珠子参提取物促进大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化及调节OPG/RANKL表达的作用

目的探讨珠子参对原代大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化及对骨保护蛋白(OPG)和核因子-κβ受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法离体培养大鼠原代成骨细胞;采用MTT法、Ed U染色法、测定碱性磷酸酶法、矿化结节染色法考察不同浓度珠子参提取物对成骨细胞活力、增殖、分化和矿化等作用的影响;采用Real time PCR法和Western blot法检测珠子参提取物对成骨细胞OPG及RANKL mRNA和蛋白表达的调节作用。结果珠子参提取物浓度在500μg·mL^-1时可提高成骨细胞活力;在300、400和500μg·mL^-1时可显著提高成骨细胞增殖、分化和矿化能力,提高OPG mRNA和蛋白的表达,降低RANKL mRNA和蛋白表达,且呈现剂量依赖性。结论珠子参提取物可在一定浓度范围内提高大鼠成骨细胞的活力、增殖、分化和矿化,同时可调节OPG/RANKL表达,这可能是其防治骨质疏松症的作用机制。

rhIL-1α、1,25-(OH)_2D_3对人牙周膜成纤维细胞表达RANKL和OPG的影响研究

目的研究rh IL-1α、1,25-(OH)2D3对人牙周膜成纤维细胞表达RANKL和OPG的影响。方法将人牙周膜成纤维细胞分别放在含有纯培养液、含rh IL-1α培养液、含1,25-(OH)2D3培养液和含有rh IL-1α、1,25-(OH)2D3联合培养基中培养,并分别标记为D组、A组、B组和C组,培养48 h后,用荧光定量RT-PCR技术检验。结果 A组培养基中细胞表达RANKL和OPG均有上升,且RANKL/OPG比值也增加;B组培养基中细胞表达RANKL上升,但OPG下降,RANKL/OPG比值下降;C组培养基中RANKL上升,但对RANKL/OPG无明显影响。结论 rh IL-1α、1,25-(OH)2D3对人牙周膜成纤维细胞表达RANKL和OPG有较大影响,且rh IL-1α、1,25-(OH)2D3联合使用时对RANKL起到了协同作用。值得临床进一步探究。

护骨素及配体在卵巢切除大鼠骨组织的蛋白表达和细胞定位

目的对卵巢切除和假切大鼠骨组织中护骨素(OPG)和配体(RANKL)的表达进行比较,观察不同分化阶段成骨细胞的OPG和RANKL表达变化,深入地探讨成骨细胞对破骨细胞发生的调控作用。方法9月龄雌性大鼠分为卵巢切除组和假切组,相同条件喂养3月后处死,取材制作骨病理切片,用免疫组织化学方法测定大鼠股骨OPG和RANKL的蛋白表达,用图像分析软件对蛋白表达情况半定量分析,对各组数据和组织形态进行分析比较。结果OPG和RANKL蛋白在骨组织表达相对稳定。RANKL主要表达在增殖活跃的成骨细胞和幼稚的骨细胞,OPG主要表达在成熟骨细胞和静息骨衬里细胞。与假切组相比,卵巢切除组骨组织内RANKL表达升高(P<0.01),OPG表达降低(P<0.05)。结论卵巢切除后骨组织中RANKLOPG升高,破骨细胞活性增强,骨转换加快。不同发育阶段的成骨细胞对破骨细胞有不同的调节作用,幼稚阶段表现出对破骨细胞的诱导作用,而成熟阶段则表现为抑制作用。