樱桃小茎尖培养后的早熟变异与RAPD鉴定

樱桃品种Ｘｅｓｐｈｙｅ（Ｐｒｕｎｕｓ ａｖｉｕｍ）的休眠芽通过小茎尖分生组织培养后，发现一株组培苗结果后成熟期明显早于Ｘｅｓｐｈｙｅ及同批其它试管苗，该株经无性繁殖试栽后早熟性状稳定，并且综合性状良好，具栽培价值，暂定名“早丹”。经ＲＡＰＤ技术鉴定，该早熟变异株的ＤＮＡ指纹图谱与原Ｘｅｓｐｈｙｅ品种不同，早熟变异株比原 Ｘｅｓｐｈｙｅ品种多扩增一条 ＯＰＵ０３－９５０ ＤＮＡ谱带，说明该株系发生了ＤＮＡ的变异。

甘蔗杂种的染色体和RAPD鉴定研究

采用体细胞染色体计数和RAPD(Random Amplified Polymorphism DNA)分子标记的方法鉴定甘蔗与蔗茅属间杂交种F1的真实性。结果表明,杂种F1材料01/47、01/85、01/120的2n=80-82,染色体遗传方式为n+2n。用110个随机引物进行RAPD扩增,63个引物可获得双亲的RAPD多态性,其中3个引物OPC-19、OPE-2、OPF-4可在杂种F1材料01/64和01/120的RAPD扩增标记中显示出双亲的特征谱带,分别为父本3500bp和母本1300bp、父本1350bp和母本900bp、父本550bp和母本900bp。

黑皮冬瓜黑老粗F_1种子纯度的RAPD鉴定

用CTAB法从冬瓜种子发芽幼根提取DNA,经电泳检测其条带清晰明亮,可满足RAPD分析要求。对黑皮冬瓜黑老粗F1及其亲本DNA用140个RAPD引物分别进行RAPD扩增,筛选获得1个在父母本间可产生稳定且为双亲互补型片段的引物SPS-C15。利用该引物对一批商品种进行纯度鉴定,纯度为90.7%,实际田间形态鉴定的纯度为89.8%,RAPD检测结果与田间鉴定结果基本吻合,表明RAPD技术可用于黑老粗F1的种子纯度快速检测。

扶芳藤遗传多样性RAPD鉴定及类型划分研究

利用RAPD标记技术对56份扶芳藤、3份大叶黄杨和1份胶东卫矛材料进行遗传多样性分析,筛选出35个引物扩增出205条稳定、清晰、可重复的DNA片段,其中32个引物扩增出100条带具有多态性,其多态性频率48.78%;不同引物及不同位点谱带所揭示的扶芳藤遗传差异较大,其遗传多样性指数分布范围为0.0331￣0.8904;根据引物L04和U12扩增的RAPD带型和以遗传距离进行聚类分析结果可明显地区分扶芳藤与大叶黄杨、冬季全部落叶的与冬季不落或部分落叶的扶芳藤类型、从中国收集的扶芳藤资源与从捷克和美国引入的3个品种;同时聚类分析还可区分中国东南沿海地区与其他地区收集扶芳藤资源。

几种东北果树DNA提取及RAPD鉴定

以软枣猕猴桃、黑加仑、越橘、梨、李、杏、小苹果和山定子等果树冷冻幼叶为试材,采用修改的CTAB法提取基因组DNA。利用CTAB提取液提取幼叶组织3次,以第2次提取的DNA产率和质量最好;第3次的质量最好,但产率下降。用第2次和第3次提取的DNA直接用于RAPD分析,重复2次,带型稳定。

凤尾鸡冠花耐盐突变体的RAPD鉴定

采用RAPD技术对叠氮化钠(Na N3)诱变的凤尾鸡冠花耐盐突变体进行遗传特性分析。结果表明:从98个随机引物中筛选出12条适于凤尾鸡冠花的引物,共扩增出104条带,对照和突变体扩增的总条带数分别为49和55,其中9个引物出现差异条带,3个引物未出现差异性条带,凤尾鸡冠花耐盐突变体与对照差异较大,变异率为31.73%,说明了Na N3能有效诱导凤尾鸡冠花的基因变异。

优质大果杨梅新品系乌紫杨梅的生物学特性及其RAPD鉴定

乌紫杨梅是从浙江省象山县的自然实生资源中选出的一个优质、大果、早熟杨梅新品系。乌紫杨梅果实正圆形,果面紫黑色,单果重为23.49g;总糖、可溶性固形物和花色苷含量分别为83.6mg/g、13.26%、0.50mg/g,显著高于东魁杨梅;总酸为0.92%,比东魁略低;成熟期为6月15-24日,比东魁杨梅早7～10d。RAPD分析显示,乌紫杨梅新品系母本树与乌紫杨梅嫁接后代(嫁接第1代、第2代、第3代、第4代)的相似性极高,为0.94-0.98;他们之间的遗传距离也最小。而乌紫杨梅及嫁接后代与东魁、炭梅、水梅的之间相似性较低、遗传距离也相距较远。上述结果表明乌紫杨梅是一个不同于其他杨梅品种、后代表现稳定的大果、优质杨梅新品系。

杂交水稻汕优63杂种纯度的RAPD鉴定

目前,全国杂交水稻播种面积已占水稻播种总面积的40%,产量则达到水稻总产量的50%以上.随着杂交水稻种植面积不断扩大,原种生产和销售过程中的种子纯度问题显得日趋重要,杂交种子纯度无法单纯从种子形态上分辨,往往需要将种子播种后至成熟期方能辨别,使用纯度低或真实性差的种子会给农业生产造成极大损失.简便、快速、准确和早期地鉴定杂交水稻种子纯度的方法将为稳定杂交水稻的增产效果提供保证.在本研究中,我们使用RAPD(Random amplified polymorphic DNA)技术,针对全国播种面积最大的由雄性不育系珍汕97A为母本,恢复系明恢63为父本制成的杂交水稻汕优63(F1),利用RAPD随机引物扩增筛选出F1与父本相同或与母本相同或与父母本相互补的RAPD特异扩增谱带,并以此特异谱带做为分子标记首次对杂交水稻杂种纯度进行鉴定.

RAPD分子标记在猕猴桃种质资源鉴定上的应用

采用RAPD技术对15种猕猴桃种质资源进行鉴定.结果表明,材料选用1年生休眠枝条,取刚展叶1～2d的幼叶,用改良CTAB法提取DNA较好;在所选的引物中,S21对11个品种中的7个样品的RAPD指纹图谱鉴定效果较好,可以以此作为鉴定小果甜、华光2号、海沃德等品种的特征指纹图谱,并将其中的7个品种分成2组,一组为大扩增片段组,包括小果甜、华光2号、海沃德.第2组为小扩增片段组,包括华美2号、金魁、米良1号、徐香,海沃德被划分到了大片段组即中华猕猴桃组内.S130扩增带数较多,可作为至少6个以上猕猴桃品种资源鉴定中的特异性引物.S269,S218引物也都有特异的带谱,但特异性不很强.

纤维亚麻种间杂交D1代的RAPD-PCR鉴定

试验将野亚麻DNA导入栽培亚麻Viking,并获得导入后代D1。为了弄清外源DNA导入法获得后代D1的真实性,筛选D1代中具有供体特性的变异株,采用10条RAPD引物对亲本进行特异性筛选,结果表明:10条RAPD引物中S1314和SH04在亲本中扩增出特异性条带。利用该引物对参试的130个个体进行PCR扩增,结果表明:参试的个体中经SH04引物筛选得到的个体14号、17号、22号、84号和105号具有差异性条带,经引物S1314筛选得到的个体14号具有差异性条带,导入率为3.8%。

小麦-中间偃麦草双体异附加系的选育和鉴定

在小麦-中间偃麦草59个杂交后代种质系中,筛选出6个小麦-中间偃麦草双体异附加系(line0605,line0607,line0609,line0610,line0611,line0625),并对其进行了形态学、白粉病抗性、细胞学和RAPD鉴定。形态学结果表明:6个双体异附加系农艺性状较好地结合了双亲的优良特点;细胞学结果表明:6个双体异附加系具有高度的细胞学稳定性,花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ(PMCMI)的染色体构型为2n=22Ⅱ;RAPD分析表明:在供试的209个随机引物中有5个引物分别能在6个异附加系中稳定地扩增出不同的特异带型,可以作为各个异附加系所附加染色体的特异分子标记;白粉病抗性鉴定结果表明:line0605表现免疫,line0610和line0625表现高抗,line0607表现中抗,line0609和line0611表现中感。

利用DNA指纹鉴定农大108玉米杂交种纯度的研究

从美国ＯＰＥＲＯＮ公司５００多个随机引物中筛选出３个引物，能够非常清晰明确地区分鉴别农大１０８杂交种子及其父母本，攻克了目前利用蛋白质和同工酶电泳等方法难以解决的农大１０８种子室内纯度鉴定的难题。