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丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11在泛癌的发生和预后中的作用及免疫分析 被引量:1
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作者 凌永嫦 李妹燕 +3 位作者 仇雯丽 廖陆生 董明右 王俊利 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第6期512-519,共8页
目的探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11(STK11)在各种肿瘤中的潜在免疫功能和预后价值,为肿瘤的免疫治疗和预后提供依据。方法从TCGA、CCLE和GTEx数据库获取正常组织、肿瘤细胞和肿瘤组织中STK11基因的表达水平,采用R软件、Kaplan-Meier方法... 目的探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11(STK11)在各种肿瘤中的潜在免疫功能和预后价值,为肿瘤的免疫治疗和预后提供依据。方法从TCGA、CCLE和GTEx数据库获取正常组织、肿瘤细胞和肿瘤组织中STK11基因的表达水平,采用R软件、Kaplan-Meier方法和对数秩检验分析STK11表达水平与预后的相关性,ESTIMATE算法计算每个肿瘤样品的免疫评分、基质评分和综合评分,R软件分析STK11表达与这些评分之间的关系。结果STK11在胆管癌、头颈部鳞状细胞癌、肾嫌色细胞癌、肺鳞癌、胰腺癌和直肠腺癌中高表达,而在宫颈癌和子宫肉瘤等16种肿瘤中低表达;其表达水平与肝细胞癌和子宫内膜癌等7种肿瘤总体生存期显著相关,可作为预后指标。STK11表达水平在多形胶质母细胞瘤和肺腺癌等6种肿瘤中与免疫评分、基质评分和综合评分呈显著负相关,且与肝细胞癌和肺腺癌等部分肿瘤的免疫浸润密切相关。结论STK11基因在不同类型肿瘤中的表达有差异性(6种肿瘤中高表达,16种肿瘤中低表达),且与部分肿瘤免疫浸润相关,可作为预后指标。 展开更多
关键词 酸/蛋白激酶11 预后 免疫浸润
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丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶通路介导的p53基因抑制口腔鳞状细胞癌增殖和侵袭的实验研究 被引量:2
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作者 高继宾 李兴平 蒋继党 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期145-149,共5页
目的探讨人重组p53腺病毒(rAd-p53)注射液抑制口腔鳞状细胞癌增殖和侵袭的分子机制。方法采用rAd-p53注射液转染人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113,观察p53基因过表达对该细胞系增殖及侵袭能力的影响,并用蛋白免疫印迹的方法检测Ad-p53转染前... 目的探讨人重组p53腺病毒(rAd-p53)注射液抑制口腔鳞状细胞癌增殖和侵袭的分子机制。方法采用rAd-p53注射液转染人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113,观察p53基因过表达对该细胞系增殖及侵袭能力的影响,并用蛋白免疫印迹的方法检测Ad-p53转染前后Tca8113细胞系内丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路相关蛋白,细胞周期及凋亡调控蛋白细胞周期素D1(Cyclin D1)、P21、Bcl-2的表达。结果 Ad-p53转染后显著抑制Tca8113细胞系增殖和侵袭(P<0.01),并促进细胞凋亡(P<0.001)。蛋白免疫印迹结果显示,rAd-p53转染后显著提高了Tca8113细胞P53和P21蛋白的表达,同时显著下调了Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达及AKT蛋白的磷酸化(P<0.01)。结论 AKT信号通路可能是p53引起的口腔鳞癌细胞增殖和侵袭抑制的关键分子机制,Cyclin D1、P21和Bcl-2蛋白可能是AKT信号通路的下游调控基因,AKT信号通路及下游调控基因有望成为肿瘤基因治疗靶点。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞 蛋白激酶信号通路 细胞增殖 侵袭
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丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶激活的长链非编码RNA对甲状腺癌细胞凋亡和自噬行为的影响 被引量:8
3
作者 刘涛 赵艳红 +5 位作者 王利萍 贾海燕 崔东娟 司运辉 王红娜 薛会朝 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期747-753,共7页
目的:探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine-protein kinase B-Raf,BRAF)激活的长链非编码RNA(BRAF-activated long-chain non-coding RNA,lnc RNA-BANCR)对甲状腺癌细胞凋亡和自噬行为的影响及其机制。方法:RT-PCR检测lnc RNA-B... 目的:探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine-protein kinase B-Raf,BRAF)激活的长链非编码RNA(BRAF-activated long-chain non-coding RNA,lnc RNA-BANCR)对甲状腺癌细胞凋亡和自噬行为的影响及其机制。方法:RT-PCR检测lnc RNA-BANCR在甲状腺癌组织和癌旁正常甲状腺组织中的表达情况;分析lnc RNA-BANCR和甲状腺癌患者的临床病理资料之间的关联;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测lnc RNA-BANCR对甲状腺癌细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测lnc RNA-BANCR对甲状腺癌细胞凋亡行为的影响;Transwell侵袭实验检测lnc RNA-BANCR对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响,Wsetern印迹检测抑制lnc RNA-BANCR的表达后自噬蛋白LC3-I和LC3-II表达的变化情况。结果:与正常甲状腺组织相比,甲状腺癌组织中lnc RNA-BANCR表达水平较高(P<0.05);lnc RNABANCR的表达与甲状腺癌的病理分期和淋巴结转移情况有关,分期越高,lnc RNA-BANCR在甲状腺癌组织中表达越高(P<0.05);抑制lnc RNA-BANCR的表达后,在一定程度上可抑制甲状腺癌细胞的增殖和侵袭能力(均P<0.05);同时可使甲状腺癌细胞的凋亡行为得到一定的促进(P<0.05);自噬蛋白LC3-I和LC3-II的表达水平相应增高(均P<0.05)。结论:lnc RNA-BANCR的表达通过影响甲状腺癌细胞的自噬行为而对其增殖、侵袭及凋亡行为产生影响。 展开更多
关键词 甲状腺 酸/蛋白激酶激活的长链非编码RNA 细胞凋亡 细胞侵袭
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富含脯氨酸的酪氨酸激酶2和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶在舌鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义 被引量:6
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作者 李玲玲 王升志 +2 位作者 刘旭阳 刘浩 宫兆华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期29-32,共4页
目的探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)在舌鳞状细胞癌(TSCC)及其癌旁非肿瘤组织中的表达差异及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测45例TSCC组织及30例癌旁非肿瘤组织中Pyk2和p-AKT蛋白的表... 目的探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)在舌鳞状细胞癌(TSCC)及其癌旁非肿瘤组织中的表达差异及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测45例TSCC组织及30例癌旁非肿瘤组织中Pyk2和p-AKT蛋白的表达情况,并分析两者蛋白表达与临床病理参数的关系。结果在TSCC组织中Pyk2和p-AKT蛋白均呈高表达,而在癌旁非肿瘤中呈低表达或无表达(P<0.05)。并且两者的表达呈正相关(γs=0.412)。Pyk2蛋白的表达与病理分化程度、有无淋巴结转移及TNM临床分期有关(P<0.05),与性别、年龄无关。而p-AKT只与病理分化程度有关(P<0.05)。结论 Pyk2和p-AKT蛋白异常表达与TSCC的发生、发展密切相关,联合检测两者有望成为明确TSCC恶性程度的指标。 展开更多
关键词 富含脯的酪激酶2 化的酸/蛋白激酶 舌鳞状细胞
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家族性进行性色素过度沉着症家系丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11基因的克隆和序列鉴定 被引量:1
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作者 张彩娥 邓云华 吴雄文 《新乡医学院学报》 CAS 2011年第5期548-550,共3页
目的进行家族性进行性色素过度沉着症(FPH)家系中患者丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11(STK11)基因的克隆和序列鉴定,以期检测FPH发生是否由于STK11突变所致。方法从FPH患者永生化的B淋巴细胞中提取总RNA,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获取cDNA... 目的进行家族性进行性色素过度沉着症(FPH)家系中患者丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11(STK11)基因的克隆和序列鉴定,以期检测FPH发生是否由于STK11突变所致。方法从FPH患者永生化的B淋巴细胞中提取总RNA,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获取cDNA序列,加入特异性引物经PCR扩增STK11 cDNA双链,再经过HindⅢ、EcoRI双酶切PCR产物及质粒载体pcDNA3.0,酶切产物经回收、连接,产物转化到大肠杆菌DH5α,选取阳性克隆菌落进行PCR鉴定、酶切鉴定和测序分析。结果成功构建重组质粒pcDNA3.0-STK11,其测序结果与美国国立生物技术信息中心查询的正常序列结果一致。结论该FPH家系发病并非由于STK11突变所致,在初步定位FPH致病基因的19p13.1-pter区段存在尚未发现的致病基因。 展开更多
关键词 家族性进行性色素过度沉着症 酸/蛋白激酶11基因 克隆 序列鉴定
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嗜热真菌Thermomyces langinosus编码丝/苏氨酸蛋白激酶部分cDNA的克隆及序列分析(英文) 被引量:1
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作者 李伟 李多川 +1 位作者 张世宏 彭友良 《山东科学》 CAS 2003年第1期17-21,共5页
根据几种丝状真菌保守的氨基酸序列,设计了一组简并性的引物,从嗜热真菌Thermomyceslanginosus中提取总RNA,利用RT-PCR的方法,我们得到了一个1243bp的cDNA的片段。片段回收纯化后连接到pGEM-Teasy载体上,PCR扩增重组质粒证实这个长约120... 根据几种丝状真菌保守的氨基酸序列,设计了一组简并性的引物,从嗜热真菌Thermomyceslanginosus中提取总RNA,利用RT-PCR的方法,我们得到了一个1243bp的cDNA的片段。片段回收纯化后连接到pGEM-Teasy载体上,PCR扩增重组质粒证实这个长约1200bp片段已经插到载体上。序列分析发现和裂殖酵母的蛋白激酶dis1非常相似,比较两者3'氨基酸序列发现同源性达28%以上。其推断的氨基酸序列上包含有6个丝/苏氨酸蛋白激酶的保守亚区。这些都表明它编码的基因可能是一个新的丝/苏氨酸蛋白激酶。 展开更多
关键词 嗜热真菌 基因编码 蛋白激酶 蛋白激酶 CDNA序列分析 基因克隆 序列
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肺腺癌转移相关转录本-1沉默对喉癌细胞增殖、凋亡及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶通路的影响 被引量:2
7
作者 谭建成 刘鑫国 邢金燕 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2019年第9期476-480,共5页
目的 探讨RNA干扰技术(RNAi)沉默肺腺癌转移相关转录本-1(MALAT-1)基因对喉癌细胞增殖、凋亡及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路影响。方法体外培养人喉癌细胞Hep-2、正常永生化表皮细胞Hacat,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中... 目的 探讨RNA干扰技术(RNAi)沉默肺腺癌转移相关转录本-1(MALAT-1)基因对喉癌细胞增殖、凋亡及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路影响。方法体外培养人喉癌细胞Hep-2、正常永生化表皮细胞Hacat,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中MALAT-1mRNA表达水平。采用RNAi技术将MALAT-1阴性对照质粒、si-MALAT1分别转染至Hep-2细胞,命名为si-NC组、si-MALAT1组,未处理组作为空白对照组,分别检测三组Hep-2细胞中MALAT-1及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bax、caspase-3mRNA表达水平、Bcl-2、Bax、caspase-3、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)及其磷酸化蛋白(p-PI3K)、Akt及其磷酸化蛋白(p-Akt)蛋白表达情况以及细胞增殖及凋亡情况。结果 与正常细胞相比,喉癌Hep-2细胞中MALAT-1mRNA表达水平(3.24±1.02)升高(P<0.05);与空白对照组、si-NC组相比,si-MALAT-1组Hep-2细胞中MALAT-1mRNA表达水平(0.47±0.08)及Bcl-2mRNA(0.56±0.09)及蛋白(0.31±0.05)表达降低,细胞增殖抑制率及凋亡率[(20.48±3.41)%]均升高,Bax、caspase-3mRNA(3.02±0.50、2.58±0.43)及蛋白表达(0.86±0.14、0.94±0.16)均升高,p-PI3K、p-Akt蛋白表达(0.57±0.10、0.51±0.08)均降低(P均<0.05)。结论 MALAT-1沉默可抑制人喉癌细胞系Hep-2细胞增殖并提高其凋亡率,推测可能通过影响Akt信号通路诱导癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 喉肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 肺腺转移相关转录本-1 蛋白激酶
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长非编码RNA 00467基于竞争性内源RNA调控丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3基因参与胶质瘤细胞免疫及耐药的机制
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作者 郗艳国 张靖悦 +6 位作者 滕伟 赵永辉 程世翔 董晓林 梁赞 王志峰 李国京 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期1711-1714,共4页
目的探讨胶质瘤细胞中长非编码RNA 00467(LINC00467)通过竞争性内源RNA(ceRNA)机制调控丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3基因(RIPK3)与肿瘤微环境(TME)及药敏性的关系及其机制。方法对癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因型-组织表达(GTEx)数据库... 目的探讨胶质瘤细胞中长非编码RNA 00467(LINC00467)通过竞争性内源RNA(ceRNA)机制调控丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3基因(RIPK3)与肿瘤微环境(TME)及药敏性的关系及其机制。方法对癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因型-组织表达(GTEx)数据库胶质瘤及正常脑组织基因表达进行分析,筛选差异表达基因(DEGs)(P<0.01且表达变化大于2倍的基因),确定有意义的长链非编码RNA(lncRNA)-mRNA关系对,进行生存分析。在Starbase v3.0数据库中筛选微小RNA(miRNA,miR)-lncRNA关系对,确定ceRNA。在metascape、TISCH、CancerSEA数据库进行分析。取25例新鲜胶质瘤组织及25例正常脑组织,应用荧光实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测基因表达。应用R软件包及SPSS统计分析软件对结果进行处理。结果对TCGA和GTEx表达谱进行差异表达分析,发现6095个差异表达的lncRNA(3083上调,3012下调)和10164个差异表达的mRNA(6803上调,3361下调)。对胶质瘤中的319795对候选lncRNA-mRNA对进行筛选,确定LINC00467-RIPK3为研究对象,发现LINC00467、RIPK3在胶质瘤组织高表达,且呈正相关(r=0.66,P<0.01)。数据库分析发现RIPK3可能通过海绵吸附miR-3612与LINC00467形成ceRNA。生存分析显示LINC00467-RIPK3高表达的患者预后较差(P<0.05)。胶质瘤单细胞数据集分析发现RIPK3在巨噬细胞中高表达,bulk数据集分析发现RIPK3与巨噬细胞表面分子表达正相关(P<0.01)。应用使用表达数据估计恶性肿瘤中的间质和免疫细胞算法计算胶质瘤患者的免疫得分,分析发现RIPK3与Estimate、基质计分、免疫计分以及肿瘤纯度显著相关(P<0.01)。药敏数据分析显示,RIPK3的表达与多种药物的半数抑制浓度(IC50)值有关(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,胶质瘤组织中LINC00467、RIPK3的表达水平高于正常组织(0.74±0.28、0.34±0.20,t=8.94、9.38,P<0.01),而胶质瘤组织miR-3612的表达水平(0.57±0.27)低于正常组织(0.79±0.33,t=-2.17,P<0.01)。结论LINC00467可能通过ceRNA机制促进RIPK3表达而参与胶质瘤TME和药敏性调控。 展开更多
关键词 胶质瘤 酸/蛋白激酶3基因 生物信息学 肿瘤微环境
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斯氏副柔线虫CAMK/TSSK蛋白激酶基因的克隆及其蛋白质结构与抗原表位预测分析 被引量:3
9
作者 王文龙 赵学亮 +5 位作者 孙柯 冯陈晨 白丽艳 王姝懿 王梦雅 刘春霞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期644-651,共8页
为分析并预测斯氏副柔线虫免疫相关基因CTPK编码蛋白结构、功能以及其作为疫苗候选抗原的可能性,通过提取斯氏副柔线虫组织RNA,反转录合成cDNA,设计特异性引物以扩增CTPK基因的CDS区,并利用生物信息学软件对CTPK进行蛋白质结构分析和抗... 为分析并预测斯氏副柔线虫免疫相关基因CTPK编码蛋白结构、功能以及其作为疫苗候选抗原的可能性,通过提取斯氏副柔线虫组织RNA,反转录合成cDNA,设计特异性引物以扩增CTPK基因的CDS区,并利用生物信息学软件对CTPK进行蛋白质结构分析和抗原表位预测。生物信息学分析表明,CTPK基因cDNA序列全长共519bp,具有完整的开放阅读框(519bp),编码173个氨基酸,相对分子质量和等电点大小分别为20.264ku和9.53。结构分析发现,蛋白质无跨膜区,无规则卷曲构成二级结构的主要组分,亲水性氨基酸比例超过60%;抗原表位预测表明,CTPK蛋白是一种抗原性较高的亲水性蛋白,既含有较多潜在的B细胞抗原表位又存在较多的T细胞抗原表位。推测CTPK有望用作斯氏副柔线虫的免疫诊断抗原和疫苗候选抗原,本研究为骆驼斯氏副柔线虫生前诊断方法iELISA的建立和DNA疫苗的研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 斯氏副柔线虫 CTPK基因 表位 蛋白质结构预测 生物信息学分析 /苏蛋白激酶
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莱茵衣藻丝/苏氨酸蛋白激酶突变株蓝光响应的表征
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作者 李旺宁 梁梦静 +7 位作者 杨泽 李亚男 张春辉 季春丽 李润植 秦松 薛金爱 崔红利 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4563-4579,共17页
为研究莱茵衣藻丝/苏氨酸蛋白激酶(silk/threonine protein kinase,STK)介导藻细胞蓝光响应的分子机制,本文对蓝光胁迫下莱茵衣藻STK突变株系crstk11(AphvIII盒反向插入stk11基因编码区)进行表型鉴定及转录组分析。表型鉴定显示,正常光... 为研究莱茵衣藻丝/苏氨酸蛋白激酶(silk/threonine protein kinase,STK)介导藻细胞蓝光响应的分子机制,本文对蓝光胁迫下莱茵衣藻STK突变株系crstk11(AphvIII盒反向插入stk11基因编码区)进行表型鉴定及转录组分析。表型鉴定显示,正常光(白光)下,野生型株CC5325与突变株crstk11的生长和色素含量差异较小;蓝光抑制了crstk11藻细胞生长和叶绿素合成,但显著促进类胡萝卜素积累。转录组分析显示,蓝光处理4 d,突变株(STK4)vs.野生型(wild type,WT4)共检测到差异表达基因(differential expression genes,DEGs)860条(559个上调,301个下调)。高蓝光处理8 d,STK8 vs.WT8共获得1088个DEGs(468个上调,620个下调)。KEGG富集分析发现,与CC5325相比,crstk11蓝光响应基因主要参与胞内光合作用催化活性、碳代谢和色素合成等。其中,上调基因包括psaA、psaB和psaC,psbA、psbB、psbC、psbD、psbH和psbL,petA、petB和petD,以及编码ATP合成酶α、β和c亚基的基因。下调基因有petF和petJ等。研究揭示了莱茵衣藻蛋白激酶CrSTK11可能通过介导光合作用、色素合成和碳代谢参与藻细胞蓝光响应,这为深入解析藻类光胁迫抗性机制提供了新知识。 展开更多
关键词 莱茵衣藻 /苏蛋白激酶 蓝光胁迫 转录组分析 差异表达基因
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肺岩宁方下调裸鼠人肺腺癌细胞移植瘤中磷酸化Akt和缺氧诱导因子1α蛋白表达 被引量:8
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作者 张铭 徐振晔 +1 位作者 白冰 董昀 《中西医结合学报》 CAS 2008年第6期616-620,共5页
目的:观察肺岩宁方对人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号调节的影响。方法:32只A549荷瘤裸鼠随机分为4组:模型组、顺铂组、肺岩宁方组和综合治疗... 目的:观察肺岩宁方对人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号调节的影响。方法:32只A549荷瘤裸鼠随机分为4组:模型组、顺铂组、肺岩宁方组和综合治疗(顺铂加肺岩宁方)组,每组8只。化疗组和综合治疗组于第1、3、5天腹腔注射顺铂各0.1mg,肺岩宁方组和综合治疗组予肺岩宁方0.4ml灌胃,持续21d。观察抑瘤率,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reac-tion,RT-PCR)检测移植瘤中HIF-1α mRNA表达,免疫组化法检测移植瘤中HIF-1α和磷酸化Akt(phos-phorylated Akt,p-Akt)蛋白表达。结果:肺岩宁方组裸鼠抑瘤率为34.17%,综合治疗组为64.38%。RT-PCR结果显示,综合治疗组HIF-1α mRNA的表达水平低于模型组(P<0.05)。免疫组化实验显示,化疗组、肺岩宁方组和综合治疗组移植瘤HIF-1α蛋白表达均明显低于模型组(P<0.01);肺岩宁方组和综合治疗组p-Akt蛋白表达明显低于模型组(P<0.05)。结论:益气养精法为主的肺岩宁方可抑制肺癌肿瘤生长,并与顺铂有协同作用。肺岩方对HIF-1α蛋白表达的抑制作用可能与下调p-Akt表达有关。 展开更多
关键词 益气养精 肺岩宁方 人肺腺A549 缺氧诱导因子1 Α亚基 蛋白激酶 裸鼠
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非小细胞肺癌EGFR突变与磷酸化信号传导蛋白表达的关系 被引量:2
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作者 刘岩 徐美林 王菁 《天津医药》 CAS 北大核心 2009年第8期655-658,I0002,共5页
目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与其下游磷酸化信号通路蛋白表达的关系。方法:利用PCR和基因测序检测NSCLC患者EGFR第19和21外显子突变,辅以免疫组化染色检测下游信号传导蛋白p-Akt、p-ERK1/2和p-STAT... 目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与其下游磷酸化信号通路蛋白表达的关系。方法:利用PCR和基因测序检测NSCLC患者EGFR第19和21外显子突变,辅以免疫组化染色检测下游信号传导蛋白p-Akt、p-ERK1/2和p-STAT3的表达。结果:66例NSCLC中有11例发生EGFR突变,女性和伴细支气管肺泡特征的腺癌突变率较高。p-Akt、p-ERK1/2和p-STAT3的表达阳性率分别为54.5%、25.8%和33.3%,EGFR突变患者p-Akt阳性率(81.8%)显著高于无突变者(49.1%,P<0.05),且在伴细支气管肺泡特征的腺癌中呈高表达,两者之间p-ERK1/2和p-STAT3表达差异无统计学意义;p-ERK1/2表达与患者年龄相关,p-STAT3在腺癌、小肿瘤(≤3cm)和I期NSCLC中的表达均显著上调(P<0.05)。结论:EGFR突变后的下游信号传导主要以激活Akt途径为主,检测下游信号传导蛋白表达是EGFR基因检测的重要补充,对NSCLC基因分型、疗效监测及预后评估具有重要意义。 展开更多
关键词 非小细胞肺 受体 表皮生长因子 蛋白激酶 蛋白激酶 DNA结合蛋白质类
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BRAF、TP53、Pax8-PPARγ在甲状腺癌中的表达及疗效预测价值
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作者 苏镇军 赵艳春 +2 位作者 李娟 国方娜 温丽莎 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第5期598-602,607,共6页
目的探讨肿瘤蛋白P53(TP53)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BRAF)、配对盒基因8-过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Pax8-PPARγ)在甲状腺癌中的表达及疗效预测价值。方法将2020年4月至2022年4月该院收治的150例甲状腺癌患者纳入研究。检测患者甲... 目的探讨肿瘤蛋白P53(TP53)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BRAF)、配对盒基因8-过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Pax8-PPARγ)在甲状腺癌中的表达及疗效预测价值。方法将2020年4月至2022年4月该院收治的150例甲状腺癌患者纳入研究。检测患者甲状腺癌组织及癌旁组织中TP53、BRAF、Pax8-PPARγmRNA的表达水平,分析其与临床病理因素的关系,基于受试者工作特征(ROC)曲线及决策曲线分析TP53、BRAF、Pax8-PPARγmRNA表达水平预测^(131)I治疗效果的价值。结果甲状腺癌组织中的TP53、BRAF、Pax8-PPARγmRNA表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。甲状腺癌患者淋巴结转移、肿瘤最大径、包膜浸润与TP53、BRAF、Pax8-PPARγmRNA表达水平有关(P<0.05)。采用放射性^(131)I清除术后残留的甲状腺组织(简称清甲)失败患者组织TP53、BRAF、Pax8-PPARγmRNA表达水平均高于清甲成功患者(P<0.05)。ROC曲线分析显示,TP53、BRAF、Pax8-PPARγmRNA联合预测甲状腺癌患者清甲失败的曲线下面积优于三者单独预测(P<0.05)。决策曲线显示,三者联合预测甲状腺癌清甲失败发生的净收益率优于单一预测(P<0.05)。结论TP53、BRAF、Pax8-PPARγ在甲状腺癌组织中呈高表达,联合检测有助于预测^(131)I治疗效果,为临床确定合理治疗方案及时机提供参考。 展开更多
关键词 甲状腺 配对盒基因8-过氧化物酶体增殖物激活受体γ 酸/蛋白激酶 肿瘤蛋白P53 ^(131)I治疗
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菌寄生真菌纤细齿梗孢一丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶基因OPK1的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 赵培宝 任爱芝 李多川 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期329-332,共4页
Using degenerate PCR and TAIL-PCR,a protein kinase gene OPK1(Genebank accession No.:EU417815) was cloned from mycoparasite fungi Olpitrichum tenellum.OPK1 has an open reading frame of 2 031 bp interrupted by two intro... Using degenerate PCR and TAIL-PCR,a protein kinase gene OPK1(Genebank accession No.:EU417815) was cloned from mycoparasite fungi Olpitrichum tenellum.OPK1 has an open reading frame of 2 031 bp interrupted by two introns(108 bp,84 bp) and putatively encodes a protein of 676 aa.Phylogenetic analysis indicated that OPK1 was most similar to other serine-threonine protein kinase in fungi.Southern blot analysis indicated that OPK1 is present as a single copy in the genome.RT-PCR showed it could be transcribed both in the phase of spore germination and hyphal growth. 展开更多
关键词 蛋白激酶基因 菌寄生真菌 序列分析 分裂活化蛋白激酶 细胞内信号转导 可逆磷
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丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3基因在胶质瘤中的表达及分子调控机制 被引量:1
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作者 郗艳国 滕伟 +5 位作者 赵永辉 程世翔 董晓林 梁赞 王志峰 李国京 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第9期1644-1647,共4页
目的通过分析网络生物数据探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3(RIPK3)基因在胶质瘤中的表达及分子调控机制。方法应用Gepia2数据库对进行TCGA肿瘤数据和GTEx正常数据联合分析,筛选差异表达基因,进一步对RIPK3基因的调控机制进行分析。荧光实时... 目的通过分析网络生物数据探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3(RIPK3)基因在胶质瘤中的表达及分子调控机制。方法应用Gepia2数据库对进行TCGA肿瘤数据和GTEx正常数据联合分析,筛选差异表达基因,进一步对RIPK3基因的调控机制进行分析。荧光实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测20例胶质瘤组织及正常组织中RIPK3 mRNA、FGD5-AS1、微小RNA(miR)-223-3p的表达,对其关系进行分析。结果Gepia2分析显示,胶质瘤和正常组织中存在7659个差异表达基因。差异表达结果发现RIPK3 mRNA在胶质瘤组织中表达水平(1.862±1.621)显著高于正常组织(0.693±0.801,Z=9.067,P<0.01)。应用STRING数据库分析RIPK3的PPI网络进行富集分析,结果显示RIPK3互相作用的蛋白参与半胱氨酸型内肽酶(cysteine-type endopeptidase)活性、核因子-κB(NF-κB)信号通路等的调控。长非编码RNA FGD5-AS1在胶质瘤中表达水平(6.401±0.683)高于正常组织(5.406±0.796,t=12.697,P<0.01),并与RIPK3呈正相关(rs=0.402,P<0.01);数据库分析显示RIPK3与FGD5-AS1互为内源性竞争RNA(ceRNA),通过miR-223-3p发挥作用。对FGD5-AS1、miR-223-3p、RIPK3 mRNA在胶质瘤及正常组织中表达检测的RT-qPCR结果显示,FGD5-AS1、RIPK3 mRNA在胶质瘤组织中表达水平(1.942±0.695、1.392±0.360)均高于正常组织(0.533±0.208、0.293±0.144,t=8.686、12.676,P<0.01),而miR-223-3p在胶质瘤组织中表达水平(0.843±0.213)低于正常组织(2.334±0.758,t=-8.469,P<0.01)。在胶质瘤组织中RIPK3 mRNA与FGD5-AS1表达呈正相关(rs=0.840,P<0.01),RIPK3 mRNA、FGD5-AS1与miR-223-3p表达呈负相关(rs=-0.914、-0.872,P<0.01)。结论RIPK3在胶质瘤组织中呈高表达,与胶质瘤进展有关。FGD5-AS1可能通过内源性竞争机制通过抑制miR-223-3p而调控RIPK3的表达。 展开更多
关键词 胶质瘤 酸/蛋白激酶3基因 生物信息学 预后 复发
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丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶及其活化产物在子宫内膜癌组织中的表达及其意义
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作者 华绍芳 薛凤霞 +2 位作者 张丽志 王颖梅 赵敬 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期144-146,共3页
丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)是许多生长因子、细胞因子的下游信号分子,参与抗细胞凋亡、促进细胞增殖、迁移以及肿瘤血管生成等过程,其异常改变常出现在一些恶性肿瘤组织中。第308位苏氨酸(Thr^308)和第473位丝氨酸(Ser^473)是... 丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)是许多生长因子、细胞因子的下游信号分子,参与抗细胞凋亡、促进细胞增殖、迁移以及肿瘤血管生成等过程,其异常改变常出现在一些恶性肿瘤组织中。第308位苏氨酸(Thr^308)和第473位丝氨酸(Ser^473)是活化Akt所必需的两个调节性磷酸化位点,Ser^473磷酸化有利于Akt活化及Akt发挥最大活性。 展开更多
关键词 蛋白激酶 子宫内膜 活化 组织 化位点 产物 肿瘤血管生成
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丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因真核表达载体的构建及抑瘤功能研究
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作者 姚茂金 沈宏伟 +5 位作者 王永俊 汪斐 易鑫 王向平 汤建光 施小六 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期192-193,共2页
PJ综合征(Peutz-Jeghers syndrome)是一种常染色体显性遗传疾病。临床表现以唇、颊黏膜、指(趾)黑色囊性斑、多发性胃肠息肉以及肿瘤易患性增加为特征。其疾病基因丝氨酸/苏氨酸激酶(STKⅡ/LKBⅠ)基因于1998年被克隆,基因所编... PJ综合征(Peutz-Jeghers syndrome)是一种常染色体显性遗传疾病。临床表现以唇、颊黏膜、指(趾)黑色囊性斑、多发性胃肠息肉以及肿瘤易患性增加为特征。其疾病基因丝氨酸/苏氨酸激酶(STKⅡ/LKBⅠ)基因于1998年被克隆,基因所编码的STKⅡ/LKBⅠ蛋白在细胞内广泛表达,行使多种重要复杂的生理功能,参与细胞生命活动的调节。我们拟构建STKⅡ/LKBⅠ真核表达载体,将其转入STKⅡ/LKBⅠ表达阴性的官颈癌HeLa细胞中,筛选稳定表达的细胞单克隆,对其抑瘤功能进行初步研究。 展开更多
关键词 基因真核表达载体 蛋白激酶 抑瘤 常染色体显性遗传疾病 HELA细胞 PJ综合征 肿瘤易患性
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环指蛋白44基因表达对胃癌细胞增殖和凋亡的调节作用及机制
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作者 师文 高楠 +1 位作者 孙焕焕 韩炜 《实用临床医药杂志》 2023年第19期22-31,39,共11页
目的 探讨环指蛋白44(RNF44)基因表达对胃癌细胞增殖和凋亡的调节作用及机制。方法 检测胃癌细胞株及正常胃黏膜细胞RNF44的基因和蛋白表达;胃癌MKN45细胞株和AGS细胞株分别转染shRNF44病毒和oeRNF44病毒,测定RNF44的基因和蛋白的表达... 目的 探讨环指蛋白44(RNF44)基因表达对胃癌细胞增殖和凋亡的调节作用及机制。方法 检测胃癌细胞株及正常胃黏膜细胞RNF44的基因和蛋白表达;胃癌MKN45细胞株和AGS细胞株分别转染shRNF44病毒和oeRNF44病毒,测定RNF44的基因和蛋白的表达、细胞增殖和细胞凋亡情况、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白表达情况;测定AKT通路抑制剂LY294002对RNF44基因过表达AGS细胞株增殖、凋亡和AKT信号蛋白的影响;采用MKN45细胞株构建裸鼠皮下瘤模型,观察肿瘤生长情况、肿瘤组织Ki-67表达情况以及AKT和p-AKT蛋白表达情况。结果 正常胃黏膜GES-1细胞RNF44的基因和蛋白表达水平最低,胃癌MKN45细胞株RNF44的基因和蛋白表达水平最高。MKN45细胞株经RNF44基因干扰慢病毒转染后,RNF44的基因和蛋白表达水平降低,细胞增殖能力降低,早期和晚期凋亡率均增加,RNF44和p-AKT蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。AGS细胞株经RNF44基因过表达慢病毒转染后,RNF44的基因和蛋白表达水平升高,细胞增殖能力增加,细胞早期和晚期凋亡率均降低,RNF44和p-AKT蛋白表达水平增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。AKT抑制剂可使正常AGS细胞或RNF44基因过表达AGS细胞株增殖能力降低,细胞早期和晚期凋亡率升高,p-AKT蛋白表达水平降低。shRNF44组裸鼠肿瘤组织大小和质量均较shNC组降低,Ki-67表达较shNC组降低,肿瘤组织RNF44和p-AKT蛋白表达较shNC组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RNF44基因表达水平对胃癌细胞增殖和凋亡具有调节作用。RNF44过表达可显著抑制肿瘤细胞增殖并促进凋亡,RNF44低表达可显著促进肿瘤细胞增殖并抑制凋亡。RNF44可能通过调控p-AKT蛋白表达而发挥调节作用。 展开更多
关键词 环指蛋白44基因 细胞增殖 细胞凋亡 酸/蛋白激酶
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NDRG2和AKT2与其磷酸化蛋白在肝癌病理组织中的应用及与临床病理的相关性研究
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作者 陈婷 《吉林医学》 CAS 2020年第2期393-395,共3页
目的:探讨N-myc下调基因2(NDRG2)和丝/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)及其磷酸化蛋白(p-AKT2)在肝癌病理组织中的应用及与临床病理的相关性。方法:选择肝癌患者62例作为对象,所有患者均行手术治疗,术中取病灶组织与癌旁组织(距离病灶>5 cm)... 目的:探讨N-myc下调基因2(NDRG2)和丝/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)及其磷酸化蛋白(p-AKT2)在肝癌病理组织中的应用及与临床病理的相关性。方法:选择肝癌患者62例作为对象,所有患者均行手术治疗,术中取病灶组织与癌旁组织(距离病灶>5 cm)。采用荧光定量PCR技术测定标本NDRG2、AKT2 mRNA水平;采用Western Blot法测定标本NDRG2、AKT2及p-AKT2水平。结果:肝癌病灶组织与癌旁组织AKT2 mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05);肝癌病灶组织中NDRG2 mRNA水平,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);肝癌病灶组织中NDRG2蛋白水平,低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);肝癌病灶组织中AKT2、p-AKT2蛋白水平,高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:NDRG2在肝癌组织中呈低表达,而p-AKT2在肝癌组织中呈高表达,二者呈负相关性,均能参与疾病的发生、发展。 展开更多
关键词 N-myc下调基因2 /苏蛋白激酶2 蛋白 病理组织 相关性
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食管癌易感性与丝氨酸苏氨酸激酶15T+91A基因多态性的关系 被引量:1
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作者 桑永华 顾海勇 +3 位作者 丁国文 杨文涛 陈锁成 陈勇兵 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1220-1220,共1页
既往研究结果显示遗传因素在食管癌的发病过程中起重要作用。丝氨酸苏氨酸激酶15(Aurora.A/STK15,又称STK15)基因参与调节G2/M期转换,在有丝分裂的正常进行中发挥重要作用,其扩增和过表达使中心体异常扩增,导致染色体的异常分... 既往研究结果显示遗传因素在食管癌的发病过程中起重要作用。丝氨酸苏氨酸激酶15(Aurora.A/STK15,又称STK15)基因参与调节G2/M期转换,在有丝分裂的正常进行中发挥重要作用,其扩增和过表达使中心体异常扩增,导致染色体的异常分配及不稳定,最终癌基因激活,导致肿瘤产生,因此进行STK15T+91A基因多态性与食管癌发生易感性的研究很有必要。我们应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI—TOFMS)技术,探讨STK15单核苷酸多态性与食管癌发生危险因素的相关性。 展开更多
关键词 激酶 基因多态性 易感性 食管 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 中心体异常扩增 单核苷多态性 G2/M期
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