紫外线照射对DNA修复基因RAD24转录的影响

目的：紫外损伤对ＤＮＡ修复基因ＲＡＤ２４转录的影响。方法：以酿酒酵母ＨＹ６８４为实验对象，用波长２５４ｎｍ紫外线分别在０、３７、５０和７０Ｊ／ｍ２等强度下照射不同时间，提取总ＲＮＡ，应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法检测ＲＡＤ２４基因转录水平的变化。结果：３７Ｊ／ｍ２及５０Ｊ／ｍ２分别照射２０～１２０ｍｉｎ明显提高ＲＡＤ２４基因转录水平。结论：低剂量紫外线照射可提高ＲＡＤ２４基因转录水平，该基因的表达具有损伤诱导性。

啤酒酵母DNA修复基因RAD24温度敏感突变株的分离及其特性的初步研究

以ＹＣｐｌａｃ系列带Ｔｒｐ、Ｈｉｓ和Ｕｒａ标志基因的载体为骨架构建含野生型和经羟胺处理的突变型的啤酒酵母ＲＡＤ２４基因质粒，用质粒替换方法分离ＲＡＤ２４基因温度敏感突变株（ｒａｄ２４－ｔｓ３）．紫外生存试验发现，ｒａｄ２４－ｔｓ３对紫外线敏感；同位素（３Ｈ－ＴｄＲ，３Ｈ－ＵＲ，３Ｈ－Ｌｅｕ）参入试验表明，该突变株ＤＮＡ、ＲＮＡ及蛋白质合成均较野生型明显降低．

紫外照射对DNA修复基因RAD24转录的影响

以酿酒酵母HY684为实验对象,用波长254nm紫外线分别在0,37,50和70J/m^2等强度下照射不同时间,提取总RNA,应用North-ern杂交方法检测RAD24基因转录水平的变化。结果显示37J/m^2、50J/m^2照射20分钟到120分钟明显提高RAD24基因转录水平,70J/m^2照射时,则恢复至正常水平,这说明低剂量紫外线照射可提高RAD24基因转录水平,该基因的表达具有损伤诱导性。

DNA修复基因RAD_（24）的分子克隆和序列分析

利用缺口修复（ｇａｐｒｅｐａｉｒ）方法克隆啤酒酵母（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）野生型ＲＡＤ_（２４）基因，并将其亚克隆到Ｍ１３ｍｐ１８和Ｍ１３ｍｐ１９，用双脱氧末端终止法对该基因的两条链均进行了序列测定。ＤＮＡＳｔｒｉｄｅｒ程序分析显示该基因编码２６８个氨基酸的蛋白质；基因缺失试验表明，该基因为细胞生存所必需。