RAD18基因敲除增强肺腺癌细胞对顺铂的敏感性

目的:研究敲除E3泛素连接酶RAD18基因后,人肺腺癌A549细胞株和顺铂耐药A549(A549/DDP)细胞株FA/BRCA途径DNA修复功能的变化及其对顺铂敏感性的改变。方法:合成针对RAD18基因的siRNA(RAD18-siRNA),通过脂质体将其分别转染人A549和A549/DDP细胞株。蛋白质印迹法检测经顺铂处理的两种细胞株转染siRNA前后RAD18蛋白表达及FANCD2单泛素化水平;CCK-8法测定经顺铂处理的两种细胞株转染siRNA前后细胞增殖率的变化;免疫荧光测定胞核内FANCD2核聚小体的形成;Annexin V/PI流式细胞术测定转染前后细胞凋亡率。结果:与转染RAD18-siRNA前相比,转染后经顺铂处理的A549和A549/DDP细胞株RAD18表达均明显降低;FANCD2蛋白单泛素化水平下调和核聚小体形成减少;同时细胞增殖率明显降低,细胞凋亡率则明显增加。结论:应用RNA干扰技术敲除RAD18基因可通过抑制A549和A549/DDP细胞株FA/BRCA途径的DNA损伤修复功能,增加这两种细胞株对顺铂的敏感性。

RAD18基因rs373572位点多态性与结直肠癌的相关性研究

背景：RAD18是一种单链DNA结合蛋白,在维持受损DNA的完整性和细胞基因组稳定等方面起有重要作用。目的：研究RAD18基因单核苷酸多态性（SNPs）位点Arg302Gln（rs373572）与结直肠癌易感性及其临床病理特征的关系。方法：提取109例结直肠癌患者和241名健康对照者的外周血基因组DNA,采用PCR测序法对RAD18基因rs373572位点进行基因分型。结果：结直肠癌组与对照组间RAD18基因rs373572位点GG、GA、AA基因型分布差异有统计学意义（P〈0.05）,结直肠癌组AA基因型频率显著高于对照组（16.5%对8.7%,P〈0.05;校正后OR=2.428,95%CI：1.170-5.035）,有远处转移的结直肠癌患者GA基因型频率显著高于无远处转移者（75.0%对41.9%,P〈0.05;校正后OR=7.764,95%CI：0.927-65.206）。rs373572位点多态性与结直肠癌分化程度、肿瘤部位、Duke分期、淋巴结转移均无相关性（P〉0.05）。结论：RAD18基因rs373572位点AA基因型可能是结直肠癌的遗传易感因素,且该位点多态性与结直肠癌的远处转移有关。