湖北贝母与川贝母随机扩增引物DNA的鉴别

目的为鉴定湖北贝母,准确区分湖北贝母和暗紫贝母(正品贝母)寻找一种新的鉴别手段。方法采用随机扩增引物DNA(RAPD)法,筛选适于鉴别湖北贝母、暗紫贝母的随机引物。结果总共筛选了20条随机引物,得到一条引物S1能准确区分湖北贝母、暗紫贝母,并且其特异性非常高。结论可利用随机引物S1通过RAPD进行DNA指纹图谱研究准确区分湖北贝母、暗紫贝母。

湖北麦冬及其近缘药用植物的随机扩增引物DNA分析

目的探讨湖北麦冬及其近缘药用植物的亲缘关系和遗传多样性。方法对不同栽培措施处理的湖北麦冬、湖北麦冬组培苗、山麦冬、恩施麦冬、杭麦冬和川麦冬的22种材料进行随机扩增引物DNA（RAPD）法分析,用SPSS软件中的Jaccd和D ice两种方法对扩增片断的相关性进行聚类分析。结果从S系列100个随机引物中筛选出10个扩增条带清晰、稳定、重现性好和多态性明显的引物,10个引物共扩增出75个条带,其中多态性条带58个,占总扩增条带的77.3%。湖北麦冬不同栽培条件和组织培养植株的相关系数均接近1。湖北麦冬与山麦冬的相关系数在0.74～0.88之间。麦冬（杭麦冬和川麦冬）与湖北麦冬和与山麦冬之间的相关系数分别为0.41～0.66和0.48～0.69。杭麦冬与川麦冬的相关系数为0.74,介于湖北麦冬与山麦冬之间。不同的山麦冬样品相关系数均〉0.8。结论22种麦冬类药用植物之间的亲缘关系与形态分类结果基本一致,组织培养和栽培措施对遗传关系影响不大。但产于不同地区的川、杭、恩施麦冬具有一定的遗传差异。

嗜肺军团菌血清I型菌株随机扩增多态性DNA指纹图谱研究

目的采用随机扩增多态性DNA(RAPD)方法研究我国58株嗜肺军团菌血清1型(Lp1)菌株的基因型特征。方法58株嗜肺军团菌血清1型菌株来自北京和深圳市的集中空调冷却塔水和温泉水,随机引物采用5’-CGGCGGCG-GCGG-3’序列,分析Lp1型军团菌RAPD基因型和温度、pH值的关系。结果58株Lp1型菌株共分为17个RAPD基因型。与集中空调冷却塔水Lp1型菌株相比,温泉水分离的菌株基因型具有较高的多态性。深圳市29株集中空调冷却塔水分离的Lp1菌株,共呈现出3个RAPD基因型,北京市24株来自温泉水的Lp1菌株分为12个RAPD型,5株来自集中空调冷却塔水的Lp1型菌株分为两个RAPD型。温泉水Lp1菌株的基因型差异和水温度和pH值无明显的关联。结论RAPD分型方法可用于我国Lp1菌株的基因分型,不同地区和来源的Lp1型军团菌菌株具有特征性的RAPD基因型,温泉水中分离的Lp1菌株较集中空调冷却塔水分离菌株基因型呈现较高的基因多态性。

新疆雪莲花6个不同地理群体遗传关系的RAPD分析

目的 建立新疆6个不同地理群体的新疆雪莲花(Saussurea involucrata Kar.et Kin.)指纹图谱,进行遗传多样性分析。方法 通过20个10碱基随机引物对新疆6个不同地理群体的新疆雪莲花进行聚合酶链反应(PCR)扩增,通过计算遗传相似性系数,建立平均连接聚类法(UPGMA)聚类图。结果 共扩增出103个多态位点,建立了它们的基因组DNA指纹图谱。结论 不同地理群体中存在丰富的遗传多样性;相距越远,群体间相似性程度越低。

斑茅杂种后代分子检测

利用 RAPD随机引物和斑茅 5 S r RNA间隔序列 (ITS)引物对斑茅与甘蔗的杂种 F1 、 F2 代进行了分子鉴定 ,获得了与含有斑茅血缘有关的 RAPD分子标记 3个及 5 S r RNA间隔序列标记 1个 ;其中 ,5 S r RNA间隔序列标记可用于斑茅杂种后代碱法 DNA模板的快速检测。

院内肺炎逆行感染途径的实验研究

目的 研究胃 咽 下呼吸道逆行感染途径以及观察胃液pH值变化与院内感染性肺炎 (NosocomialPneu monia,NP)发生的关系。方法 以气管切开或插管病人为研究对象 ,用防污染标本刷 (PSB)采集标本 ,由细菌表型分型直至质粒DNA、酶切、随机引物PCR(RAPD)等基因分型 ,前瞻性观察NP的发生情况。结果 1 1名患者存在逆行感染 ,NP发生率为 2 2 % ,在胃部分离出病原菌 1～ 2d后 ,PSB在咽部及下呼吸道也检出相同的细菌 ,应用质粒图谱、酶切图谱和RAPD等分子生物学技术进行同源性分析 ,证明其有很高的同源性。将美兰经胃管注入病人胃内 ,1～ 2d后在咽部及下呼吸道可检出蓝色分泌物。随着胃液 pH值升高 ,胃内细菌定植增加 ,NP发生率升高。 结论 存在胃-咽 -下呼吸道逆行感染途径 。