Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路在2型糖尿病大鼠局灶性脑缺血早期作用的研究

目的探讨高血糖加重脑梗死机制与Ras/Raf/丝裂原激活蛋白激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号传导通路的关系。方法通过大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)及大脑中动脉闭塞(MCAO)术造成大鼠糖尿病脑缺血模型。将大鼠分成假手术组、健康大鼠脑缺血组、2型糖尿病(T2DM)大鼠脑缺血组、PD98059组,每组12只。PD98059组于MCAO术前30min尾静脉注射PD98059(3mL/kg)。MCAO术后2h给各组大鼠做神经学评分,取脑组织标本。应用免疫组织化学、蛋白质印迹法(Western blotting)测定大鼠磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达,应用TUNEL检测神经细胞凋亡情况。结果除假手术组外,其他3组均有不同程度的神经功能缺损、神经细胞凋亡,且差异有统计学意义(P<0.01)。p-ERK1/2蛋白在假手术组偶见表达,在健康大鼠脑缺血组、T2DM大鼠脑缺血组表达明显升高(P<0.01),且T2DM大鼠脑缺血组升高更加明显(P<0.01)。PD98059组p-ERK1/2蛋白表达较少。免疫组织化学和Western blotting结果基本一致。结论 Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路在局灶性脑缺血早期能促进神经细胞的凋亡,糖尿病加重脑梗死与Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路有关。

Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路在阿尔茨海默病中作用的初步研究

目的:探索Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)中的作用。方法:以7例AD患者、7例帕金森痴呆患者和4例健康老年人为对象,进行离体细胞培养、蛋白质印迹分析研究,探讨HOE140诱导人皮肤成纤维细胞分化的可能作用机制。结果:阿尔茨海默病患者组ERK蛋白质印迹条带深于帕金森痴呆患者组及健康老年人组,阿尔茨海默病患者组ERK水平为130.21±14.53,帕金森痴呆患者为109.46±13.92,健康老年人组为107.84±12.89,结果分析显示,阿尔茨海默病患者组ERK水平与帕金森痴呆患者组及健康老年人组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而帕金森痴呆患者组与健康老年人组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Ras/Raf/MEK/ERK传导通路在AD的发生中起重要作用,为AD的早期诊断和选择治疗靶点奠定理论基础并提供科学依据。

基于Raf/MEK/ERK信号通路探讨内异康复片对hEM15A细胞的影响

目的探讨内异康复片对子宫内膜异位症(EMT)内膜间质细胞hEM15A的影响。方法制备内异康复片含药血清,将hEM15A细胞分为空白对照组,阴性对照组,5%、10%、20%含药血清组。采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞迁移,Western blo法检测RKIP及Raf/MEK/ERK通路相关蛋白表达。再将hEM15A细胞分为阴性对照组、10%含药血清组、si-RKIP-1组、si-RKIP-1+10%含药血清组,观察上述检测指标的变化。结果与阴性对照组比较,各浓度含药血清组hEM15A细胞活性降低(P<0.05),凋亡率、RKIP蛋白表达升高(P<0.05);10%及20%含药血清组hEM15A细胞迁移数、p-MEK及p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05),p-Raf蛋白表达降低(P<0.05)。与阴性对照组比较,si-RKIP-1组hEM15A细胞活性、迁移数升高(P<0.05),RKIP蛋白表达降低(P<0.05),p-Raf、p-ERK1/2、p-MEK蛋白表达升高(P<0.05);与10%含药血清组比较,si-RKIP-1+10%含药血清组hEM15A细胞活性、迁移数升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05),RKIP蛋白表达降低(P<0.05),p-Raf、p-MEK、p-ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05)。结论内异康复片可能通过调节RKIP及其介导的Raf/MEK/ERK信号通路抑制hEM15A细胞活性和迁移,促进ESC凋亡,发挥改善EMT的作用。

中医药靶向干预RaF/MEK/ERK信号通路治疗肝细胞癌的研究进展

肝细胞癌(HCC)是一种高度恶性肿瘤,具有特殊的多元难治性分子生物学机制。肝细胞癌的病理表现与病变细胞的分化程度有关,因此抑制肝癌细胞的分化、增殖是治疗该病的重要手段。中医药可以通过调控体内蛋白激酶(RaF)、丝原活化蛋白激酶(MEK)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)及精准干预RaF/MEK/ERK通路来影响肝癌的发生进展,从而发挥治疗HCC的作用。该文主要针对RaF/MEK/ERK信号通路调控HCC发生发展的机制,以及中药单体及复方靶向干预RaF/MEK/ERK信号通路进行综述。

连翘脂素调节Ras/Raf/MEK/ERK信号通路对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 探究连翘脂素(PG)对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及上皮间质转化的影响及机制。方法 培养HCT116结直肠癌细胞,采用10~200μmol/L的连翘脂素处理细胞,检测细胞存活率,筛选最佳实验浓度。将细胞分为对照组(Control组),连翘脂素低、中、高浓度组(PG-L组、PG-M组、PG-H组),连翘脂素高浓度+转染慢病毒阴性对照组(PG-H+NC组),连翘脂素高浓度+Ras慢病毒组(PG-H+Ras组)。平板克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室法检测细胞侵袭;流式细胞术以及Hoechst33258染色法检测细胞凋亡;Western blot法检测上皮间质转化(EMT)标志蛋白E型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)以及信号通路相关蛋白p-Raf、p-MEK、p-ERK表达;建立荷瘤小鼠模型评价连翘脂素对结直肠癌肿瘤生长的影响。结果 10~200μmol/L的连翘脂素处理HCT116结直肠癌细胞,可以显著抑制细胞存活率,经计算IC50值为(140.4±2.147)μmol/L,选择10、50、100μmol/L连翘脂素进行后续实验;与Control组比较,PG-L组、PG-M组、PG-H组HCT116细胞克隆形成率、划痕愈合率、细胞侵袭个数以及Vimentin、p-Raf、p-MEK、p-ERK表达显著降低,细胞凋亡率以及E-cadherin表达显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与PG-H+NC组比较,PG-H+Ras组HCT116细胞克隆形成率、划痕愈合率、细胞侵袭个数以及Vimentin、p-Raf、p-MEK、p-ERK表达显著升高,细胞凋亡率以及E-cadherin表达显著降低(P<0.05);连翘脂素可以显著抑制结直肠癌移植瘤的生长。结论 连翘脂素可以抑制结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及上皮间质转化,其作用机制可能与抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路激活有关。

Ras/Raf/MEK/ERK信号通路参与自噬调控作用的研究进展

自噬是机体保守的自我防御机制,是将细胞内变形坏死的细胞器和多余蛋白降解为小分子,以供循环利用。自噬在生理和病理状态下均发挥重要作用,可通过多条信号通路影响胞内物质的表达。目前已知Ras/Raf/MEK/ERK信号通路不仅广泛参与调控细胞生长、增殖、分化、凋亡等多个生理病理过程,并且参与调控自噬,并具有促进肿瘤细胞发生自噬性死亡的作用,但是其具体参与调控自噬的作用机制尚未完全阐明。本文就Ras/Raf/MEK/ERK信号通路参与调控自噬的作用的研究进展进行详细阐述,以期为研究Ras/Raf/MEK/ERK信号通路调控自噬的作用机制提供参考。

结直肠癌中MEK2/ERK信号传导通路的研究

目的 研究丝裂原激活化蛋白激酶 (MAPK )中MEK2 /ERK信号传导通路在结直肠癌发生发展中的作用。方法 ( 1)采用Westernblot检测 5 2例结直肠癌组织及其邻近肠黏膜中MEK 2蛋白的表达。 ( 2 )用丝裂原细胞外激酶 (MEK )抑制剂作用于结肠癌细胞系SW 480 ,然后以MTT法检测细胞增殖状态 ;用Westernblot检测MEK2 ,p ERK及其靶基因产物C myc的表达。结果 结直肠癌组织中MEK2蛋白表达水平明显高于邻近的肠黏膜 (P <0 .0 5 ) ,且与肿瘤的分化、Dukes分期及淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。应用MEK的抑制剂后SW 480细胞中MEK2 ,p ERK ,C myc表达水平随作用时间延长而下降。结论 MEK2活性增高与结直肠癌细胞侵袭力有关 ,阻断MEK2 /ERK信号传导通路可以抑制结肠癌细胞的增殖 ,促进其凋亡。

基于Raf/MEK/ERK信号通路探讨黄芪建中汤治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡的作用机制

目的探讨黄芪建中汤通过Raf/MEK/ERK信号通路治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡(DU)的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、埃索美拉唑组(4.17 mg·kg^(-1))以及黄芪建中汤高、低剂量组(18.54、9.27 g·kg^(-1))。采用“苦寒泻下+劳倦过度”法联合阿司匹林、无水乙醇构建脾胃虚寒型DU大鼠模型。灌胃给药,每天1次,连续4 d。观察大鼠十二指肠黏膜损伤情况并计算溃疡指数和治疗指数;采用HE染色法观察十二指肠黏膜组织病理形态学改变;采用酶联免疫吸附试验检测十二指肠组织中前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫荧光法检测十二指肠黏膜磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Raf)、磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶激酶1/2(p-MEK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶1(p-ERK1)蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠的十二指肠溃疡指数显著升高(P<0.01);小肠绒毛脱落,隐窝脓肿,小肠绒毛长度和隐窝深度均显著降低(P<0.01);肠黏膜PGE2、IL-10含量均明显降低(P<0.01),TNF-α含量显著增加(P<0.01);肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2和p-ERK1蛋白表达量均明显增加(P<0.01)。与模型组比较,黄芪建中汤各剂量组的大鼠十二指肠溃疡指数均明显降低(P<0.01);肠黏膜损伤得到明显改善,黏膜形态趋于完整,小肠绒毛长度和隐窝深度均明显增加(P<0.01);肠黏膜PGE2和IL-10含量均明显提高(P<0.01),TNF-α含量显著降低(P<0.01);肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2和p-ERK1蛋白表达均显著下调(P<0.01)。结论黄芪建中汤对脾胃虚寒型DU大鼠具有治疗作用,其机制可能与调控PGE2、TNF-α、IL-10等炎症介质水平,抑制Raf/MEK/ERK信号通路活化有关。

清肝化瘀方含药血清对TGFα诱导SMMC-7721细胞Raf-MEK-ERK信号传导的影响

目的:观察清肝化瘀方含药血清对TGFα诱导人肝癌细胞, 对Raf-MEK-ERK信号传导的影响. 方法:采用血清药理学方法,以病理鼠血清作对照,用Western免疫印迹方法检测清肝化瘀方含药血清对Raf、MEK、ERK蛋白表达影响,RT-PCR方法检测清肝化瘀方含药血清对MEK1mRNA表达影响. 结果:清肝化瘀方含药血清能抑制Raf、MEK、ERK蛋白的表达,但以抑制MEK蛋白为主(P<0.05),能抑制MEK1 mRNA的表达(p<0.05). 结论:清肝化瘀方含药血清能够抑制TGFa诱导的人肝癌细胞增生,阻断TGFa在细胞内的信号传导.

复心合剂对心衰大鼠信号通路Raf-MEK-ERK的影响

目的:初步探索复心合剂对信号通路Raf-MEK-ERK的影响。方法:75只Wistar雄性大鼠,随机分为5组,对照组、卡托普利组、复心合剂低剂量组、复心合剂高剂量组均为15只。实验过程中阿霉素干预4周后测定大鼠心功能;6周后应用Western blot法检测大鼠心肌组织中Raf、MEK、ERK蛋白表达情况。结果:(1)与正常对照组比较,模型组大鼠BNP值显著升高(P<0.01),心衰模型成功建立。(2)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织Raf水平显著升高(P<0.01),复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织Raf水平显著降低(P<0.01),与卡托普利组相比,复心汤高剂量组大鼠心肌组织Raf无统计学意义(P>0.05)。(3)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织MEK水平显著升高(P<0.01),复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织MEK水平显著降低(P<0.01)。(4)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌ERK蛋白表达明显升高(P<0.01),卡托普利组及复心合剂高剂量组ERK蛋白表达无显著差异性(P>0.05),与模型组相比,复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织ERK水平显著降低(P<0.01)。结论:复心合剂对心衰大鼠信号通路Raf-MEK-ERK的蛋白激活具有一定的抑制作用,延缓心衰进程。

异槲皮苷对HepG2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用

目的研究异槲皮苷对Hep G2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用。方法采用异槲皮苷(0、40、80、160、320μmol·L^(-1))作用于Hep G2细胞,MTT法检测异槲皮苷对Hep G2细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察24、48 h后,细胞形态及生长情况;流式细胞术检测异槲皮苷(0、40、80、160μmol·L^(-1))作用Hep G2细胞48 h后细胞周期情况;荧光定量PCR及Western blot检测异槲皮苷作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及相关蛋白的表达。结果MTT检测发现异槲皮苷对Hep G2细胞生长有明显抑制作用,且与异槲皮苷的浓度及作用时间呈正相关;不同浓度的异槲皮苷作用Hep G2细胞24、48 h后,倒置显微镜下观察发现随着浓度的增高及作用时间的延长,细胞生存数量逐渐减少,且细胞形态发生明显变化;流式细胞术检测发现随着异槲皮苷浓度的增高,细胞被阻滞在G1期的数量逐渐增加;荧光定量PCR及Western blot结果均表明,与空白组相比,异槲皮苷(80μmol·L^(-1))作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及其相关蛋白的表达均明显降低(P<0.05),差异有统计学意义。结论异槲皮苷有诱导Hep G2细胞凋亡的作用,其作用机制可能与对Raf/MEK/ERK信号通路中相关因子的干预有关。

Ras/Raf/MEK/ERK信号通路与细胞命运的联系

细胞在接受特定的细胞外信号刺激后会产生相应的特异性生理应答。Ras／Raf／MEK／ERK信号级联通路是一条可被广泛激活的有丝分裂原活化蛋白激酶（mitogen—activated protein kinase，MAPK）通路，它能将细胞外信号传递入细胞核内，引起细胞内特异蛋白的表达谱变化，从而影响细胞命运。

雷公藤红素通过FAK/MEK/ERK信号通路对肝癌细胞耐药性的影响

目的探究雷公藤红素(CSL)对肝癌细胞耐药性的影响。方法采用仑伐替尼(Len)构建耐药人肝癌细胞Huh7/Len,分为对照组,CSL低、中、高浓度组(1、2.5、5μmol/L),CSL高浓度+Zn27[黏着斑激酶(FAK)激活剂]组(5μmol/L CSL+2 nmol/L Zn27),每组设置6个复孔。检测细胞增殖(以吸光度计)和克隆能力、凋亡率、侵袭数、迁移数,以及细胞中活性氧(ROS)水平和磷酸化FAK(p-FAK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶(p-MEK)、磷酸化胞外信号调节激酶(p-ERK)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达。结果与对照组比较,CSL低、中、高浓度组细胞的吸光度、克隆数、侵袭数、迁移数和p-FAK、p-MEK、p-ERK、Bcl-2蛋白相对表达量均显著降低,细胞凋亡率、ROS水平和Bax、caspase-3蛋白相对表达量均显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与CSL高浓度组比较,CSL高浓度+Zn27组细胞中上述指标变化均显著逆转(P<0.05)。结论CSL能增强氧化应激,促进细胞凋亡,抑制肝癌细胞恶性进展和化疗耐药性,其机制可能与抑制FAK/MEK/ERK信号通路有关。

miR-485-5p调控MEK/ERK信号通路对肝癌细胞增殖、侵袭和凋亡的机制研究

目的探讨miR-485-5p调控MEK/ERK信号通路对肝癌细胞增殖、侵袭和凋亡的机制研究。方法选择2021年1月-2022年12月在我院行根治性肝癌切除术的肝癌患者50例,切除肝癌组织及癌旁组织后迅速液氮冷冻,RT-PCR检测组织及细胞中miR-485-5p相对表达量。将肝癌Hep3B细胞随机分为miR-NC组、miR-485-5p组和miR-485-5p+ML099组。CCK-8检测肝癌细胞增殖能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,检测细胞中p-MEK、MEK、p-ERK、ERK蛋白表达(蛋白质印迹法)。结果与癌旁组织中miR-485-5p相对表达量(1.18±0.23)相比,肝癌组织(0.19±0.14)明显降低(P<0.01)。与人正常肝细胞株LO2 miR-485-5p相对表达量(1.26±0.23)相比,人肝癌细胞株Huh7(0.36±0.09)、Hep3B(0.17±0.06)和HepG2(0.31±0.07)明显降低(P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-485-5p组Hep3B细胞中miR-485-5p相对表达量(1.25±0.18)和细胞凋亡率(18.62%±2.11%)明显升高,细胞活力(24 h:0.23±0.03,48 h:0.39±0.06,72 h:0.57±0.08)、细胞侵袭数目(71.06±8.92)和细胞中p-MEK/MEK比值(0.31±0.04)、p-ERK/ERK比值(0.42±0.05)明显降低(P<0.01);和miR-485-5p组相比,miR-485-5p+ML099组Hep3B细胞中miR-485-5p相对表达量(0.31±0.08)和细胞凋亡率(5.18%±0.64%)明显降低,细胞活力(24 h:0.24±0.04,48 h:0.61±0.08,72 h:0.98±0.10)、细胞侵袭数目(164.11±17.18)和细胞中p-MEK/MEK比值(0.69±0.08)、p-ERK/ERK比值(0.89±0.10)明显升高(P<0.01)。结论miR-485-5p在肝癌中呈低表达,过表达miR-485-5p可能通过抑制MEK/ERK信号通路抑制肝癌细胞增殖和侵袭,并诱导肝癌细胞凋亡。

ERK1/2信号通路阻断剂PD98059对慢性高原病患者骨髓有核红细胞中Ras、BRaf、MEK、ERK1/2表达的影响

目的:探讨ERK1/2信号通路阻断剂PD98059对Ras、B型丝/苏氨酸蛋白激酶(BRaf)、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、细胞信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达的影响,以期为慢性高原病(chronic mountain sickness,CMS)的基础研究和临床治疗探讨新的途径。方法:选取CMS患者16例,取骨髓液分离单个核细胞,以CD71与CD235a抗体磁珠分选阳性细胞,将细胞分为5组:空白对照组、DMSO溶剂组及PD98059 5、10和20μmol/L组。在低氧条件下培养72 h,应用ELISA法测定培养骨髓有核红细胞上清液中Ras-GTP水平,RT-PCR法测定骨髓有核红细胞中BRaf、MEK、ERK1/2 mRNA的表达,Western blot方法检测骨髓有核红细胞中p-BRaf、p-MEK、pERK1/2蛋白表达。结果:PD98059对各组Ras-GTP的水平无明显影响(P=0.798)。溶剂组与空白对照组相比,BRaf、MEK mRNA的表达水平差异无统计学意义(P=0.826、P=0.298)。与PD98059 20 mol/L比较,其余4组ERK1/2 mRNA的表达水平差异有统计学意义(P=0.001、P=0.002)。溶剂组与空白对照组相比,p-BRaf、p-MEK蛋白的表达差异无统计学意义(P=0.370、P=0.351)。与PD98059 20 mol/L比较,其余4组p-ERK1/2蛋白水平差异有统计学意义(P<0.001、P<0.007)。结论:PD98059能下调骨髓有核红细胞ERK1/2 mRNA及p-ERK1/2蛋白的表达。Ras/Raf/MEK/ERK 1/2通路是调控CMS骨髓有核红细胞的主要信号传导途径,可能参与了慢性高原病的发病过程。

RAF/MEK/ERK信号通路在胰腺癌发生发展中的作用机制及其临床应用价值

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的激活在多种肿瘤发生发展过程中起着重要作用。在胰腺癌中,受体酪氨酸激酶的异常活化可以激活MAPK信号通路,在MAPK家族中,细胞外信号调节激酶(RAF/MEK/ERK)信号通路是其中最重要的信号通路,活化的RAF/MEK/ERK信号通路能够传递细胞外信号调节肿瘤的增殖、凋亡、侵袭转移和血管生成。因此,RAF/MEK/ERK信号通路被认为是胰腺癌治疗的潜在治疗靶点。该文重点综述了RAF/MEK/ERK信号通路的异常活化在胰腺癌发生发展中的生物学作用,靶向抑制剂的研发及其在临床应用中存在问题和挑战。

Ras/Raf/MEK/ERK信号通路与白血病

Ras/Raf/MEK/ERK信号通路对白血病的发生和发展具有不可忽视的作用。在该通路中关键信号元件的抑制剂的应用成为白血病治疗的新策略。近年来,对这些抑制剂的筛选和体内外研究成为治疗领域的热点,国内外已开展的体内外实验及早期临床研究,证实了这些抑制剂在白血病治疗中具有较好的效果及应用前景。本综述重点介绍Ras/Raf/MEK/ERK信号通路在白血病发生发展中的作用及其治疗方面的最新研究进展。

miR-27a-3p调控Ras/Raf/MEK/ERK信号通路抑制肾透明细胞癌细胞增殖的研究

目的探讨miR-27a-3p对肾透明细胞癌细胞Ras/Raf/MEK/ERK信号通路的作用,观察其对肾透明细胞癌细胞增殖的影响。方法使用脂质体试剂lipofectamine 2000将miR-27a-3p模拟物或miR-NC转染至肾透明细胞癌细胞株Caki-1和A-498;qRT-PCR和Western blot检测miR-27a-3p的靶基因KRAS及下游通路蛋白的表达;流式细胞仪检测细胞周期;噻唑蓝(MTT)检测细胞活力;集落形成实验检测细胞增殖能力。结果 KRAS基因和下游通路蛋白的表达降低;转染miR-27a-3p后的肾透明细胞癌细胞周期明显被抑制,G0/G1期的细胞比例上升(P<0.01);肾透明细胞癌细胞活力和增殖能力降低(P<0.05)。结论过表达miR-27a-3p在体外可以显著降低肾透明细胞癌细胞Ras/Raf/MEK/ERK蛋白的表达,进而显著抑制其增殖能力。

基于MEK/ERK信号通路探究丹参酮ⅡA磺酸钠对缺氧复氧心脏微血管内皮细胞的保护作用

目的探究丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对缺氧/复氧(H/R)心脏微血管内皮细胞(CMECs)保护作用的内在机制。方法H/R细胞模型的建立;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测CMECs细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;Western印迹检测凋亡相关蛋白及促分裂原活化蛋白激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)通路相关蛋白表达;光学显微镜下观测CMECs细胞血管形成能力。结果与对照组比较,H/R组G0/G1期比例明显升高(P<0.05),S期明显降低(P<0.05)。与H/R组比较,低、中、高剂量STS组细胞G0/G1期比例依次降低,S期依次升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,H/R组细胞活力、管的形成、p-MEK、p-ERK2水平显著降低(P<0.05);与H/R组比较,低、中、高剂量STS组细胞活力、管的形成、p-MEK、p-ERK2水平均显著增高,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。与对照组相比,H/R组细胞凋亡率、Bax、酶切caspase-3水平显著升高(P<0.05);与H/R组比较,低、中、高剂量STS组细胞凋亡率、Bax、酶切caspase-3水平均显著降低,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。结论STS对H/R CMECs损伤的保护作用与其激活MEK/ERK信号通路有关。