血脑屏障RAGE/LRP1转运体及神经血管单元与阿尔茨海默病关系的研究进展

血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)是介于外周和中枢神经系统之间的一道生理屏障,对维持中枢神经系统的稳态起着重要作用。研究表明,血脑屏障与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发生发展密切相关。该文重点论述血脑屏障晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)/低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1)受体转运系统及以血脑屏障为核心组分的神经血管单元(neurovascular unit,NVU)介导的中枢β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)水平调控与AD发病机制的关系,为AD防治提供新思路。

Urocortin1通过CRF受体2介导激活肠神经系统抑制小肠转运功能

目的探讨urocortin1是否通过CRF受体2激活肠神经系统调控小肠转运功能。方法 82只雄性6-8周龄SD大鼠,随机分为iv urocortin1组,静脉注射10μg/kg urocortin1;盐水对照组,静脉注射生理盐水0.3 ml;ip astressin_2-B+iv urocortin1组,腹腔注射astressin_2-B(300μg/kg),间隔1 h,静脉注射urocortin1(10μg/kg);ip astressin_2-B组,腹腔注射astressin_2-B(300μg/kg),间隔1 h,静脉注射生理盐水0.3 ml;icv astressin_2-B+iv urocortin1组,侧脑室注射astressin_2-B(300μg/kg),间隔1 h,静脉注射urocortin1(10μg/kg);icv astressin_2-B组,侧脑室注射astressin_2-B(300μg/kg),间隔1 h,静脉注射生理盐水0.3 ml;正常大鼠组,无干预措施。采用埃文斯蓝含量测定法检测小肠转运功能(small intestinal transit,SIT),采用几何中心表示;采用免疫组化方法检测肠神经系统和中枢神经系统c-Fos表达;采用免疫荧光组化方法检测肠神经系统CRF受体2的表达。结果与盐水对照组相比,iv urocortin1组SIT减慢,中枢神经系统核团和肠神经系统c-Fos表达增加,差异具有统计学意义(P<0.05);与iv urocortin1组相比,ip astressin_2-B+iv urocortin1组SIT增快,肠神经系统c-Fos表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05),但中枢神经系统c-Fos表达仅轻度降低,差异无统计学意义(P>0.05);与iv urocortin1组相比,icv astressin_2-B+iv urocortin1组SIT和中枢神经系统c-Fos表达无显著改变,差异无统计学意义(P>0.05);正常大鼠胃、十二指肠、空肠和回肠肠神经系统中可检测到CRF受体2表达。结论 Urocortin1通过CRF受体2介导激活肠神经系统抑制了小肠转运功能。

高迁移率族蛋白B1在神经系统疾病中的研究进展

高迁移率族蛋白B1是一种在哺乳动物中广泛表达的非组蛋白染色体结合蛋白,并通过晚期糖基化终产物受体和TOLL样受体参与炎症反应过程,而大多数神经系统疾病的发病机制与自身免疫或免疫炎性损伤相关。本文就高迁移率族蛋白B1在神经系统疾病中的研究进展进行综述。

六味地黄丸通过RAGE/LRP1受体介导对SAMP8小鼠脑微血管的调节作用

目的:探讨六味地黄丸对SAMP8小鼠神经血管单元损伤的保护作用。方法:将75只6月龄SAMP8小鼠作为肾精不足证阿尔茨海默病(AD)动物模型,设模型组、盐酸多奈哌齐(0.747 mg·kg^(-1)·d^(-1))组、六味地黄丸高、中、低剂量(2.700、1.350、0.675 g·kg^(-1)·d^(-1))组,每组15只,以SAMR1小鼠15只作为正常组,连续给药2个月。采用Morris水迷宫检测小鼠空间记忆能力;苏木素-伊红(HE)观察脑组织海马和皮层病理变化;免疫组化(IHC)法检测脑组织海马和皮层中β淀粉样蛋白(Aβ)沉积情况及血管性血友病因子(vWF)和CD34表达情况;电镜观察脑微血管超微结构变化情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑组织海马和皮层中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、低密度脂蛋白相关蛋白1(LRP1)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)和P-选择素(P-selection)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期、游泳路程显著延长(P<0.01),神经胶质细胞数量增多,神经细胞数量减少,脑微血管内皮细胞间隙紧密连接模糊或间隙变大,膜结构损伤较重,内皮细胞线粒体肿胀、膜破裂、嵴大部分溶解,海马和皮层组织中Aβ、vWF蛋白表达显著增加(P<0.01),CD34蛋白表达明显降低(P<0.05),皮层中RAGE和P-selection蛋白表达水平显著升高(P<0.01),LRP1和VEGF-A蛋白表达水平显著下降(P<0.01);与模型组比较,六味地黄丸各剂量组小鼠逃避潜伏期、游泳路程均明显缩短(P<0.05),皮层和海马中神经胶质细胞数量减少明显,皮层中微血管数量增多明显,微血管内皮细胞间隙紧密连接双层膜结构较清晰,线粒体数量增多、膜完整、线粒嵴恢复,海马和皮层中Aβ、vWF、RAGE和P-selection蛋白表达明显降低(P<0.05),CD34、LRP1和VEGF-A蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:六味地黄丸能够通过RAGE/LRP1受体系统调节Aβ代谢,通过抑制vWF表达和增加VEGF-A和CD34促进脑微血管新生,改善SAMP8小鼠脑微血管损伤。

脑内β淀粉样蛋白水平的调节

β淀粉样蛋白(βamyloid protein,Aβ)是体内重要生物活性物质,主要包括Aβ40和Aβ42,它们在体内的利与害取决于其浓度高低。生理条件下脑内Aβ通过两个平衡维持在一定水平上,第一个平衡是Aβ的生成和降解,β分泌酶和γ分泌酶参与Aβ的生成,而脑啡肽酶和胰岛素降解酶参与Aβ的降解;第二个平衡是Aβ跨越血脑屏障的内向转运和外向转运,高级糖基化终产物受体(RAGE)是血脑屏障上Aβ内向转运体,而低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)是血脑屏障上Aβ外向转运体。如果这两个平衡任何一个被破坏,将会导致脑内Aβ水平异常升高,继而Aβ聚集和沉淀,形成老年斑。本文综述生理条件下脑内Aβ水平的调节以及降低病理状态下脑内Aβ水平的策略。

补阳还五汤治疗阿尔茨海默病的网络药理学研究及实验验证

目的 基于网络药理学和动物实验,探讨补阳还五汤(BYHWD)治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法 通过TCMSP、HERB数据库和文献检索筛选BYHWD的活性成分和作用靶点;运用UniProt校正作用靶点基因名,SwissADME和SwissTargetPrediction平台预测地龙作用靶点;利用OMIM、TTD、DisGeNET、HPO数据库获取AD的相关靶点,借助Venny平台选取BYHWD与AD的交集靶点;采用STRING 11.5在线数据库构建PPI网络;使用Cytoscape 3.7.2软件构建“组方药材-活性成分-疾病靶点”网络图;通过Metascape数据库对交集靶点进行GO注释和KEGG通路富集分析,借助微生信平台将其可视化。动物实验通过新物体识别、避暗实验检测APP/PS1小鼠学习记忆能力;苏木精-伊红染色观察海马神经元细胞形态;免疫组化法检测海马中RAGE、LRP1、ApoE和VCAM-1蛋白表达。结果 筛选出163个BYHWD抗AD的潜在靶点,如ApoE、VCAM-1,主要富集在癌症、AD、胆固醇代谢、脂质和动脉粥样硬化、AGE-RAGE等信号通路;行为学实验显示BYHWD给药后APP/PS1小鼠的新物体识别指数有所改善、避暗潜伏期增长,错误次数减少;HE染色显示BYHWD可以改善海马形态结构;IHC结果显示,给药后海马LRP1、ApoE表达水平升高,RAGE、VCAM-1表达水平降低。结论 本文结合动物实验对网络药理学预测结果进行验证,发现BYHWD可能通过调控RAGE/LRP1转运体改善APP/PS1小鼠的学习记忆障碍。

治疗帕金森病的不同药物对基底节多巴胺能系统的影响

目的:应用99mTc -TRODAT 1SPECT显像多巴胺转运体(DAT)和13 1I -epideprideSPECT显像多巴胺D2 受体,研究早期帕金森(PD)病人中用不同药物单一治疗14个月的随访情况。方法:72例早期(Hoehn&YahrⅠ～Ⅱ级)PD患者双盲、区组随机化方法分为4组,分别给予苯海索6mg·d-1(n =15 ) ;L 多巴制剂(美多巴2 5 0’,每天2 .5片) (n =2 2 ) ;L deprenyl(司来吉兰7.5mg·d-1) (n =2 2 ) ;多巴胺受体激动剂培高利特0 .5mg·d-1(n =13 )并随访14个月。分别在基线,随访7和14个月时,进行临床评分,同时以99mTc -TRODAT 1和13 1I -epidepride为配体,应用SPECT功能显像各组患者基底节区DAT和多巴胺D2 受体,比较不同治疗方案对基底节多巴胺能系统的影响情况。结果:99mTc -TRODAT 1SPECT显像结果显示,苯海索组和多巴制剂治疗组在治疗14个月后,基底节DAT均显著降低(P <0 .0 5 ) ,司来吉兰治疗组和多巴受体激动剂组在治疗7和14个月后,基底节区DAT虽有降低,但与基线比较无统计学意义(P >0 .0 5 )。随访14个月时,与对照组(苯海索组)比,仅受体激动剂组患者基底节区DAT值较高(P <0 .0 5 ) ,即减少程度最小。13 1I- epideprideSPECT显像结果显示,随访7和14个月时各组和基线比较均无显著差异,各组间亦无明显差异。结论:早期PD患者中。