lncRNA RARB-AS2对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响及分子机制

目的 观察长链非编码RNA(lncRNA)RARB-AS2在口腔鳞状细胞癌组织中的表达,探讨RARB-AS2对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响及分子机制。方法 癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析RARB-AS2在口腔鳞状细胞癌组织和癌旁组织中表达水平。实时荧光定量PCR(qPCR)检测RARB-AS2在4种口腔鳞状细胞癌细胞SCC-9、CAL-27、HSC-3、SCC-25以及口腔上皮角质细胞HOK中表达水平。通过脂质体转染法在SCC-25细胞中分别转染RARB-AS2高表达质粒和对照质粒,定义为RARB-AS2组和对照组。qPCR检测SCC-25细胞中RARB-AS2表达水平。平板克隆实验、流式细胞术和Transwell实验分别检测SCC-25细胞增殖、细胞周期和侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证RARB-AS2和miR-455-3p的靶向关系。TCGA数据库分析口腔鳞状细胞癌组织中RARB-AS2和miR-455-3p表达的相关性。qPCR检测SCC-25细胞中miR-455-3p表达水平。Western blot法检测SCC-25细胞中PI3K/AKT信号通路蛋白p-PI3K、PIP3、PDK1、p-AKT表达。结果 口腔鳞状细胞癌组织中RARB-AS2表达显著低于癌旁组织(P<0.01)。与口腔上皮角质细胞HOK比较,口腔鳞状细胞癌细胞系SCC-9、CAL-27、HSC-3、SCC-25中RARB-AS2呈低表达(P<0.01),在SCC-25细胞中RARB-AS2表达最低(P<0.01)。与对照组比较,RARB-AS2组SCC-25细胞的增殖能力显著降低(P<0.01),SCC-25细胞位于G0/G1期比例显著升高(P<0.01),S期比例显著下降(P<0.05),G2/M期比例显著下降(P<0.05),SCC-25细胞的侵袭能力显著降低(P<0.01)。RARB-AS2与miR-455-3p间存在互补关系(P<0.01)。口腔鳞状细胞癌组织中RARB-AS2与miR-455-3p表达呈负相关(P<0.01)。与对照组比较,RARB-AS2组SCC-25细胞中miR-455-3p表达显著降低(P<0.01),PI3K/AKT信号通路蛋白p-PI3K、PIP3、PDK1、p-AKT表达减少(P<0.01)。结论 口腔鳞状细胞癌组织和细胞系中RARB-AS2呈低表达,RARB-AS2可能通过调控miR-455-3p/PI3K/AKT信号通路,抑制口腔鳞状细胞癌SCC-25细胞的增殖、侵袭。