利用Y-RACE法进行棉花胚珠cDNA末端快速扩增

在YADE(Y shapedadaptordependentextension)方法的基础上 ,设计了一种新的cDNA末端快速扩增方法 ,称为Y RACE法 .利用该方法只需一次cDNA合成就能进行多个基因的 3′和 5′末端的扩增 .分别利用Y RACE方法和RACE试剂盒 (TaKaRa)扩增了一个棉花胚珠cDNA片段F0 2 7的末端序列 .序列比较表明 ,用Y RACE方法扩增的末端序列较试剂盒所得序列在最末端稍短 ,但同样能进行正确拼接并获得全长编码序列 .对Y RACE法的优缺点和可能的改进作了进一步讨论 .

利用改良RACE方法克隆木薯淀粉合成关键酶AGPase小亚基基因的研究

首次从木薯中分离克隆出AGPase小亚基的基因5’端cDNA序列,最终为进一步成功获得木薯淀粉合成关键酶AGPase小亚基基因的cDNA全长序列提供依据。本研究以木薯作为试验材料,设计锚定引物,并根据木薯AGPase小亚基基因已知序列设计PCR特异引物,利用逆转录引物AUP1反转录总RNA,然后分离纯化反转录产物,通过对三大酶促反应(逆转录反应,TdT加尾,巢式及降落PCR技术)的具体改良,并将其与传统方法进行比较。利用改良后方法,首次成功获得木薯淀粉合成关键酶AGPase小亚基基因5’端cDNA序列。同时,本研究通过对RACE技术的改良与传统方法相比,在操作上更加简单、快速;在序列获得上更加高效;在试验成本上更加低廉。本研究可以高效且快速的成功获得木薯淀粉关键酶AGPase小亚基基因5’端序列,具有一定的实用性及简便性。

高脚竞速接力比赛中接力技术的研究——以第11届全国少数民族传统体育运动会为例

该文以2019年全国第11届少数民族传统体育运动会高脚竞速4×100m接力比赛决赛的8支队伍为调查对象,通过视频分析、对比分析法、数理统计法等研究方法,对高脚竞速接力比赛中接力环节进行研究。研究表明:(1)决赛中8支队伍呈现出了行进间交接方式和静止式交接方式两种不同的交接技术;(2)决赛成绩由高到低排名为湖北队、贵州队、广东队、广西队、陕西队、四川队、湖南队、江西队;(3)行进间交接方式交接用时少,容易造成失误,而静止式交接稳定性高,但交接耗时相对较长。基于此,提出以下建议:(1)选择适用接力技术并合理训练;(2)加强特定环境训练,增强技术稳定性;(3)注重专项体能训练,奠定竞赛基础;(4)推进科技助力,科学化训练体系。

蒙特卡罗方法模拟公路自行车运动员的功率及速度分布

近些年来,公路自行车赛引起众多关注,如何使运动员在比赛中获得更好的成绩成为众多研究的目标。为给出自行车运动员在比赛过程中功率分配方案,本文首先建立了公路自行车赛车手的功率曲线模型,然后分析对比了不同赛车选手的特点;再通过分析赛车手的在不同性质路段的动力学模型,获得运动员经过具体赛段的时间和速度随功率的变化。我们运用蒙特卡罗方法得到了不同赛车手在不同路段最佳的功率和速度分配曲线,并将模型应用于2021公路自行车UCI世锦赛,得到不同类型运动员具体功率和速度曲线在路程中的分布。通过这一模型我们可以得知,赛车手在赛程中尽力保持匀速状态并在擅长的路段进行一定的加速可以得到最佳的比赛结果。最后我们分析了该方法得到的结果的稳定性。

不同方法制备的RNA模板对杜仲肉桂醇脱氢酶基因5'-RACE扩增的影响

比较研究了分别以Trizol、改良CTAB法和热硼酸盐法制备的杜仲叶片RNA为模板进行肉桂醇脱氢酶基因5'末端扩增的不同效果。实验发现以改良CTAB法提取的RNA做模板时,得到的5'RACE产物特异性强,条带亮而清晰,效果最好。

我国优秀女子竞走运动员刘虹备战2023年全国竞走锦标赛赛前训练安排研究

以2023年全国竞走锦标赛女子20 km竞走项目冠军刘虹赛前备战训练安排为研究对象,采用文献资料法、专家访谈法、数理统计法、逻辑分析法,对刘虹赛前2个月的训练安排结构特点进行分析。研究结论为:训练内容安排以走和跑训练以及体能训练为主,以跑步机训练、爬坡训练和游泳为辅;不同时期的训练方法手段侧重点不同,赛前2个月前期以有氧训练和力量耐力训练为主,中期在提高有氧能力的基础上发展混氧能力训练,后期以有氧耐力训练为主、混氧训练为辅;训练负荷量前期呈逐渐上升趋势,后期整体呈高低交错变化趋势。

结球甘蓝黑腐病抗性评价及鉴定方法比较研究

黑腐病是由野油菜黄单胞菌野油菜致病变种引起的细菌性病害,是为害结球甘蓝的产量与品质的主要病害之一.尽管黑腐病的病原菌有多个生理小种,但是世界上黑腐病的发生主要是由Xcc1和Xcc4引起的,而甘蓝中抗Xcc1和Xcc4的种质资源相对较少.为了明确重庆地区的黑腐病病原菌,筛选抗黑腐病的甘蓝种质,本研究首先利用分子标记辅助鉴定重庆地区病原菌,然后采用离体整叶喷雾接种法评价30份甘蓝资源的抗病性,对筛选出的抗病种质采用离体叶片打孔喷雾法和滴接法复检,以及分子标记辅助鉴定.结果发现,重庆地区黑腐菌为Xcc1生理小种;离体整叶喷雾接种法接种16 d后,1份甘蓝材料(S18)表现为抗病,6份为耐病(S18S,S232,S23S,165,167,169);相比离体叶片打孔喷雾法,打孔滴接法能更准确区分抗病材料(S18)和耐病材料(S232);抗病材料(S18)和耐病材料(S232)均不含来自埃塞俄比亚芥抗黑腐病标记,但是它们同时具有BR6-InDel分子标记.该研究结果确定了重庆地区黑腐病病原菌生理小种为Xcc1,筛选出了抗该生理小种的甘蓝种质,明确了快速鉴定黑腐病抗性的方法,可为甘蓝抗黑腐病的种质创新和新品种选育提供技术支撑.

导弹武器专业课中导弹发射流程的跑马灯教学法

为提高导弹武器专业课学习效果,在分析传统“跑三路图”教学基础上,将跑马灯教学法应用在某型导弹发射流程教学中,给出了跑马灯式教学方法实施步骤.教学实践表明,与传统教学方法相比,跑马灯教学法大大地提高了教学效果.这为其他专业课的教学提供了参考.

大豆细菌性疫病菌生理小种及其鉴定方法研究

根据在国际通用鉴别品种上的反应，将黑龙江省１５个供试的大豆细菌性疫病菌菌株划分为小种１和小种４，其中小种４为优势小种，占供试菌株的８６．６７％。复叶喷雾接种和单叶压力接种法的鉴定结果一致。讨论了复叶喷雾接种鉴定大豆细菌性疫病菌生理小种的优越性和可行性。供试的大豆品种多数对小种１具有抗性，但对小种４均表现感病。

太湖地区水稻地方品种籼粳分类方法的比较

取太湖地区水稻地方品种99份(籼稻49份,粳稻50份)。比较分析了由品种的酚反应、氯酸钾抗性和稃毛长综合计算的判别值Z1;由硅酸体形态计算的Z2;根据叶绿体DNA电泳谱带判别栽培稻亚种类型的效果。结果表明:用叶绿体DNA判别栽培稻亚种类型的准确率最高,达95%;根据特性分类系数(Z1)划分籼粳类型的准确率次之,达86%;根据硅酸体形态分类系数(Z2)的判别准确率最低,为73%。

日本晚樱同源异型基因PrseAP3的克隆及其在单瓣与重瓣花中的表达分析

用同源克隆的方法和3′RACE技术,从日本晚樱(Prunus lannesiana)中分离得到了1个AP3同源基因PrseAP3的cDNA全长,GenBank登录号为JF710371。其cDNA全长977bp,包括1个编码235个氨基酸共708bp的开放阅读框。序列比对和分子系统发生分析表明,PrseAP3是拟南芥的AP3同源基因,其蛋白质的C末端具有2个保守基元:PI-derived模体和paleoAP3模体,属B类转录因子中paleoAP3进化系。半定量RT-PCR分析表明,PrseAP3主要在单瓣日本晚樱品种大岛的萼片、花瓣和雄蕊中表达;在重瓣品种一叶的花瓣、雄蕊和叶化心皮中表达。其表达组织特异性在2个品种间表现出明显的差异,并与拟南芥的AP3基因有一定的差别。

武术短兵竞赛存在问题与对策

运用文献资料法,对目前武术短兵运动出现的困境进行分析,认为影响武术短兵发展的主要原因是项目不能突出中华武术的特色、规则使用了不适宜的连击条款、兵器的安全性能出现问题,提出了相应的对策和创新方式思路。

两种检测HBV RNA方法在核苷(酸)类似物经治和初治慢性乙型肝炎患者中的相关性和一致性评价

目的比较RACE法和Sansure法检测核苷(酸)类似物经治和初治慢性乙型肝炎患者HBV RNA定量值的相关性和一致性。方法纳入南方医科大学南方医院门诊随访的慢性乙型肝炎患者并收集患者血清学、病毒学和生化数据。采集患者血清分别用RACE法和Sansure法检测HBV RNA水平,分析两者检测值的相关性和一致性。结果共入组101例慢性乙型肝炎患者,其中接受核苷(酸)类似物治疗62例,未曾接受核苷(酸)类似物治疗39例。治疗和未治疗组的HBsAg和HBV DNA水平存在显著差异,HBV RNA水平差异有统计学意义。两种方法相比,RACE法比Sansure法检测到的阳性患者更多(60/101和56/101),平均检测值更高(3.16和2.53 lg拷贝/mL)。HBV DNA水平与HBV RNA水平在治疗组没有相关性(RACE法R^2=0.4406,Sansure法R^2=0.5081),在未治疗组显著相关(RACE法R^2=0.8448,Sansure法R^2=0.8667)。RACE法和Sansure法HBV RNA检测值显著相关(R^2=0.8740);此外,两种HBV RNA检测方法Bland-Altman分析显示,95%一致性界限的范围较窄(在治疗组为-1.789~0.22 lg拷贝/mL,在未治疗组为-2.25~0.53 lg拷贝/mL);以RACE法为基准,Sansure法的偏差在治疗组为-0.78 lg拷贝/mL,在未治疗组为-0.86 lg拷贝/mL。两种方法线性回归后方程:Y(Sansure法)=0.9189X(RACE法)-0.3754。结论两种HBV RNA检测方法的相关性显著,一致性较好,可用线性回归方程互算;两种HBV RNA检测方法均可有效弥补血清HBV DNA检测对指导慢性乙型肝炎临床诊治方面的不足。

甜菜M14品系花期cDNA文库的构建及特异表达基因的筛选

构建了甜菜M14品系在花期的ZAP表达载体的cDNA文库,利用抑制消减杂交方法所获得的M14品系特异表达的2个EST片段为探针筛选cDNA文库,获得了M14品系特异表达cDNA片段Me-86和Me-84;进一步利用RACE技术获得了基因M14-86 cDNA片段的全长序列。生物信息学分析表明M14品系特异表达基因M14-86的cDNA片段与cDNA片段Me-84分别与大花马齿苋(Portulaca grandiflora)及瓶子草(Sarracenia purpurea)的26S核糖体RNA具有很高的同源性。

呼吸方法对大学生运动员800m、1000m成绩的影响

现阶段800m、1000m是我国中小学的体育达标项目,同时也是我国高校的体能测试项目,即作为国家学生体质测试标准将1000m(男生)与800m(女生)作为测试指标之一,1000m(男生)与800m(女生)测试在高校是必修课,学校将其作为国家学生体质测试标准的测试指标。在体育课的考核内容在多年的教学实践中发现,学生的参与少且抵触情绪大,使1000m(男生)与800m(女生)的测试对测试学生来说是一件很头疼的事情。本研究以聊城大学田径队甲组运动员为例,对大学生运动员800m、1000m跑呼吸方法的进行研究,为800、1000米跑提供科学的呼吸理论依据。

体育专业学生跨栏恐惧心理调查及训练对策

在跨栏跑教学与训练中必须重视运动员心理变化的研究,采用相应、合理的教学手段和训练方法,以适应和调节运动员的心理过程,这对提高教学质量、训练水平以及竞赛具有重要意义.

面孔加工的结构编码阶段异族效应的加工方式:ERPs研究

实验采用事件相关电位(ERPs)技术,以大学生为被试,运用非洲、欧洲、亚洲三个不同种族的面孔照片,探究异族效应与加工方式的关系。行为实验结果显示,被试对非洲面孔的反应时快于欧洲面孔,且两者均快于亚洲面孔。ERP研究结果显示,亚洲面孔的N170波幅显著小于非洲和欧洲面孔的波幅,后两者的N170波幅没有差异,而且亚洲面孔的倒置效应最大。研究结果说明相对于异族面孔,本族面孔更多地使用构型编码的加工方式,且N170成分表现出右半球优势。

基于简化Jones-Harris方法的球轴承接触角研究

作为球轴承重要的结构参数之一,接触角对轴承组件的载荷分布、运动关系、润滑、摩擦等都有重要的影响。将求解惯性力所涉及的变量耦合关系进行简化,提出了用于研究球轴承接触角特性的简化Jones-Harris方法(SJHM),通过预先给定内圈偏转角,克服了直接迭代法难以考虑内圈偏转角对接触角影响规律的不足。以b218轴承为对象,验证了SJHM方法的有效性;在此基础上,分析了多种因素对接触角的影响规律。研究结果表明:相比陀螺力矩的影响,离心力对内、外接触角的影响更加显著;接触角对轴承内圈偏转角的变化非常敏感,内圈偏转角会使同一个滚动体的内、外接触角同时增大或减小。

对中外优秀中长跑运动员战术谋略的研究

本交通过对中外优秀中长跑运动员比赛战术谋略的比较研究，探讨了中长跑运动员战术谋略的过程、运用方法和运用原则。

试论跆拳道运动员的判断能力及训练方法

跆拳道中有着极深的内涵和丰富的哲理,反应在内在的形式则表现为运动员的判断能力。本文通过对跆拳道运动员判断能力的概述,指出了影响判断能力的主要因素:时机、思维和反应、竞技意识、时空感以及培养跆拳道运动员判断能力的训练方法.