HPLC法测定丹参及其炮制品中5种成分的含量

目的建立丹参及酒丹参中二氢丹参酮Ⅰ、四氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA、丹参新酮5种丹参酮类成分含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定丹参和酒丹参中二氢丹参酮Ⅰ、四氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA、丹参新酮含量。色谱柱为Phenomenex Luna-C 18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,流动相为乙腈-0.01%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为270 nm。丹参和酒丹参供试品采用甲醇超声提取。结果二氢丹参酮Ⅰ、四氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA、丹参新酮分别在0.6625~66.25μg/ml,0.5236~52.36μg/ml,3.1208~312.08μg/ml,1.9663~196.63μg/ml,0.1252~12.52μg/ml范围内质量浓度与峰面积呈良好线性关系,回归方程分别为Y=63.57X-15.52,Y=61.84 X+11.35,Y=285.83X+119.38,Y=163.36X-181.42,Y=18.53X+2.54。精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合分析要求。3个批次的丹参中二氢丹参酮Ⅰ、四氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA、丹参新酮的平均含量均高于酒丹参中含量。结论建立的HPLC方法快速准确、操作简便、专属性好、灵敏度高,可为丹参及其酒炙品的质量评价提供依据。

山东丹参饮片产地加工方法与质量分析

目的 :探讨丹参产地加工饮片的方法并考察其质量。方法 :丹参酮ⅡA 作为丹参的指标成分 ,考察丹参在晒干、烘干和风干情况下的含量变化。结果 :较好的方法是首先先晒干减少 2 0 %～ 30 %水份 ,然后风干减少 4 0 %～ 5 0 %水份最后烘干至含水量 8%。结论 :本加工法能保证质量、节省工时、提高饮片疗效。

丹参制剂的研究现状及对其开发的几点思考

总结丹参药材中两类有效部位——脂溶性丹参酮类和水溶性丹参酚酸类的药理作用 ;分析丹参制剂的工艺现状 ,归纳现有丹参制剂存在的局限性 ;提出运用新辅料、新工艺解决丹参制剂局限性的思路 ,为开发新制剂 。

丹参制剂的研究进展

目的:为深入研究丹参制剂及研发新剂型提供参考。方法:从丹参的制剂品种入手,分析丹参制剂工艺及现有工艺中存在的问题,阐述控制丹参制剂质量的思路与方法。结果与结论:以临床疗效为最终判定指标,对制剂生产过程进行控制,最终实现安全、有效、稳定、可控的目标,促进丹参制剂的发展。

高效液相法测定9种丹参制剂中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A

目的测定9种丹参制剂中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(5μm,4.6mm×150 mm)色谱柱;20 mmol/L乙酸铵-乙腈(30∶70,v/v)为流动相,体积流量为1.0 mL/min;紫外检测波长为270 nm。结果三者在0.01～3.00μg/mL质量浓度内线性范围良好,隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA3种化合物的日内精密度RSD<15%,准确度为85%～115%。结论建立的测定丹参制剂中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的方法符合化学样品测定要求,能准确测定样品中目标物。

冷浸法提取丹参脂溶性部位工艺研究

【目的】探讨冷浸法提取丹参脂溶性部位的最佳工艺条件。【方法】采用高效液相色谱(HPLC)法为测定方法,以丹参酮ⅡA提取量为指标,考察不同浓度乙醇和粉碎对丹参酮ⅡA提取率的影响,并用正交试验法进一步优选提取条件。【结果】最佳提取工艺条件为采用8倍量体积分数95%乙醇冷浸提取2次(每次3 h),在这种条件下,可获得较高的丹参酮ⅡA提取率。【结论】此工艺条件简单、稳定,提取率高。

丹参及丹参制剂中水溶性酚酸总量的测定

目的:研究建立丹参及丹参制剂中水溶性酚酸总量的测定方法,以控制内在质量。方法:在1 mol／L的冰醋酸溶剂中,利用丹参中水溶性酚酸类成分与铁氰化钾-三氯化铁的显色反应,比色法测定丹参及其制剂中水溶性酚酸(以原儿茶醛计)的总量。结果:原儿茶醛在0．4448～ 2．002μg／ml范围内呈良好的线性关系,回归方程为:A=0．05237C+0．07654(r=0．9998),加样平均回收率为100．0％,相对标准偏差(RSD)为0．93％。结论:该法简便快速,结果准确,重现性好, 可用于丹参及其制剂的质量控制。

邱志楠治疗咳喘用药经验

慢性咳喘患者,病机以肺肾两虚为本,治疗应以扶正固本、温补肾阳为要,邱教授临证常用紫河车、淫羊藿,对于肾阳虚损的久咳顽喘患者,邱教授常加入熟附子;慢性咳喘病人病久入络,络脉不通,邱教授使用虫类药物止咳平喘,且认为虫类药物有抗过敏的作用;久咳顽喘患者,日久肺气上逆,邱教授常用酸枣仁、仙鹤草配伍使用,取其酸收之性;慢性咳喘病痰瘀互结证,邱教授常使用青天葵;对于久咳顽喘有瘀血之象的病人,邱教授常使用五味子、丹参药对。邱教授使用中医药治疗咳喘病具有个人的用药特色,在熟读古典医籍以及谙熟前人的相关经验基础上,借鉴现代中药药理学的研究结果,并验之于临床,遵古而不泥古。

丹参炮制前后特征图谱比较研究

目的采用HPLC法研究山东产丹参炮制前后指纹图谱变化,为科学评价及有效控制其质量提供可靠依据。方法以80%甲醇为提取溶剂,采用超声方法提取制备供试样品。以Hanbon C18色谱柱为固定相,乙腈:0.1%甲酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为280 nm,进样量20μL,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进行HPLC指纹图谱检测,分析比较丹参炮制前后的指纹图谱。结果丹参经炮制后,指纹图谱中主要色谱峰发生了显著改变,与炮制前相比峰面积显著降低。表明丹参经炮制处理后,主要化学成分含量明显减少,炮制品共确定了12个共有峰。结论本研究结果建立了一种重现性、精密性良好的HPLC特征图谱检测方法,可用于丹参及其炮制品的质量控制。

基于“有效成分—性状”的关联分析评价丹参品质的研究

"辨状论质"是中药传统鉴定的核心和精髓,现行大多数中药材商品规格标准建立在此基础之上,但其科学内涵有待深入研究与探索。本研究以常用中药材丹参为对象,采用表型组技术,通过丹参根系形态特征的高通量数字化采集及建模,对根系形态特征参数进行系统评价,并构建关键形态特征与活性成分的关联性。发现具有品质指征作用的关键性状特征参数:最大直径、色度值、形成层外内比例,进一步通过拟合丹参品质评价模型验证上述性状特征的品质指征作用,为进一步认知丹参品质内涵提供理论基础。

基于Meta分析的舒血宁注射液对比丹参类注射液治疗冠心病心绞痛临床评价研究

目的:采用Meta分析方法评价舒血宁注射液对比丹参类注射液治疗冠心病心绞痛的有效性及安全性。方法:计算机检索the Cochrane Library、PubMed、Embase、SinoMed、中国知网、维普期刊数据库和万方数据库有关舒血宁注射液对比丹参类注射液治疗冠心病心绞痛的随机对照试验(RCTs),检索时限为各数据库建库至2017年3月。采用Cochrane风险评价表评价纳入研究的偏倚风险,提取资料通过RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入11个RCTs,累计1 057名患者。Meta分析结果显示,与丹参类注射液治疗相比,舒血宁注射液治疗冠心病心绞痛可提高心绞痛总有效率(RR=1.21,95%CI:1.14~1.28,P<0.01)和心电图总有效率(RR=1.33,95%CI:1.19~1.49,P<0.01),改善血液流变学指标和血脂指标。有3篇文献明确无不良反应,3篇文献报道了共7例不良反应,其他文献均未对安全性做出说明,无严重不良反应。结论:现有证据表明,舒血宁注射液治疗冠心病心绞痛在心绞痛总有效率、心电图总有效率、血液流变学及血脂指标改善等方面比丹参类注射液的疗效好。但基于现有RCTs的缺陷,所获得的支持证据强度有待提高,尚需要更多设计严谨、随访时间更长的临床研究予以证实。

重症肺炎患儿的血液流变学及复方丹参的影响

目的 :研究重症肺炎患儿血液流变学的变化及探索抗凝改善微循环的方法。方法 :设对照组 (轻症肺炎 ) 5 0例 ,观察组 (重症肺炎 ) 15 0例 ,采用北京利普生LBT N6A型锥板式粘度仪测定。观察组又分为复方丹参治疗组和未用复方丹参治疗组 ,观察其治疗效果。结果 :观察组血粘度明显高于对照组 (P <0 0 1) ,复方丹参治疗组恢复期明显低于未治疗组 (P <0 0 1)。结论 :肺炎患儿急性期均有血粘度的增高 ,重症者更明显 ,给予复方丹参液后 ,能抗凝、降低血粘度、改善微循环、缩短疗程。

心可舒系列制剂UPLC特征图谱的研究

目的:建立心可舒系列制剂的UPLC特征图谱,为全面评价其内在质量提供参考。方法:采用Thermo Syncronis C_(18)(2.1mm×150 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流量为0.3 m L·min^(-1);柱温30℃;检测波长287nm。结果:心可舒系列制剂特征图谱共有12个特征峰,采用对照品及质谱信息推断,指认了10个特征峰;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版本)》对特征图谱进行相似度分析,以特征峰峰面积为变量,采用SIMCA-P软件进行主成分分析,很好地区分了各剂型与各企业产品。结论:建立的特征图谱专属性强,重现性好,可用于心可舒系列制剂的质量评价。

丹参及其制剂治疗冠心病的药理及机制研究新进展

传统中药丹参及其制剂在临床应用范围广泛,对于冠心病(coronary heart disease,CHD)有良好疗效,其脂溶性成分丹参酮ⅡA具有抗动脉粥样硬化、抗心肌缺血、抗心肌纤维化和抑制心肌肥厚等作用,通过作用于Toll样受体/核转录因子-κB(toll like receptor 4/nuclear transcription factor-κB,TLR/NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/NF-κB、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3 K/AKT)、雷帕霉素靶蛋白/内皮型一氧化氮合酶(mammalian target of rapamycin/endothelial nitric oxide synthase,mTOR/eNOS)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad2/3、应激激活蛋白激酶(stressac-tivated pro-tein kinase,SAPK)/MAPK、胞外信号调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)/核转录因子红细胞系2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)、胱抑素C/Wnt(cystatin C/Wnt,Cys-C/Wnt)等信号转导通路发挥效应;隐丹参酮通过抑制炎性介质预防早期冠脉粥样硬化。水溶性成分丹酚酸A通过调节PI3 K/Akt、丝氨酸/苏氨酸激酶(serine/threonine kinase,GSK-3β)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和ERK1/2等通路抑制心肌细胞凋亡,降低炎症水平,改善心肌梗死;丹酚酸B通过抑制TLR4和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性体表达减轻心肌损伤;丹参素通过抑制Janus酪氨酸蛋白激酶(janus tyrosine protein kinase,JAK)/信号转导及转录激活因子(signal transduction and transcriptional activator,STAT)信号通路改善微循环、抗炎抗氧化、抗内皮损伤和抗血小板聚集。丹参水溶性成分制剂的主要靶点有前列腺素-内过氧化物合酶(prostaglandin-endoperoxidase synthase 2,PTGS2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP9)、MAPKs、TLR4、JUN、STAT3、TLR/NF-κB、PI3 K/Akt、JAK2/STAT3和Nrf2/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)等,具有抗炎、改善血液流变性、保护血管内皮、抗血小板聚集等药理作用;复方丹参滴丸具有扩张冠脉、减少心肌耗氧、增加冠脉流量、增强心肌收缩等作用,还具备用量小、不良反应少,对胃肠刺激小等优点;冠心宁片治疗CHD的靶点包括核受体共激活因子2(nuclear receptor coactivator 2,NCOA2)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)等,主要调控PI3 K/Akt、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、低氧诱导因子-1(hypoxic inducible factor-1,HIF-1)等通路;新加丹参饮具有扩张冠脉、增加血流量、改善微循环等作用;冠心丹参方的主要药理活性在于增加冠脉血流量,降低心肌耗氧,从而改善心肌缺血,提高心功能。

HPLC-TOF/MS分析丹参酒炙前后化学成分的变化

目的：采用高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术（HPLC-TOF/MS）分析丹参酒炙前后主要化学成分的变化,为揭示丹参炮制原理及制定丹参饮片的质量标准提供参考。方法：HPLC分离采用Halo C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,2.7μm）,流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0-3 min,0%-10%A;3-8 min,10%-40%A;8-25 min,40%-70%A;25-36 min,70%-100%A）,流速0.25 m L·min^-1;质谱定性采用飞行时间质谱,ESI离子源,正离子模式下扫描,采用对照品定位、质谱数据、数据库匹配和文献参照对各离子峰进行归属,通过丹参酒炙前后离子峰数目和峰面积的比较,研究其化学成分变化。结果：生丹参和酒丹参中分别推测出中16,14种化合物。丹参酒炙后,紫草酸或丹酚酸H,丹参酮ⅡB色谱峰消失,隐丹参酮、丹参新醌乙、丹参酮ⅡA和丹参新酮的峰面积显著降低,二氢丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅰ的峰面积增加。结论：丹参酒炙后化学成分的种类和含量变化显著,部分丹参酮类和丹酚酸类成分产生质变或量变,推测丹参酒炙后活血祛瘀作用增强与所含成分转化成体内更易吸收的活性成分有关。

丹参类注射剂中主要成分含量的比较分析

目的:测定目前常见丹参类注射剂品种中主要化学成分的含量并比较其差异。方法:采用超高效液相色谱(UPLC)法同时测定8个厂家生产的6种丹参类注射剂(丹参注射液、注射用丹参(冻干)、注射用丹参多酚酸盐、香丹注射液、丹红注射液、丹香冠心注射液)中6种主要化学成分(丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B和丹酚酸A)的含量;比较其主要化学成分的差异。结果:不同品种丹参类注射剂的成分种类及含量差异很大;不同厂家生产的同一类丹参类注射剂化学成分含量差异很大。结论:本方法准确、快速,可用于丹参类注射剂中上述6种成分的含量测定;各种丹参类注射剂化学成分含量差异显著,临床应用时各品种不能随意替换;部分丹参类注射剂品种的生产工艺和质量标准亟待提高。

HPLC、UPLC测定芪参益气滴丸中5个丹参活性成分含量的比较研究

目的:建立同时测定芪参益气滴丸中5个丹参活性成分(丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A)含量的高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱(UPLC)方法,并对建立的方法进行比较。方法:HPLC方法色谱柱为Agilent Zorbax SBC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),UPLC方法色谱柱为Waters Acquity BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相均为乙腈-甲酸-水体系梯度洗脱,2种方法的流速分别为1.0和0.4 mL.min-1,检测波长均为280 nm,柱温均为30℃。比较2种方法的分离情况及线性、精密度、重复性、加样回收率、样品测定结果。结果:UPLC的分析时间少于HPLC;5个物质在一定范围内均呈现良好线性,r均大于0.9998;2种方法的精密度、重复性、加样回收率和样品测定结果无显著性差异。结论:HPLC和UPLC 2种方法准确性、重复性均较好;UPLC分析比HPLC具有更加快速、高效的优势。

2010年版《中国药典》一部含丹参制剂的提取工艺分析

将《中国药典》2010年版一部收录的含丹参成方制剂的提取方法分为水煎煮法、乙醇加热回流法、乙醇-水提取法三大类,通过列表分类进行工艺分析,揭示存在提取溶剂选择不当、提取时间过长、提取温度过高、提取次数过多等问题,不利于丹参制剂的产业化生产。选取一种高效低耗并适合产业化生产的丹参提取方法具有重要意义,同时为丹参制剂的工艺改进提供参考。

丹参、川芎嗪复方制剂对老年性痴呆模型大鼠红细胞及脑组织SOD、MDA的影响研究

目的:研究丹参、川芎嗪复方制剂(DCs)对老年性痴呆(AD)模型大鼠红细胞及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。方法:以AlCl3和D-半乳糖复制AD大鼠模型,以脑复康作阳性对照,观察DCs对AD模型大鼠红细胞及脑组织SOD、MDA的影响。结果:DCs组大鼠红细胞及脑组织中SOD活性显著高于AD模型组(P<0.05或P<0.01);MDA含量显著低于AD模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:DCs能有效提高AD模型大鼠红细胞及脑组织SOD的活性,降低MDA含量。

一测多评HPLC法测定丹参注射液中7个水溶性成分含量

目的:建立以原儿茶醛为内参物,同时测定丹参注射液中7个水溶性成分(丹参素钠、原儿茶酸、原儿茶醛、香草酸、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B)的一测多评HPLC法,并进行方法学考察。方法:以丹参注射液为研究对象,以原儿茶醛为内参物,确定丹参素钠、原儿茶酸、香草酸、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B相对于原儿茶醛的校正因子。采用外标法测定丹参注射液中原儿茶醛的含量,通过相对校正因子对其他6个成分进行定量,并比较该方法与外标法测定结果的差异。结果:各成分相对校正因子重现性良好。丹参素钠、原儿茶酸、香草酸、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B按一测多评方法与外标法测定结果无显著差异。结论:本方法简便,测定结果准确,可为全面控制丹参注射液内在质量提供参考。