RANKL基因rs9594738位点与贵州燃煤污染型地氟病的相关性

目的:探讨核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因单核苷酸多态性(SNP)与贵州燃煤污染型地氟病的关系。方法:选取燃煤污染型地氟病病区样本365例为病例组,其中地氟重症组(氟斑牙明显且有氟骨症症状者)130例、地氟轻症组(有氟斑牙且无氟骨症症状者)235例,另选贵州省黔南布依族苗族自治州长顺县样本235例为对照组(无氟斑牙及氟骨症症状);采用TaqMan-MGB探针基因分型方法对上述样本RANKL基因的SNP位点rs9594738进行基因分型,分析rs9594738等位基因和基因型在各组间的分布差异。结果:rs9594738位点在地氟重症组与对照组的等位基因分布频率差异有统计学意义(P<0.05),地氟重症组男女之间基因型频率和等位基因频率差异均有统计学意义(P<0.05);遗传模式分析结果显示,在最优遗传模式显性遗传模式下,地氟重症组rs9594738基因型C/T-T/T可能是地氟重症人群的风险因素(P=0.014,OR=2.08,95%CI=1.16~3.72)。结论:RANKL基因rs9594738位点多态性与贵州省毕节市燃煤污染型地氟病氟骨症的发生可能有关联。

靶向RANKL基因的小分子干扰RNA对核激活因子受体配体和骨保护素基因表达的影响

目前RNA干扰（RNAi）不但用于基因功能的研究，同时也用于疾病的实验性治疗。我们利用RNAi技术降低成骨细胞核激活因子受体配体（RANKL）的表达，观察转染后成骨细胞中RANKL、骨保护素（OPG）mRNA和蛋白的时间变化规律。

骨保护素和RANKL基因单核苷酸多态性对类风湿关节炎易感性及其骨密度和疾病活动性的影响

目的探讨骨保护素基因（TNFRSFllB）1181G〉C（rs2073618）、163A〉G（rs3102735）位点和核因子KB活化因子受体配体（RANKL）基因（TNFRSFll）401A〉G（rs2277438）位点单核苷酸多态性（SNP）对类风湿关节炎（RA）疾病易感性及其骨密度和疾病活动性的影响。方法采用连接酶检测反应（LDR）聚合酶链反应（PCR）方法检测200例RA患者和201名健康对照组骨保护素基因rs2073618、rs3102735位点和RANKL基因rs2277438位点SNP；采用双能X线骨密度仪（DEXA）法测定其股骨和腰椎部位骨密度。比较其等位基因分布频率、基因型频率及单倍体型在2组中的分布，并比较不同基因型RA患者骨密度及疾病活动性的差别。统计学方法采用方差分析，t检验和矿检验。结果①骨保护素基因rs2073618位点、rs3102735位点和RANKL基因rs2277438位点各等位基因及基因型分布频率在RA组与对照组中差异均无统计学意义（尸〉0．05）。3个位点单倍体型研究表明：骨保护素和RANKL基因单倍体型（±2073618G—rs2277438G—rs3102735G）携带者RA疾病易感性明显降低（1．5％与6．0％，OR：0．216，95％CI：0．081。0．575，P=0．0008），骨保护素和RANKL基因单倍体型（rs2073618G．rs2277438A—rs3102735G）携带者RA易感性明显增加（14．5％与8．4％，OR：1．862，95％CI：1．179～2．943，P=-0．007）。②RANKL基因±2277438位点表达为纯合型（AA和GG型）的RA患者（62例）腰椎3（1．05±0．22与0．93±0．26，t=2．314，P=-0．023）、腰椎4（1．06±0．24与0．94±0．28，t=2．207，P=0．030）、腰椎2-4（1．04±0．21与0．89±0．28，t=2．788，P=0．007）部位骨密度均明显高于杂合型（AG型）RA患者（39例）；骨保护素基因rs2073618和±3102735位点不同基因型RA患者间骨密度差异无统计学意义（P〉0．05o③骨保护素基因±2073618位点表达为纯合型（CC、GG型）的RA患者（60例）在以下疾病活动性指标上明显高于表达为杂合型（CG型）的RA患者（40例）：压痛关节数（13±7与10±6，t=2．154，P=-0．034）、压痛关节指数（19±11与13±9，t=2．318，P=0．023）、疼痛视觉模拟（VAS）评分（5．7±1．9与4．8±1．8，t=2．481，P=0．015）。RANKL基因rs2277438位点、骨保护素基因rs3102735位点不同基因型RA患者间各疾病活动性指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论骨保护素基因rs2073618、m3102735位点和RANKL基因rs2277438位点SNP与中国籍汉族RA患者易感性无关，但骨保护素和RANKL基因单倍体型（rs2073618G—rs2277438G-rs3102735G）为RA的保护性因素，而单倍体型rs2073618G-rs2277438A-rs3102735G）是危险因素。RANKL基因rs2277438位点SNP与RA骨代谢相关；骨保护素基因m2073618位点SNP与RA患者疾病活动性相关。

RANKL基因在胃癌中的表达及与病理因素的关系

目的 探讨RANKL蛋白在胃癌诊断、转移及预后判断中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测 4 5例胃癌组织、2 6例癌旁粘膜组织、10例正常胃粘膜上皮中RANKL蛋白的表达情况。结果 4 5例胃癌组织中RANKL蛋白表达阳性 2 1例 (47% )。在直径≥ 5cm肿瘤、肿瘤穿透浆膜、淋巴结转移阳性以及Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期胃癌中RANKL蛋白的表达显著升高 (P <0 0 5 ) ,2 6例癌旁粘膜中RANKL蛋白呈弱阳性表达 5例 ,正常胃粘膜中RANKL蛋白呈阴性表达。RANKL蛋白在胃癌组织中的表达与在癌旁组织、正常胃粘膜中的表达差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论检测RANKL蛋白表达有助于胃癌的诊断。

甲状旁腺激素在体外对破骨细胞分化及骨重吸收能力的影响

目的 探讨甲状旁腺激素(PTH)在体外直接对破骨细胞(OCs)分化及骨吸收能力 的影响,以及其与成骨细胞(OBs)中核因子κB受体激活剂受体配体(ligand of receptor activator of nuclear factor kappa B,RANKL)基因和OPG(osteoprotegerin)基因表达的关系。方法 体外直接 用PTH诱导C3h小鼠全骨髓分化出OCs,用牙片小坑法(pits assayr)观察Ocs对骨的重吸收能 力。并采用多重RT-PCR方法检测在不同PTH作用浓度和不同作用时间的条件下,OBs中 RANKL基因和OPG基因的表达情况。结果 (1)PTH在体外可诱导C3h小鼠全骨髓分化出OCs, 且在一定浓度范围内,随着PTH增加,OCs的形成数目和骨组织的破坏程度随之增加;(2)在 一定PTH浓度和时间范围内,OBs中的RANKL-mRNA及OPG-mRNA表达呈剂量依赖性和时间依 赖性。结论 PTH在体外可通过诱导RANKL基因和OPG基因表达而直接影响OCs的分化和骨 重吸收功能。