中药石香膏对糖尿病大鼠慢性难愈合创面RAGE/NF-κBp65/eNOS mRNA表达影响的研究

目的:研究中药石香膏对于糖尿病大鼠慢性难愈合创面的晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/转录因子-κBp65(NF-κBp65)/内皮型一氧化氮合酶(e NOS) mRNA表达的影响。方法:将50只SD级清洁大鼠按随机数字表法分为正常组、正常对照组、难愈合组、贝复济组、石香膏组5组,每组每时间点(7 d/14 d) 5只。造模成功后,贝复济组创面外用贝复济溶液,石香膏组创面外敷石香膏。第7/14天取大鼠背部创面肉芽组织标本,荧光定量PCR法检测RAGE/NF-κBp65/e NOS mRNA表达水平。结果:干预7 d后,与难愈合组比较,贝复济组和石香膏组中RAGE/NF-κBp65 mRNA相对表达量降低,e NOS mRNA相对表达量升高,差异有统计学意义。与贝复济组比较,石香膏组中RAGE/NF-κBp65 mRNA相对表达量降低,e NOS mRNA升高,差异有统计学意义。干预14 d后,与贝复济组比较,石香膏组RAGE/NF-κBp65 mRNA相对表达量降低,差异有统计学意义。结论:石香膏可抑制糖尿病大鼠慢性难愈合创面中RAGE/NF-κBp65 mRNA表达,促进e NOS mRNA的表达,对于创面修复具有显著作用。

益气化瘀清热方及其拆方对大鼠肾系膜细胞表达NF-κBp65 mRNA及其蛋白的影响

目的：把益气化瘀清热方拆方成益气、化瘀、清热3组,并与复方组和雷公藤组（TW组）对比,通过体外培养的方法,观察各组含药血清对大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells,MsC）中NF-κBp65 mRNA及蛋白的表达水平高低,进而探讨益气化瘀清热方的作用机制及不同类中药的作用强度。方法：采用RT-PCR法及Wersten Blot法分别检测含药血清对MsC表达NF-κBp65 mRNA及蛋白的作用强度。结果：各组含药血清均能抑制MsC中NF-κBp65 mRNA及其蛋白的表达,化瘀组、TW组作用较强（P〈0.05）;拆方后的益气、化瘀、清热3组比较：化瘀组作用较益气组、清热组明显增强（P〈0.05）。结论：益气化瘀清热方及其拆方、TW均能抑制体外培养的大鼠MsC表达NF-κBp65mRNA及其蛋白,其中化瘀组、TW组作用较强,益气组较弱。

湿热证大鼠模型TLR4mRNA、NF-κBp65表达的对比研究

目的:通过多因素复合造模方法,观察模型大鼠内毒素特异性受体TLR4mRNA及NF-κBp65表达变化,探讨湿热致病机制。方法:将大鼠分为正常组、湿热模型组(高脂+高温高湿+大肠杆菌)、模型对照组(高脂+高温高湿)3组,每组8只;采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测肝巨噬细胞TLR4mRNA,免疫组化技术检测肝巨噬细胞NF-κBp65活化。结果:在感染6h、12h、24h等不同时相点,湿热模型组TLR4mRNA、NF-κBp65表达与模型对照组、正常组比较均有非常显著增强(P<0.01);湿热模型组在6h、12h、24h等不同时相点,TLR4mRNA、NF-κBp65表达逐渐增强,且不同时相点之间比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:靶细胞TLR4mRNA适量表达及NF-kB激活既是湿热病证的主要致病机理,又是湿热病证的相关性指标。

固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织NF-κBp65 mRNA表达的影响

目的:观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织NF-κBp65 mRNA蛋白表达的影响。方法:采用肌注氢化可的松注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织NF-κBp65 mRNA表达。结果:固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗NF-κBp65 mRNA表达增强,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:固肾培元方可能通过调节耳蜗相关凋亡因子NF-κBp65 mRNA的表达而达到改善听力、保护耳蜗结构与功能的目的。

甘露消毒丹对湿热证大鼠内毒素转导信号的动态干预

目的:观察甘露消毒丹对温病湿热证大鼠细胞内毒素特异性受体LBPmRNA、CD14mRNA、TL-R4mRNA及NF-κBp65表达变化的动态干预,深入探讨清热化湿方的治疗机制。方法:分为正常组、湿热模型组(高脂+高温高湿+大肠杆菌)、清热化湿组;采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测肝巨噬细胞LBPmRNA、CD14mRNA、TLR4mRNA,免疫组化技术检测肝巨噬细胞NF-κBp65活化。结果:模型组在感染6h、12h、24h等不同时相点LBPmRNA、CD14mRNA、TLR4mRNA、NF-κB表达非常显著增强,且不同时相点之间比较均有显著性差异,说明随着病程的发展,湿热模型LBPmRNA、CD14mRNA、TL-R4mRNA、NF-κB表达逐渐增强。治疗组6h、12h、24h等不同时相点比较,LBPmRNA、CD14mRNA、TL-R4mRNA表达减弱,具有非常显著性差异;24h时相点治疗组与模型组比较LBPmRNA、CD14mRNA、TL-R4mRNA表达减弱有非常显著性差异,但仍未恢复正常,与正常组比较仍有极显著性差异,说明LBPmR-NA遏制衰减是一个缓慢的过程。而治疗组NF-κB激活6h、12h、24h各时相点间比较均无显著性差异;且与正常组比较NF-κB激活均无显著性变化。结论:甘露消毒丹对温病湿热证大鼠肝巨噬细胞LBPm-RNA及NF-κB的激活具有较好的干预调控作用,能中止炎症介质的转录,限制急性炎症反应。

临床营养

抗性淀粉干预糖尿病胰岛素抵抗的临床随机对照研究；高蛋白膳食对限食大鼠肠屏障功能的保护作用；降血压肽对人脐静脉内皮细胞eNOS、iNOS、ET-1mRNA表达的影响；

肠炎清对免疫复合溃疡型结肠炎模型大鼠结肠组织NF-κB蛋白表达和TLR4、MyD88基因表达的影响

[目的]观察肠炎清对免疫复合溃疡型结肠炎模型(ICUC)大鼠结肠组织核因子-κB(NF-κB)蛋白表达及Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)基因表达的影响,探讨其治疗IBD的作用机制。[方法]采用三硝基苯磺酸(TNBS)加免疫复合法造模。将大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、肠炎清低、中、高剂量组(8.33、16.67、33.33ml/kg)、柳氮磺吡啶(SASP)组(0.5g/kg)。造模后第2天,用药组分别给予相应药物灌胃,7d后,麻醉处死大鼠,取新鲜结肠标本。采用免疫组化法检测NF-κBp65的蛋白表达,实时定量PCR法(qRT-PCR)检测TLR4mRNA、MyD88mRNA的表达。[结果]免疫组化结果 NF-κBp65在各组各只动物均可见阳性表达,其中肠炎清高剂量组及SASP组可显著下调NF-κBp65的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。PCR结果:造模后动物结肠组织TLR4mRNA、MyD88mRNA的表达量均有升高。与模型对照组比较,各给药组TLR4 mRNA、MyD88mRNA表达均有不同程度的下调,但差异无统计学意义。[结论]肠炎清能下调NF-κBp65蛋白表达、TLR4、MyD88基因表达,其作用机制可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号转导通路有关。