的新基因。为钓取这一新基因的全长cDNA ,本实验采用了cDNA末端快速扩增法 (rapidamplificationofcDNAend ,RACE)。通过对RACE法若干步骤进行优化 ,克隆得到了LRP16基因cDNA的 5′ 与 3′ 非翻译区 ,进而获得其全长及完整的开放阅读框架 ,并作为新基因被GenBank收录。上述结果表明 ,RACE技术是钓取未知基因全长cDNA敏感而快速的方法 ,尤其是对 5′ 及 3′ 展开更多
关键词 白血病相关基因 LRP16基因 CDNA race技术
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江西油菜根肿菌生理小种鉴定及品种抗病性鉴定
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作者 吴彩云 高春华 +9 位作者 周继中 刘子荣 欧阳凤仔 张洋 孙明珠 李晓楠 范琳娟 姚健 姚英娟 徐雪亮 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期300-306,共7页
油菜根肿病在江西省多市均有分布,尤以上饶婺源、吉安永新、九江瑞昌等地发生严重。为明确江西省油菜主产区根肿菌的生理小种,采用SCD鉴定系统对江西油菜主产区根肿菌进行了生理小种鉴定,结果共鉴定出3个生理小种类型:Pb1、Pb5和Pb12。... 油菜根肿病在江西省多市均有分布,尤以上饶婺源、吉安永新、九江瑞昌等地发生严重。为明确江西省油菜主产区根肿菌的生理小种,采用SCD鉴定系统对江西油菜主产区根肿菌进行了生理小种鉴定,结果共鉴定出3个生理小种类型:Pb1、Pb5和Pb12。为筛选出适于江西根肿病发病地区种植的油菜材料,开展了油菜材料对根肿菌的抗性测定。室内盆栽抗性测定表明,育种中间材料‘P360429001’‘2018362481’‘P360924009’‘P360281040’‘中油杂12’‘华油杂62R’和‘华双5R’的病情指数均低于或等于30.00,其中‘华油杂62R’和‘华双5R’表现为中抗水平。田间抗性测定结果表明,‘华油杂62R’‘秦优DK4’‘阳光50’和育种中间材料‘P360429001’‘ZS115R’的根肿病病情指数均低于30.00,但只有‘华油杂62R’对Pb1生理小种表现出中抗水平。本研究针对性地筛选出适于江西油菜根肿病发病地区种植的油菜材料,对江西油菜根肿病的防控和创制抗病性油菜资源提供了科学依据。 展开更多
关键词 油菜 根肿菌 分布 生理小种 抗性
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