RANKL/RANK通路介导神经母细胞瘤细胞迁移的机制探讨

目的:探讨RANKL/RANK通路对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)SH-SY5Y细胞系细胞侵袭和转移的作用机制。方法:通过pcDNA3.1^+-RANKL和siRNA-RANKL转染NB SH-SY5Y细胞系过表达或沉默外源基因RANKL;细胞增殖实验(cell counting kit-8,CCK-8)检测外源基因RANKL转染NB SH-SY5Y细胞系对细胞增殖的影响;划痕试验检测外源基因RANKL转染NB SH-SY5Y细胞系对细胞迁移的影响;Western blot实验检测外源性基因RANKL转染NB SH-SY5Y细胞系后细胞内基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)表达变化。结果:通过pcDNA3.1^+-RANKL和siRNA-RANKL对NB SH-SY5Y细胞系转染外源性RANKL基因后三组NB细胞增殖能力无统计学差异;RANKL基因过表达后NB SH-SY5Y细胞迁移能力增强(P<0.01),RANKL沉默后NB SH-SY5Y细胞迁移能力减弱(P<0.01);RANKL基因过表达后NB SH-SY5Y细胞内MMP9、MMP2表达增强(P<0.05、P<0.001),RANKL沉默后NB SH-SY5Y细胞内MMP9、MMP2表达减弱(P<0.05、P<0.01)。结论:RANKL/RANK通路介导NB细胞迁移,并可能通过抑制细胞内MMP2、MMP9表达实现。

壳寡糖对牙周炎大鼠牙槽骨吸收及Th17/Treg平衡和OPG/RANKL/RANK通路的影响

目的:探讨壳寡糖对牙周炎大鼠牙槽骨吸收及Th17/Treg平衡和OPG/RANKL/RANK通路的影响。方法:建立牙周炎大鼠模型,随机分为对照组、模型组、壳寡糖低剂量组、壳寡糖中剂量组、壳寡糖高剂量组和甲硝唑组,每组12只,另取12只作为对照组。分组处理后,评估牙龈指数、牙槽骨吸收值;H-E染色观察牙周组织病理形态学变化;流式细胞术检测外周血中Th17/Treg细胞比值;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清中IL-17、TGF-β、RAN-KL、OPG水平,实时荧光定量(qRT-PCR)检测各组大鼠牙周组织OPG、RANKL mRNA表达水平。采用SPSS 24.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,模型组大鼠牙周组织呈现牙周膜纤维束断裂、排列紊乱,毛细血管扩张增生,炎症细胞浸润等病理损伤;牙龈指数、牙槽骨吸收值、Th17/Treg比值、血清RANKL及IL-17水平、牙周组织RANKL mRNA水平显著升高(P<0.05),血清OPG及TGF-β水平、牙周组织OPG mRNA水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,壳寡糖低,中、高剂量组和甲硝唑组大鼠牙周组织病理损伤减轻;牙龈指数、牙槽骨吸收值Th17/Treg比值、血清RANKL及IL-17水平、牙周组织RANKLmRNA水平显著降低(P<0.05),血清OPG及TGF-β水平、牙周组织OPG mRNA水平显著升高(P<0.05),且壳寡糖各组呈剂量依赖性,壳寡糖高剂量组与甲硝唑组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:壳寡糖可促使Th17/Treg平衡恢复正常,上调OPG表达,下调RANKL表达,抑制牙周炎大鼠牙槽骨吸收,改善其临床症状。

Denosumab与破骨细胞RANKL/RANK通路

Denosumab(狄诺塞麦)是一种人工合成、完全人源化、可与RNAKL结合的单克隆抗体(IgG2抗体),对人源RANKL具有很高的亲和力和特异性^([1]),具有较好的骨吸收抑制作用,是以破骨细胞RANKL/RANK信号调控通路为靶点的骨质疏松靶向治疗药物,并可降低恶性肿瘤骨转移患者骨骼相关事件(SRE)的发生、延缓骨痛的进展。本文综述了狄诺塞麦抑制骨吸收的生理作用机制,狄诺塞麦治疗骨质疏松和恶性肿瘤骨转移的研究进展,为狄诺塞麦在临床的应用提供更好的循证医学证据。

RANKL/RANK通路在破骨细胞活性调节及骨溶解中的作用

人工关节置换术是二十世纪骨科领域的革命性进步之一。然而，随着关节置换病例数的增加和时间的延长，假体晚期松动问题日益突出。据统计，在假体置换15～20年后，10～15％的人工关节将发生假体失效。引起假体失效的最主要原因是假体松动，而磨损颗粒诱导的破骨细胞性骨溶解是导致假体松动的最重要因素。尽管随着假体材料的改进，假体磨损日渐减少，但由于假体组件间的相对运动和材料的电解及退变，

替牙期乳牙牙根及牙槽骨吸收过程中RANKL/RANK通路及其调控的研究进展

乳恒牙替换是一系列复杂的生理过程。乳牙牙根及牙槽骨吸收是这个过程中的重要环节。以往RANK/RANKL通路研究较多的集中到其对破骨细胞的作用,认为RANK将细胞分化等信号传入破骨细胞前体细胞内,从而诱导破骨细胞的增殖、分化、激活和骨吸收等生物学活性。而RANK/RANKL通路在替牙期乳牙牙根及牙槽骨吸收过程中调控作用的研究特别是对破牙细胞的作用,是近年来研究的热点。本文就乳牙牙根以及牙槽骨吸收过程中RANKL/RANK通路及其调控的研究进展进行了综述;同时介绍了可能参与这一过程的众多细胞因子,它们对这一过程起着正向或负向的调节作用。

RANKL/RANK通路介导人乳腺癌MCF-7细胞株对阿霉素耐药机制的研究

目的观察核因子κB活化因子受体(RANK)/核因子κB活化因子受体配体(RANKL)通路对乳腺癌细胞耐药性的影响,并研究其作用机制。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7和人乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF7/ADR,用免疫荧光显微技术及Western blot检测MCF-7及MCF7/ADR中RANK蛋白表达情况;分别用RANKL和RANKL抑制剂人骨保护素(OPG)处理两种细胞,用Western blot检测乳腺癌干细胞相关乙醛脱氢酶1(ALDH1)蛋白表达情况,CCK-8法检测不同浓度的RANKL与OPG处理后MCF-7细胞在阿霉素作用下的细胞存活率。结果免疫荧光显微技术及Western blot结果显示,RANK蛋白在MCF7/ADR中的表达较MCF-7均明显增强(P<0.05)。相同RANKL浓度预处理时,MCF7/ADR中ALDH1蛋白表达均高于MCF-7(P<0.05)。随着RANKL浓度的增高(0、50、100ng·mL^(-1)),两种细胞中的ALDH1蛋白表达均升高;RANKL100ng·mL^(-1)及OPG 500ng·mL^(-1)的共同预处理MCF-7细胞,其ALDH1蛋白的表达明显低于RANKL 100ng·mL^(-1)组(P<0.05)。CCK-8法检测MCF-7细胞在RANKL及OPG预处理后的细胞存活率实验中,在阿霉素浓度为2.5~5μmol·L-1范围内,随着RANKL浓度升高,细胞存活率也随之增高,而RANKL抑制剂OPG可以逆转RANKL的作用(P>0.05)。结论 RANKL/RANK通路参与了乳腺癌耐药过程,其可能通过维持肿瘤干细胞群介导乳腺癌细胞耐药。

基质金属蛋白酶-13介导OPG/RANKL/RANK通路调控骨癌痛

目的 探讨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在大鼠骨癌痛形成中的作用及分子机制。方法 雌性SD大鼠40只,分为假手术组(S组)、骨癌痛组(BCP组)、骨癌痛+生理盐水组(NS组)、骨癌痛+CL-82198组(CL组)。BCP组、NS组、CL组均采用胫骨髓腔内注射等量Walker-256乳腺癌细胞的方法建立大鼠胫骨癌痛模型,术后第7天NS组和CL组分别腹腔注射生理盐水和CL-82198(MMP-13特异性抑制剂)。各组分别于术前1 d、术后7、11、14、21 d测定机械痛阈和热痛阈,痛阈测定结束后处死大鼠,取脊髓和胫骨组织,采用Western blot和qRT-PCR法测定肿瘤组织MMP-13的蛋白及mRNA表达,qRT-PCR法检测胫骨肿瘤组织核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB受体活化因子(RANK)及骨保护素(OPG)mRNA表达情况。结果 与S组比较,BCP组、NS组、CL组术后机械痛阈和热痛阈降低(均P<0.05),与S组相比,BCP组MMP-13蛋白及mRNA水平明显升高,RANK、RANKL表达升高,OPG表达降低(均P<0.05);与NS组比较,CL组术后机械痛阈和热痛阈升高(均P<0.05),MMP-13蛋白及mRNA水平明显降低,RANK、RANKL表达降低,OPG表达升高(均P<0.05)。结论 MMP-13参与调控大鼠骨癌痛,其机制可能与下调OPG/RANKL/RANK信号通路中RANKL、RANK表达,上调OPG表达及OPG/RANKL比值有关。

RANKL/RANK通路及其靶向药物地诺单抗在骨科疾病中的应用

RANKL/RANK通路可激活下游的TRAF6、NF-κB、MAPK等信号从而调节破骨细胞的分化和增殖,是治疗许多骨疾病的关键靶点通路之一。地诺单抗是一种抗RANKL单克隆抗体,目前已被批准应用于临床。在骨质疏松、骨转移瘤、多发性骨髓瘤、骨巨细胞瘤、动脉瘤样骨囊肿等疾病中,地诺单抗能够有效缓解病人症状,增强手术效果,并可能拥有延长骨转移瘤病人生存期等益处。与经典药物唑来膦酸相比,地诺单抗表现出更强的安全性及耐受性。

基于肾主骨理论探讨杜仲通过调控OPG/RANKL/RANK通路对去势骨质疏松大鼠的影响

目的基于肾主骨理论探讨杜仲对去势骨质疏松大鼠的影响。方法大鼠分为对照组、模型组、阿法骨化醇组(0.05μg/kg)、杜仲组(2.76 g/kg),每组20只,除对照组外,其余组大鼠建立去势骨质疏松性骨折模型,灌胃给予相应药物,12周后检测各组大鼠骨密度、血清骨生成指标、尿液骨代谢指标,以及OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠骨密度、股骨质量和压碎力、血清ALP活性、骨钙素水平以及骨组织OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),尿液钙和磷水平升高(P<0.05);与模型组比较,阿法骨化醇组和杜仲组大鼠骨密度、股骨质量和压碎力、血清ALP活性、骨钙素水平以及骨组织OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05),尿液钙和磷水平降低(P<0.05);与阿法骨化醇组比较,杜仲组OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),尿液钙和磷水平降低(P<0.05)。结论杜仲可通过减少钙磷流失,激活OPG/RANK/RANKL通路,进而缓解大鼠骨质疏松症状,起到补肾生骨作用。

金雀异黄酮酊对去卵巢骨质疏松大鼠OPG/RANKL/RANK通路的影响

目的观察金雀异黄酮酊对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度、血清骨代谢生物标志物以及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)和破骨细胞分化因子(receptor activator of NF-κB,RANKL)表达的影响,探讨其抗骨质疏松的作用机制。方法将30只3月龄SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组和金雀异黄酮酊组,通过去卵巢法构建骨质疏松大鼠模型,给予金雀异黄酮酊外用喷涂,治疗8周后分别测定大鼠股骨骨密度,采用Elisa法检测血清骨碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)及血清Ⅰ型胶原交联C-末端肽(S-CTX)等骨代谢生物标志物,采用Western Blot法检测OPG和RANKL蛋白表达水平。结果与假手术组比较,去卵巢组大鼠子宫质量、血清雌激素水平、股骨骨密度、血钙、血磷和OPG蛋白表达水平均降低,而体质量、ALP、OC、S-CTX和RANKL蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);采用金雀异黄酮酊治疗8周后,与模型组比较,金雀异黄酮酊组体质量、ALP、OC、S-CTX和RANKL蛋白表达水平降低,而子宫质量、血清雌激素水平、股骨骨密度、血钙、血磷和OPG蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论金雀异黄酮酊可调节骨代谢,显著提高骨质疏松大鼠的骨密度,可能与调控OPG/RANKL/RANK通路蛋白表达水平有关。

肾阳虚COPD合并骨质疏松大鼠肠道菌群、OPG/RANKL/RANK通路变化及益生菌的治疗作用

目的研究肾阳虚慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并骨质疏松大鼠肠道菌群、骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子κB受体活化因子(RANK)通路变化及益生菌的治疗作用。方法雄性SD大鼠(8~10周龄、体重180~200 g)随机分为对照组、模型组、益生菌组,每组8只。模型组和益生菌组大鼠进行肾阳虚COPD合并骨质疏松建模,建模成功后模型组给予生理盐水灌胃、益生菌组给予益生菌[0.9×10^(9)CFU/(g•kg•d)]灌胃,持续28 d。检测肺功能用力肺活量(FVC)、第0.2秒用力呼气量(Fev 0.2),股骨的骨密度(BMD),血清中干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)的水平,肺组织和骨组织中OPG、RANK、RANKL的mRNA表达水平。结果模型组的FVC、Fev 0.2、BMD、血清ALP和PINP水平以及肠道菌群丰富度的Ace指数、Chao1指数、Shannon指数、肺组织和骨组织中OPG的mRNA表达水平均低于对照组,血清IFN-γ/IL-4比例、IFN-γ水平、TRAP水平、β-CTX水平、肺组织和骨组织中RANK与RANKL的mRNA表达水平均高于对照组(均P<0.05);益生菌组的FVC、Fev 0.2、BMD、血清ALP和PINP水平以及肠道菌群丰富度的Ace指数、Chao1指数、Shannon指数、肺组织和骨组织中OPG的mRNA表达水平均高于模型组,血清IFN-γ/IL-4比例、IFN-γ水平、TRAP水平、β-CTX水平、肺组织和骨组织中RANK与RANKL的mRNA表达水平均低于模型组(均P<0.05)。结论肾阳虚COPD合并骨质疏松大鼠存在肠道菌群失调和OPG/RANKL/RANK通路异常,补充益生菌显著纠正肠道菌群失调、OPG/RANKL/RANK通路异常并改善肺功能和骨密度。

OPG/RANKL/RANK信号通路在脓毒症相关急性肾损伤小鼠中的研究

目的:探讨骨保护素(OPG)/核因子⁃κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子⁃κB受体激活因子(RANK)信号通路因子在脓毒症相关急性肾损伤(SA⁃AKI)小鼠中的改变及可能的作用,为SA⁃AKI的机制研究探索新的思路。方法:通过盲肠结扎穿孔手术(CLP)建立SA⁃AKI模型组(CLP组),对照组为假手术组(Sham组),只行开腹不做盲肠结扎穿孔操作。术后24 h采血并处死留取小鼠肾脏组织,用试剂盒检测血清Scr、BUN水平,酶联免疫测定法(ELISA)检验血清中IL⁃6、TNF⁃α、IL⁃1β水平,苏木精⁃伊红染色(HE)观测肾组织病理学变化,聚合酶链反应(RT⁃qPCR)和蛋白质印迹实验(Western blotting)检验小鼠肾组织中OPG、RANKL、RANK的mRNA和蛋白水平。结果:与Sham组对比,CLP组Scr、BUN、IL⁃6、TNF⁃α、IL⁃1β水平显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Sham组对比,CLP组肾小球充血水肿,部分缺血皱缩,球囊间隙扩大,部分肾小管中可见坏死的上皮细胞,管腔扩大,肾间质水肿,少量炎性细胞浸润;与Sham组相比较,CLP组肾组织中OPG和RANK的mRNA表达显著上调,而RANKL的mRNA表达明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Sham组相比较,CLP组肾脏组织中OPG及RANK的蛋白表达均升高,而RANKL的蛋白表达明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:在脓毒症的小鼠模型中OPG及RANK表达升高,RANKL表达下降,表明OPG/RANKL/RANK信号通路可能参与了SA⁃AKI的病理生理过程。

基于AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路研究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠愈合的机制

目的基于AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(sirt)1/核转录因子(NF)-κB受体活化蛋白配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路,探究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠骨折愈合的机制。方法将大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组(6.25 g/kg)、补阳还五汤中剂量组(12.50 g/kg)和补阳还五汤高剂量组(25.00 g/kg)。除假手术组外,其余组均构建骨质疏松性骨折模型,并给予相应剂量药物干预。检测大鼠骨密度(BMD)值、骨折愈合评分及骨痂体积;自动生化分析仪测定血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素、钙和磷水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测股骨组织中的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠骨痂组织的病理形态;Western印迹检测股骨组织中AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组骨痂骨小梁分布稀疏,成骨细胞大量减少且有纤维组织生成,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著升高(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,补阳还五汤低、中、高剂量组骨痂骨小梁分布较为密集,成骨细胞增加,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著降低(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论补阳还五汤可能通过抑制氧化应激反应,调节AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路,发挥对骨质疏松骨折大鼠的治疗作用。

红景天苷调节OPG/RANKL通路对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征大鼠骨质流失的影响

目的探究红景天苷(Sal)调节骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体激活剂配体(receptor activator of nuclear factorKB ligand,RANKL)通路对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)大鼠骨质流失的影响。方法将大鼠随机分为control组、OSAS组、Sal-L、Sal-M、Sal-H组(分别灌胃Sal 17.5、35、70 mg/kg),每组12只。除control组,其余组均采用缺氧和复氧循环复制OSAS大鼠模型。分别利用骨密度仪、三点弯曲实验、Micro CT测定大鼠股骨骨密度、生物力学及微结构变化;ELISA法检测血清骨钙素(osteocalcin,BGP)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原交联C-末端肽(cross linked C-telopeptide of type I collagen,CTX-I)水平;RT-PCR检测股骨中OPG、RANKL mRNA水平;Western blot检测股骨OPG/RANKL通路蛋白表达。结果与control组比较,OSAS组大鼠骨密度、最大强度、最大负荷、骨小梁骨体积分数(Tb.BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、BGP、ALP、OPG mRNA及蛋白表达、OPG/RANKL比值降低,CTX-I、RANKL mRNA及蛋白表达升高(P<0.05);与OSAS组比较,Sal-L、Sal-M、Sal-H组大鼠骨密度、最大强度、最大负荷、Tb.BV/TV、Tb.N、Tb.Th以及BGP、ALP、OPG mRNA和蛋白表达、OPG/RANKL比值依次升高,CTX-I、RANKL mRNA及蛋白表达依次降低,其中Sal-H组上述变化最为显著(P<0.05)。结论Sal通过升高OPG表达,降低RANKL表达,促进骨形成,抑制骨吸收,从而减少OSAS大鼠骨质流失。

超前镇痛方案对跟骨关节内骨折患者OPG/RANKL信号通路因子表达的影响

目的 探讨跟骨关节内骨折患者采用超前镇痛方案对骨保护素(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路因子表达的影响。方法 回顾性选取2017年2月至2022年2月大庆油田总医院收治的跟骨关节内骨折患者100例,依据镇痛方案不同分为对照组和观察组,每组各50例。对照组患者接受常规性静脉自控镇痛方案,观察组患者接受地佐辛超前镇痛联合常规性静脉自控镇痛方案。统计分析两组围手术期指标(术中出血量、手术时间、术后引流量、术后引流时间、住院时间),麻醉前、手术前、手术后即刻的血流动力学(平均动脉压、心率),手术前、手术后1 d的应激反应[C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)],手术后即刻,手术后6 h、12 h、1 d的镇静[Ramsay镇静评分(RSS)、视觉模拟评分法(VAS)评分]和镇痛效果,以及手术后1 d、手术后1周的血清OPG、RANKL含量和术后并发症发生情况。结果 两组患者的术中出血量、手术时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者的术后引流量为(59.86±2.54) mL,少于对照组[(110.97±9.41) mL],术后引流时间、住院时间分别为(123.23±9.82) h、(5.61±0.45) d,均短于对照组[(178.22±9.32) h、(8.01±0.31) d],差异均有统计学意义(P<0.05)。麻醉前、手术前、手术后即刻,两组患者的平均动脉压、心率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。手术后1 d,两组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6、PGE2水平均明显高于手术前,观察组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6、PGE2水平分别为(5.11±1.47) mg/L、(43.15±7.51)μg/L、(32.52±5.31) ng/L、(138.11±12.68) pg/mL,均明显低于对照组[(21.42±3.44) mg/L、(87.60±13.56)μg/L、(75.77±21.35) ng/L、(144.60±15.20) pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。与手术后即刻比较,两组患者手术后6、12、24 h的RSS评分、VAS评分均逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05);手术后6、12、24 h,两组患者的RSS评分、VAS评分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。手术后1周,两组患者的血清OPG、RANKL含量均高于手术后1 d,且观察组患者的血清OPG、RANKL含量分别为(188.86±21.47)、(108.37±10.43) pg/mL,均高于对照组[(177.75±19.23)、(98.76±8.26) pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的术后并发症发生率为8.00%,明显低于对照组(32.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 超前镇痛方案能够促进跟骨关节内骨折患者OPG/RANKL信号通路因子表达及患者术后康复,提高镇痛效果,减少术后并发症的发生。

中药干预RANKL信号通路调控破骨细胞治疗骨质疏松症的作用机制

骨质疏松症是一种常见的骨骼系统疾病,其主要特征是骨密度减少和骨质结构疏松,易于发生骨折。骨稳态的平衡维持了骨骼的结构和功能。当骨吸收过度或骨形成不足时,骨稳态被打破,导致骨质疏松症的发生。核因子-κB(NF-κB)受体活化因子配体(RANKL)信号通路在骨稳态调节、骨质疏松症发生发展过程中扮演着重要的角色。RANKL是一种细胞因子,通过与其受体核因子-κB受体激活因子(RANK)结合,促进破骨细胞的形成和活化,导致骨质疏松症的发生。中药作为中医治疗体系中的核心组成部分,在防治骨质疏松症方面有着悠久的历史、丰富的实践经验和深远的潜力。针对中药干预RANKL信号通路调控破骨细胞治疗骨质疏松症的作用机制,近年来取得了一些研究进展。研究表明,中药可通过抑制RANKL的表达和活性、降低破骨细胞的形成和活化、促进骨形成、调节骨吸收和骨形成平衡、抗炎和抗氧化等,发挥治疗骨质疏松症的作用。同时,中药具有整体调节、副作用较少、患者接受度和满意度较高等优势,在防治骨质疏松症方面占据重要地位。因此,笔者系统梳理了最新中药干预RANKL信号通路调控破骨细胞治疗骨质疏松症的相关文献,旨在临床防治骨质疏松症的中药新药研发提供一定依据。

Er,Cr:YSGG激光治疗对高糖环境下微螺钉周围炎症及对RANK/RANKL信号通路的影响

目的:探讨铒铬铱钪镓石榴石(Er,Cr:YSGG)激光治疗对高糖环境下微螺钉周围炎症治疗的疗效,并分析与RANK/RANKL信号通路的关系。方法:20只正常健康雄性新西兰兔随机分为A组(微螺钉周健康组)、B组(微螺钉周围炎症组)、C组(微螺钉周围炎症激光治疗组),皮下注射2%四氧嘧啶建立糖尿病模型,下颌双侧无牙区植入微螺钉种植体,3个月后,A组进行菌斑控制,B组、C组用丝线拴结于微螺钉种植体颈部基台处引入炎症,C组予以Er,Cr:YSGG激光治疗。记录菌斑指数、探诊深度、牙龈指数和龈沟液量;ELISA检测龈沟液炎性细胞白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;CBCT检查微螺钉种植体周围炎周围骨吸收状态;Western blot检测牙龈组织中核因子κB(NF-κB)/NF-κB受体性活化因子(RANK)/NF-κB受体活化因子配体(RANKL)通路相关蛋白表达。结果:CBCT检查显示与A组比较,B组微螺钉种植体周围牙槽骨有明显的炎性吸收,微螺钉种植体-骨界面愈合差,骨附着不足;与B组比较,C组一侧牙槽骨有少量新生纤维成骨。与A组比较,B组PI、PD、GI水平较高,龈沟液量较多,龈沟液中IL-1β、TNF-α和IL-6水平较高,牙龈中NF-κBp65、RANK、RANKL蛋白表达水平较高(P<0.05);与B组比较,C组PI、PD、GI水平较低,龈沟液量较少,龈沟液中IL-1β、TNF-α和IL-6水平较低,牙龈中NF-κBp65、RANK、RANKL蛋白表达水平较低(P<0.05)。结论:Er,Cr:YSGG激光治疗糖尿病兔颌骨微螺钉种植体周围炎的疗效显著,且在NF-κB/RANK/RANKL通路表达调控上可能发挥一定作用。

基于OPG/RANKL/RANK信号通路探讨傣药肾叶山蚂蝗的抗骨质疏松作用

目的探讨傣药肾叶山蚂蝗对去卵巢骨质疏松大鼠模型的作用及其机制。方法60只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、仙灵骨葆组(0.24 g·kg^(-1))、肾叶山蚂蝗低(1.35 g·kg^(-1))、中(2.70 g·kg^(-1))和高剂量组(5.40 g·kg^(-1))。采用双侧卵巢切除术建立骨质疏松模型,药物干预14周后,检测血清中骨钙素(Bone gamma-carboxyglutamic-acid-containing Proteins,BGP)、骨保护素(Ostoeprotegerin,OPG)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)的含量,苏木精-伊红(HE)染色法观察骨组织中骨小梁的变化;实时荧光定量PCR(qPCR)检测大鼠胫骨中OPG/RANKL/RANK信号通路相关基因的表达。另取破骨细胞前体细胞株RAW264.7,分为阴性对照组、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)组、仙灵骨葆组、肾叶山蚂蝗低、中、高剂量组。阴性对照组不加RANKL,其余各组使用50 ng·mL^(-1) RANKL诱导,药物组同时分别加入不同浓度的仙灵骨葆和肾叶山蚂蝗含药血清进行干预。10天后进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,观察破骨细胞分化情况,qPCR测定OPG/RANKL/RANK信号通路相关基因的表达。结果与假手术组比较,模型组血清中OPG含量显著降低(P<0.01),ALP和BGP显著升高(P<0.01),骨小梁显著减少,断裂,排列稀疏,骨小梁之间间距大,胫骨组织OPG mRNA表达显著减少(P<0.01),RANKL、肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)、活化T-细胞核因子1(NFATc1)、组织蛋白酶K(CTK)和降钙素受体(CalcR)mRNA水平的表达升高(P<0.01),肾叶山蚂蝗干预后能显著改善以上指标。RAW264.7培养10天后,与阴性对照组比较,RANKL组破骨细胞明显增多,肾叶山蚂蝗能显著降低破骨细胞的数量,OPG/RANKL/RANK通路相关基因表达趋势和动物实验一致。结论肾叶山蚂蝗能有效改善去卵巢大鼠模型的骨质疏松,其作用机制可能是通过抑制破骨细胞增殖分化,调节OPG/RANKL/RANK信号通路来实现。

RANKL/RANK信号通路在女性常见癌症中的研究进展

癌症,即恶性肿瘤,是一类严重威胁人类健康的疾病。近些年乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌和子宫内膜癌发病率和死亡率逐年升高,严重威胁女性的生命健康[1]。为了不断优化女性癌症的诊疗方案,众多科研工作者对以上几种女性常见癌症的发病机制进行了深入研究。

RANKL/RANK/OPG信号通路调控磨损颗粒诱导的小鼠炎性骨溶解

目的探讨RANKL/RANK/OPG信号通路对磨损颗粒诱导的小鼠炎性骨溶解的影响。方法将45只小鼠随机分为对照组、模型组和骨保护素(OPG)组,每组15只,制备小鼠磨损颗粒刺激气囊植骨的骨溶解模型。OPG组小鼠于术后第1天腹腔注射OPG(3 mg/kg),1次/d,对照组和模型组小鼠同期给予等量生理盐水,持续2周。通过HE染色观察气囊植骨壁组织中炎症反应情况;TRAP染色检测气囊植骨壁组织中破骨细胞数目;ELISA检测气囊植骨壁组织中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;免疫组化检测气囊植骨壁组织中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB受体活化因子(RANK)、OPG蛋白阳性表达情况。结果与对照组比较,模型组气囊植骨组织中多种炎症细胞浸润,存在明显的炎症反应,破骨细胞数、骨溶解面积均增加,IL-6、TNF-α表达水平升高,RANKL、RANK表达增加,而OPG表达减少。与模型组比较,OPG组气囊植骨组织中少量炎症细胞浸润,存在轻度炎症反应,破骨细胞数、骨溶解面积均减少,IL-6、TNF-α表达水平降低,RANKL、RANK表达减少,而OPG表达增加。结论RANKL/RANK/OPG信号通路可参与调控磨损颗粒诱导的小鼠炎性骨溶解,通过给予外源性OPG能显著抑制磨损颗粒诱导的炎性骨溶解。