基于AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路研究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠愈合的机制

目的基于AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(sirt)1/核转录因子(NF)-κB受体活化蛋白配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路,探究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠骨折愈合的机制。方法将大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组(6.25 g/kg)、补阳还五汤中剂量组(12.50 g/kg)和补阳还五汤高剂量组(25.00 g/kg)。除假手术组外,其余组均构建骨质疏松性骨折模型,并给予相应剂量药物干预。检测大鼠骨密度(BMD)值、骨折愈合评分及骨痂体积;自动生化分析仪测定血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素、钙和磷水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测股骨组织中的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠骨痂组织的病理形态;Western印迹检测股骨组织中AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组骨痂骨小梁分布稀疏,成骨细胞大量减少且有纤维组织生成,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著升高(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,补阳还五汤低、中、高剂量组骨痂骨小梁分布较为密集,成骨细胞增加,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著降低(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论补阳还五汤可能通过抑制氧化应激反应,调节AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路,发挥对骨质疏松骨折大鼠的治疗作用。

Er,Cr:YSGG激光治疗对高糖环境下微螺钉周围炎症及对RANK/RANKL信号通路的影响

目的:探讨铒铬铱钪镓石榴石(Er,Cr:YSGG)激光治疗对高糖环境下微螺钉周围炎症治疗的疗效,并分析与RANK/RANKL信号通路的关系。方法:20只正常健康雄性新西兰兔随机分为A组(微螺钉周健康组)、B组(微螺钉周围炎症组)、C组(微螺钉周围炎症激光治疗组),皮下注射2%四氧嘧啶建立糖尿病模型,下颌双侧无牙区植入微螺钉种植体,3个月后,A组进行菌斑控制,B组、C组用丝线拴结于微螺钉种植体颈部基台处引入炎症,C组予以Er,Cr:YSGG激光治疗。记录菌斑指数、探诊深度、牙龈指数和龈沟液量;ELISA检测龈沟液炎性细胞白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;CBCT检查微螺钉种植体周围炎周围骨吸收状态;Western blot检测牙龈组织中核因子κB(NF-κB)/NF-κB受体性活化因子(RANK)/NF-κB受体活化因子配体(RANKL)通路相关蛋白表达。结果:CBCT检查显示与A组比较,B组微螺钉种植体周围牙槽骨有明显的炎性吸收,微螺钉种植体-骨界面愈合差,骨附着不足;与B组比较,C组一侧牙槽骨有少量新生纤维成骨。与A组比较,B组PI、PD、GI水平较高,龈沟液量较多,龈沟液中IL-1β、TNF-α和IL-6水平较高,牙龈中NF-κBp65、RANK、RANKL蛋白表达水平较高(P<0.05);与B组比较,C组PI、PD、GI水平较低,龈沟液量较少,龈沟液中IL-1β、TNF-α和IL-6水平较低,牙龈中NF-κBp65、RANK、RANKL蛋白表达水平较低(P<0.05)。结论:Er,Cr:YSGG激光治疗糖尿病兔颌骨微螺钉种植体周围炎的疗效显著,且在NF-κB/RANK/RANKL通路表达调控上可能发挥一定作用。

基于OPG/RANKL信号通路探讨黄精多糖对糖尿病大鼠骨质疏松骨代谢的影响

目的基于骨保护素/核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)信号通路探讨黄精多糖(PSP)对糖尿病大鼠骨质疏松骨代谢的影响及作用机制。方法选取50只2月龄雄性Wistar大鼠并随机分为对照组、糖尿病骨质疏松(DOP)模型组,高、中、低PSP(H-PSP、M-PSP、L-PSP)组各10只,DOP模型组和PSP组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后饲喂20 w建立DOP模型,造模成功后对照组和DOP模型组灌胃0.9%氯化钠溶液,剂量为10 ml/(kg·d),H-PSP、M-PSP、L-PSP组灌胃PSP溶液,剂量分别为700、400、200 mg/(kg·d),每周检测大鼠体质量。给药8 w后,双能X线骨密度仪检测大鼠股骨骨密度(BMD),酶联免疫吸附试验测定大鼠血清中骨钙素(OC)及尿液中脱氧嘧啶啉(DPD)含量,全自动生化仪检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸性磷酸酶(TRAP)、钙(Ca)、磷(P)及尿钙磷和肌酐(Cre)含量。Western印迹检测股骨OPG、RANKL蛋白表达。结果与对照组比较,造模成功后DOP及PSP组体质量显著增加(P<0.05);给药4 w后,H-PSP、M-PSP组体质量均较模型组明显降低(P<0.05)。给药8 w后,DOP组股骨BMD较对照组显著降低(P<0.05);H-PSP、M-PSP组BMD均较DOP模型组明显升高(P<0.05)。与对照组比较,DOP模型组血清ALP、OC、TRAP、Ca、P及尿Ca、P、DPD/Cre含量显著增加(P<0.05);PSP各剂量组血清ALP、OC、TRAP、Ca、P及尿Ca、P、DPD/Cre均较DOP模型组均有不同程度降低,H-PSP组差异显著(P<0.05)。PSP组股骨组织中RANKL蛋白表达水平较DOP模型组明显降低(P<0.05);各组股骨组织OPG蛋白表达水平均明显升高,H-PSP、M-PSP组与DOP干预组差异有统计学意义(P<0.05)。结论PSP可调节DOP大鼠骨代谢平衡,提高股骨骨密度,对骨质疏松具有改善作用,其作用机制可能与PSP提高OPG蛋白表达和降低RANKL蛋白表达有关。

督灸联合威伐光治疗原发性骨质疏松的临床观察及对OPG/RANKL系统的影响

目的探讨督灸联合光疗对原发性骨质疏松(POP)的临床疗效及对血清骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响,从骨代谢的角度探讨其作用机制。方法72例POP患者随机分为对照组36例和治疗组36例。对照组给予口服碳酸钙和阿法骨化醇治疗,治疗组在对照组基础上使用督灸联合威伐光照射疗法。3个月后测量两组治疗前、治疗后中医证候评分、疼痛视觉模拟评分(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分及血清OPG、RANKL水平变化。结果治疗组临床总有效率(91.1%)显著高于对照组(80.0%,P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗后中医证候评分、VAS、ODI评分及RANKL水平显著降低,血清OPG水平显著升高(均P<0.01);治疗后与对照组比较,治疗组中医证候评分、VAS、ODI评分及RANKL水平显著降低,血清OPG水平及OPG/RANKL比值显著升高(P<0.01,P<0.05)。结论督灸联合光疗可有效改善骨质疏松,其机制可能与调节血清OPG、RANKL的水平有关。

miR-26a在血管钙化中的作用机制

目的探讨血管钙化过程中miR-26a表达差异及其作用机制。方法通过体内和体外实验构建血管钙化模型,利用分子生物学、病理生物学及细胞生物学检测方法,验证血管钙化过程中miR-26a表达差异及可能作用机制。结果与模型组和mimic NC组相比较,miR-26a mimic组碱性磷酸酶活性显著降低(P<0.05)。而inhibitor NC组和miR-26a inhibitor组碱性磷酸酶无显著变化(P>0.05)。与mimic NC组比较,miR-26a mimic组miR-26a、骨保护素(OPG)表达水平显著升高(P<0.05),而骨桥蛋白(OPN)、骨形态发生蛋白(BMP)-2和胶原蛋白(Collagen)Ⅱ表达水平显著降低(P<0.05)。与inhibitor NC组比较,miR-26a inhibitor组miR-26a、OPG、OPN、BMP-2和CollagenⅡ表达水平无显著差异(P>0.05)。结论miR-26a在血管钙化中的作用机制可能与OPG/核因子κB受体激活剂(RANK)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路有关。

类风湿性关节炎患者外周血T细胞RANKL增加且血清Dickkopf1降低

目的探讨骨代谢相关分子在类风湿性关节炎(RA)患者骨代谢异常和疾病进展过程中的作用。方法纳入RA患者66例及健康对照20例,搜集相关临床信息。利用电化学发光免疫分析法检测受试者血清中骨钙素N端中段(OC-N-MID)和1型胶原蛋白交联羧基末端肽(CTX)水平。采用液相悬浮芯片法检测Wnt抑制因子Dickkopf1(DKK1)、核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)含量。利用流式细胞术检测外周血T细胞上RANKL的水平。结果与健康对照组相比,RA患者血清中OC-N-MID、CTX含量无显著性差异,RANKL水平升高,DKK1水平降低。RA患者外周血T细胞上RANKL水平增加,尤其CD3+T细胞亚群上RANKL增加显著。结论 RA患者T细胞上RANKL水平增加,血清中RANKL含量升高,DKK1水平降低。

OPG/RANK/RANKL系统与骨质疏松研究最新进展

骨质疏松是严重威胁中老年人健康的骨科常见病,OPG/RANK/RANKL是参与调节骨重建的最重要的分子系统之一,与骨疾病相关的骨质疏松有密切联系,并已成为药物设计的新靶点.因此,对该系统的深入研究将为骨生理、病理机制阐明及骨疾病防治带来积极影响.

RANKL在人乳牙根生理性吸收过程中的表达

目的:探讨核因子κB受体活化剂配体RANKL在人乳牙根生理性吸收过程中的表达及作用。方法:运用免疫组织化学的方法检测人乳牙根生理性吸收过程中RANKL蛋白的表达。结果:乳牙的破牙细胞、牙髓成纤维细胞及成牙本质细胞胞浆中RANKL免疫组化染色阳性,且表达高于恒牙组,差异有统计学意义(P<0.05),乳牙牙周韧带成纤维细胞RANKL染色结果与恒牙组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RANKL在人乳牙牙根生理性吸收过程中有表达,其可能对乳恒牙替换起到一定的促进作用。

雌激素受体β对牙周膜成纤维细胞RANKL表达的影响

目的:研究雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament,HPLF)核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)表达的影响。方法:采用基因干涉方法抑制了HPLF细胞中ERβ基因的表达,用雌激素干预ERβ抑制的和未抑制的HPLF细胞,研究细胞RANKL表达的情况。结果:雌激素明显降低了ERβ抑制的HPLF细胞RANKL的表达,但对ERβ未抑制的HPLF细胞RANKL的表达没有显著影响。结论:雌激素可能通过ERβ抑制牙周膜成纤维细胞RANKL的表达。

LC调节人成骨样MG-63细胞表达OPG、RANKL分子机制的研究

目的探讨大黄酸哌嗪雌酚酮(rhein-piperizinyl-estrone,命名为LC)调节人成骨样MG-63细胞表达骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、NF-κB激活受体配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的分子机制。方法在原工作基础上,选择兼有两种雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究模型,采用RT-PCR、免疫印迹及小RNA干扰等技术,探讨LC对人成骨细胞产生的骨吸收调节因子OPG、RANKL表达的作用及作用机制。结果 LC可上调MG-63细胞OPG表达及下调RANKL表达,该作用可被纯ER阻断剂ICI 182,780完全阻断,应用小RNA干扰技术进一步证实LC对成骨细胞OPG、RANKL表达的调节作用主要是由ERα介导的。结论 LC调节成骨细胞表达OPG、RANKL是经ER途径、主要是由ERα介导的。

牙周炎大鼠正畸性牙根吸收中RANKL、TNF-α在牙周膜压力侧的表达

目的:探讨核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在牙周炎大鼠正畸性牙根吸收中牙周膜压力侧的表达。方法:40只SD雄性大鼠随机分为牙周炎组和对照组,每组20只。近移上颌第一磨牙,在加力后0、3、7、14 d各处死5只,苏木精-伊红(HE)染色观察牙根吸收、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色测破牙骨质细胞数目、免疫组织化学法检测压力侧牙周膜中RANKL、TNF-α的表达。结果:牙根吸收随加力时间延长而增加,且加力7、14 d时牙周炎组高于对照组(P<0.05);加力3、7、14 d时牙周炎组RANKL、TNF-α表达高于对照组(P<0.05)。结论:牙周炎可加重牙根吸收,可能与牙周炎症状态下牙周膜中RANKL、TNF-α表达上调有关。

实验性正畸牙齿移动中RANKL在牙周组织中表达的研究

目的观察实验性正畸牙齿移动过程中,大鼠牙周组织中转录因子NFKB受体活化剂配体(receptor activator of NF-kB ligand/RANKL)的表达及定位,进一步探讨RANKL的来源、作用机制以及与正畸牙齿移动中骨改建的关系。方法采用SP免疫组织化学方法检测RANKL在正畸大鼠牙周组织中的表达,并采用计算机图像分析的方法对各组RANKL的表达强度进行半定量分析。结果实验性正畸牙齿移动过程中:①RANKL主要表达于牙槽骨表达的成骨细胞、破骨细胞和牙周膜成纤维细胞胞浆和胞膜中。②RANKL在牙周组织内的表达和分布在时间上是不均衡的,随时间的增加呈先增高后回降的趋势,峰值在第5天。③RANKL在牙周组织内的表达和分布在部位上是不均衡的,压力侧的表达量高于张力侧,牙槽骨表面的表达量高于近牙骨质侧的牙周膜。结论RANKL的表达与正畸牙槽骨改建过程中破骨细胞的生命过程密切相关,RANKL通过旁分泌、自分泌机制作用于破骨细胞前体、成熟破骨细胞膜表达的受体RANKL,促进破骨细胞前体的分化、成熟,激活成熟破骨细胞的功能,加速骨改建。

不同强度力学刺激对大鼠上颌骨MGF、OPG、RANKL影响

目的分析力生长因子(MGF)、骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)在不同大小咀嚼力大鼠上颌骨中的表达,探讨力学信号在颌骨骨重建中的传导,揭示力学刺激对颌骨骨重建的调节机制。方法雌性健康SD大鼠40只,牙列完好,鼠龄2个月,体质量200~240 g。随机分为2组,喂食不同硬度饲料,建立SD大鼠颌骨不同力学刺激动物模型。一组软食喂养(软食组,硬度123 N),一组硬食喂养(硬食组,硬度216 N)。大鼠在实验开始后2、4个月时分2次处死,取上颌骨第三磨牙区骨组织进行显微CT检测骨组织形态计量学指标,应用Western blot方法检测MGF、OPG、RANKL蛋白质表达,实时荧光定量聚合酶链反应(real time-PCR)方法检测MGF、OPG、RANKL基因表达。结果显微CT检测发现,大鼠上颌骨骨体积分数、骨小梁宽度硬食组较软食组增加显著,骨小梁分离度硬食组较软食组降低显著(t_(2个月)=5.740、3.785、-9.228,t_(4个月)=2.461、3.789、-3.175,P<0.05);大鼠上颌骨中MGF和OPG蛋白及基因表达硬食组较软食组同时上调(t_(2个月蛋白结果)=4.916、4.718,t_(4个月蛋白结果)=7.013、6.726,t_(2个月基因结果)=-12.066、-3.081,t_(4个月基因结果)=-3.446、-10.903,P<0.05),RANKL蛋白及基因表达硬食组较软食组降低(t_(2个月蛋白结果)=-12.222,t_(4个月蛋白结果)=-10.416,t_(2个月基因结果)=-6.722,t_(4个月基因结果)=-3.824,P<0.05);4个月结果与2个月结果相比,MGF、OPG和RANKL蛋白及基因表达均有变化,但不显著。结论较高强度的咀嚼力能够促进大鼠颌骨的生长,促进颌骨骨中MGF和OPG的表达,抑制RANKL的表达,表明力学刺激能够调节MGF和OPG/RANKL/RANK分子系统的表达水平。

巴戟天含药血清对成骨-破骨细胞共育体系OPGmRNA、RANKLmRNA表达的影响

目的探讨不同浓度巴戟天含药血清对体外成骨-破骨细胞共育体系OPG、RANKLmRNA表达的影响方法取健康5周龄SD大鼠12只,体重165-172 g。随机分4组,分别予生理盐水及低中高三种浓度巴戟天溶液灌胃,分离血清。取健康5周龄SD大鼠6只,体重165-172 g,取四肢长骨骨髓基质细胞,诱导培养破骨细胞;用24 h内新生SD乳鼠4只,体重5~6 g,头盖骨分离体外培养成骨细胞。将成骨细胞加入含有培养5 d的破骨细胞中,共育2 d后分别改用不同浓度巴戟天含药血清与不含药血清的培养基培养,设低、中、高浓度组及对照组,培养3d后提取各组总RNA,应用RT-PCR检测各组OPGmRNA、RANKLmRNA表达。结果 RT-PCR结果示,中、高浓度组RANKLmRNA表达量均低于对照组（P〈0.05）,而OPGmRNA表达量显著高于对照组（P〈0.001）。结论巴戟天含药血清可上调共育体系中OPGmRNA表达,并下调RANKLmRNA表达,从而降低破骨细胞分化成熟及骨吸收活性。

聚甲基丙烯酸甲酯颗粒对人滑膜细胞核因子κB受体激动剂配体/骨保护蛋白表达的影响

背景:多种因子可以影响骨保护蛋白/核因子κB受体激动剂配体/核因子κB受体激动剂(Osteoprotegerin/receptor activator of nuclear factor-kappaB/ligand of receptor-activator of nuclear factor-kappaB,OPG/RANKL/RANK)系统的表达影响骨代谢,那么松动假体周围的骨水泥颗粒是否也通过影响其代谢参与假体松动过程?目的:观察聚甲基丙烯酸甲酯颗粒对人滑膜细胞RANKL/OPG表达的影响。方法:体外培养人滑膜细胞,在滑膜细胞培养体系中分别加入质量浓度为0(空白对照),0.2,1,10g/L的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥颗粒,采用荧光定量PCR检测上述各浓度PMMA颗粒作用不同时间后滑膜细胞内RANKL、OPG的表达量及其比值。结果与结论:与空白对照组相比,各实验组滑膜细胞内RANKL、OPG的表达量均有下降;随着与聚甲基丙烯酸甲酯颗粒共培养时间延长,各实验组滑膜细胞内RANKL、OPG表达均有下降趋势,而RANKL/OPG表达比值无明显变化。说明聚甲基丙烯酸甲酯颗粒在对滑膜细胞产生生物学反应时并不干扰假体周围骨代谢的动态平衡,并未直接参与人工关节假体的无菌性松动。

增龄因素对微种植体周围组织骨保护素及配体mRNA表达的影响

目的:分析正畸力作用下局部骨重建差异,探讨增龄因素对微种植体支抗稳定性的影响。方法:以3月龄和6月龄雄性新西兰兔20只为实验动物,每组10只,在兔双侧上颌骨各植入微种植体1枚,共40枚。愈合3周后右侧加载,加载3周后处死,RT-PCR法检测微种植体周围骨组织骨保护素(OPG)及其配体(RANKL)mRNA的表达,比较幼年兔和成年兔微种植体支抗周围骨组织中表达的差异。结果:未加载的微种植体周围骨中OPG、RANKL mRNA表达3月龄组高于6月龄组。加载3周后的微种植体周围骨组织OPG mRNA表达均降低,3月龄组加载压力侧降低最明显;RANKL mRNA表达均升高,3月龄组加载压力侧升高最明显。加载后RANKL/OPG比值均升高,3月龄组压力侧升高最多。结论:3月龄组骨转换活跃,加载后微种植体周围尤其是压力侧骨吸收显著增强,可能导致微种植体支抗稳定性下降。6月龄组微种植体支抗周围骨重建相对平缓,有利于种植体的稳定。

OPG/RANKL/RANK系统及其在口腔颌面组织中表达的相关研究进展

骨骼从生理学上讲是在成骨细胞所介导的骨形成和破骨细胞介导的骨吸收之间达到动态平衡的一个状态。以上两个过程均受到细胞因子和生长因子的精确调控。近年来,由骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)、核因子-κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)3个隶属于肿瘤坏死因子家族的细胞因子组成OPG/RANKL/RANK系统的发现,使得在骨骼生理研究领域取得了重大突破。随着对OPG/RANKL/RANK系统研究的不断深入,发现该系统可为口腔医学领域中的多个学科提供有益的思路。本文就OPG/RANKL/RANK系统及其在口腔颌面组织中表达的相关研究进展作一综述。

PTH加速下颌升支截骨术后正畸牙移动过程中RANKL/OPG的表达

目的:研究甲状旁腺激素(PTH)对下颌升支截骨术后正畸牙移动过程中骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达。方法:48只兔建立下颌升支截骨和下颌第一磨牙正畸移动模型,随机分成2组。实验组术后间歇性注射PTH 20μg/kg,对照组注射生理盐水。免疫组化方法和荧光定量PCR检测正畸牙牙周组织中RANKL和OPG表达变化。结果:实验组正畸牙压力侧牙周组织RANKL蛋白及mRNA表达大于对照组(P<0.05),而OPG蛋白及mRNA表达均小于对照组(P<0.05)。结论:外源性PTH可通过促进正畸牙压力侧牙周组织中RANKL表达,抑制OPG的表达,加速下颌升支截骨术后正畸牙的移动。

活血通络胶囊通过OPG/RANKL/PDGF-BB通路对激素性股骨头坏死模型大鼠的干预作用

目的探讨活血通络胶囊(HXTL)对激素性股骨头坏死干预作用的具体机制,同时为防治新型冠状病毒肺炎康复患者的激素性股骨头坏死提供选择。方法将18只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。对照组和模型组给予生理盐水灌胃,治疗组从第3天到第28天给予活血通络胶囊0.63 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃。采用20 mg·kg^(-1)·d^(-1)甲基强的松龙诱导复制激素性股骨头坏死模型,每周注射3次,连续注射3周。对照组注射等体积生理盐水。模型组股骨头骨小梁稀疏中断,间隙增大证实造模成功。第28天取材,利用Micro-CT和苏木精-伊红染色评估活血通络胶囊对股骨头骨小梁的干预作用,酶联免疫吸附测定法检测骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、β-连环蛋白(β-catenin)、血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)的表达量。结果Micro-CT图像显示,与对照组比较,模型组大鼠股骨头骨小梁稀疏、断裂、排列紊乱,而活血通络胶囊可明显减轻激素性股骨头坏死的骨质丢失;而与模型组比较,治疗组骨体积分数、骨小梁数目和骨小梁厚度明显升高(P<0.05),骨小梁分离度明显减小(P<0.05)。苏木精-伊红染色结果显示,与对照组比较,模型组空骨陷窝明显增多,骨陷窝内骨细胞形态异常;活血通络胶囊可明显改善上述病理变化。定量分析结果显示,与对照组比较,模型组大鼠股骨头骨小梁面积明显减小(P<0.05),空骨陷窝率明显增大(P<0.01);而与模型组比较,治疗组空骨陷窝率明显减少(P<0.01),骨小梁面积明显增大(P<0.05)。酶联免疫吸附测定法结果显示,与模型组比较,活血通络胶囊可促进OPG、RANKL、β-catenin、PDGF-BB蛋白含量增加(P<0.05)。结论活血通络胶囊可改善激素性股骨头坏死的股骨头头内骨小梁结构,其机制可能与调控OPG/RANKL/PDGF-BB信号有关,这在指导新冠肺炎康复患者防治股骨头坏死方面具有重要现实意义。

补肾通络方抑制NF-κB/RANK/RANKL通路减轻胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠骨破坏

目的探讨补肾通络方(BSTL)对胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠模型骨破坏的改善作用以及对核因子κB/核因子κB受体激活蛋白/核因子κB受体激活蛋白配体(NF-κB/RANK/RANKL)信号通路的影响。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、CIA模型组、1 mg/kg甲氨喋呤(MTX)处理组、(0.5、2)g/kgBSTL处理组,每组10只。除空白对照组外,其余大鼠采用含有卡介苗的完全Freund佐剂和牛Ⅱ型胶原蛋白(Col2)混合乳液免疫刺激,建立CIA模型。建模15 d后(第0天)根据关节炎指数(AI)评价造模是否成功。自第0天起,连续给予MTX或BSTL处理28 d,免疫组织化学染色法检测滑膜组织NF-κB p65的表达,ELISA检测大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、抗总Col2抗体及亚型(Col2-IgG、Col2-IgG1、Col2-IgG2a)水平,Western blot法检测滑膜组织RANKL、RANK、护骨因子(OPG)蛋白表达。结果与CIA模型组相比,2 g/kg BSTL处理28 d的大鼠足容积、AI值降低,血清IL-1β、IL-18、TNF-α、Col2-IgG、Col2-IgG2a以及RANK和RANKL水平均降低,OPG水平升高;大鼠滑膜组织中NF-κB p65、RANK和RANKL蛋白表达均降低,OPG蛋白表达增加。结论BSTL可通过抑制全身炎症反应,降低滑膜组织中NF-κB p65、RANK、RANKL蛋白的表达,上调OPG蛋白表达,缓解CIA模型大鼠关节炎症和肿胀。