姜黄素通过抑制Ras-ERK和Shh-GLI1信号诱导胰腺癌细胞凋亡

目的:探讨姜黄素对胰腺癌PANC-1细胞的影响及可能机制。方法:不同浓度的姜黄素作用于PANC-1细胞后,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测K-Ras、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)、Sonic hedgehog(Shh)和胶质瘤相关癌基因同系物1(GLI1)的表达水平。结果:不同浓度的姜黄素与PANC-1细胞共培养后,浓度为30 mmol/L的姜黄素组能明显抑制PANC-1细胞的增殖,与其余各组相比,差异显著(P<0.01)。PANC-1细胞经30 mmol/L姜黄素处理后,其细胞凋亡率(37.57%)明显高于对照组(4.62%)(P<0.01)。经姜黄素处理的PANC-1细胞,其K-Ras、p-ERK、Shh和GLI1表达明显低于对照组(均P<0.01)。结论:姜黄素通过抑制Ras-ERK和Shh-GLI1信号通路的活化,抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖,并诱导细胞凋亡。

氟中毒对大鼠脑组织Ras-Erk1/2通路及转录因子CREB的影响

目的研究慢性氟中毒大鼠脑组织中细胞外信号调节蛋白激酶(Extracellular signal regulated kinases,Ras-Erk1/2)通路主要激酶表达变化及其对转录因子环一磷酸腺苷反应单元结合蛋白(cAMP Responsive Element Binding Protein,CREB)的影响。方法 SD(Sprague dawley)大鼠随机分为3组,即正常组、饮水中小剂量加氟(5 mg/L)组、大剂量加氟(50 mg/L)组,实验期为6个月。实验结束时,用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟及血氟含量,尼氏染色检查神经细胞尼氏小体改变,蛋白印迹(Western-blotting)方法检测脑组织中小鸟苷三磷酸结合蛋白(small GTP-binding protein,Ras)、Erk1/2、CREB信号转导激酶的蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time Polymerase Chain Reaction,Re-al-time PCR)方法检测c-fos基因mRNA表达水平。结果与对照组相比,染氟组大鼠有不同程度的氟斑牙及血氟尿氟升高;大脑皮质和海马部位神经细胞尼氏小体减少;脑组织中Ras、phospho-Erk1/2t、otal-Erk1/2及phospho-CREB蛋白表达水平上升(F值分别为19.9、114.59、4.6 9、7.6,P<0.05),以大剂量染氟组尤为明显t,otal-CREB在各组间未见明显改变;大剂量染氟组c-fos基因mRNA表达明显升高,而小剂量染氟组该基因mRNA表达降低。结论过多的氟可引起大鼠脑组织神经细胞损伤,脑组织中Ras-Erk1/2信号激酶通路过度激活可刺激转录因子CREB磷酸化,从而影响c-fos基因的表达,该过程可能参与慢性氟中毒脑损伤机制。

接头蛋白Gab1的结构及功能研究进展

Gab1蛋白属于接头蛋白Gab家族,该家族蛋白因能与生长因子受体结合蛋白2(Grb2)相结合而得名。作为接头蛋白,Gab1蛋白能被多种受体酪氨酸激酶或非受体酪氨酸激酶激活,接受胞外多种生长因子、细胞因子和一些T/B细胞抗原受体的刺激,介导PI3K/Akt和Ras/MAPK等多条信号转导途径,具有促进细胞生长、迁移、调节免疫等多种生物学功能,与糖尿病、肿瘤、心血管疾病等的发生发展密切相关。

基于PD-1/PD-L1探讨麻杏石甘汤平衡肺部炎症与免疫微环境紊乱的机制研究

目的探索麻杏石甘汤通过调控PD-L1/PD-1及PI3K/AKT和RAS-ERK信号通路平衡肺部炎症与免疫微环境紊乱状态的具体机制,为麻杏石甘汤的推广应用提供更多科学依据。方法将小鼠分为空白组、模型组、PD-L1抗体组、PD-1抗体组、麻杏石甘汤+PD-L1抗体组、麻杏石甘汤+PD-1抗体组、麻杏石甘汤组、头孢地尼组8组,每组10只,使用肺炎链球菌D39滴鼻小鼠造模。末次给药后,HE染色检测肺组织炎症程度,Elisa检测肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α水平,Western blo检测PD-1、PD-L1、P-AKT、P-AKT、P-RAF1和P-ERK蛋白表达。结果麻杏石甘汤可减少肺部炎症,同时升高PD-1/L1含量,并且下调P-AKT、P-RAF1和P-ERK含量。结论麻杏石甘汤可通过PD-1/PD-L1、PI3K/AKT和RAS-ERK调节炎症反应。

辛伐他汀引起的Ras—ERK途径改变对K562细胞增殖和凋亡的调节

目的探讨辛伐他汀作用K562细胞后的Ras-细胞外信号调节激酶（ERK）信号转导通路分子水平的变化，以说明辛伐他汀通过引起Ras—ERK信号通路分子水平的变化参与K562细胞细胞增殖和细胞凋亡的调节。方法体外用辛伐他汀处理慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖抑制率，用流式细胞术检测辛伐他汀作用后的细胞周期和凋亡率的变化，用逆转录聚合酶链反应检测Ras—ERK信号通路分子在转录水平的变化。结果：辛伐他汀能抑制K562细胞的增殖，使K562细胞停滞在G0-G1期．明显诱导K562细胞凋亡，Ras—ERK信号通路的大多数分子在转录水平出现差异表达。结论辛伐他汀可能通过作用于参与细胞增殖和凋亡的Ras，ERK信号通路抑制K562细胞增殖并诱导细胞凋亡。