RasGRF1在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:通过对大样本乳腺癌临床病例的研究,探讨鸟甘酸交换因子1(RasGRF1)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:通过免疫组织化学染色的方法明确RasGRF1在乳腺癌组织中的表达方式,利用TIMER、DriverDBv3、bc-GenExMiner和LinkedOmics临床数据资源分析RasGRF1在乳腺癌组织中的表达趋势及其与乳腺癌患者预后的关系。在此基础上,探讨RasGRF1在不同分型的乳腺癌组织中的表达及其与不同分型的乳腺癌患者预后的关系,并且在ER-/PR-型的乳腺癌患者中深入研究调控RasGRF1的microRNA。结果:免疫组织化学染色结果显示,RasGRF1蛋白主要在乳腺癌组织的胞浆和胞膜中表达,在细胞核中几乎没有表达。与正常乳腺组织相比,RasGRF1蛋白在乳腺癌组织中高表达并且与患者的预后呈负相关。总生存(HR=2.04,P=0.00067)、无病生存(HR=1.77,P=0.0235)、无进展生存(HR=1.85,P=0.00136)和疾病特异性生存(HR=2.83,P=3.23e-05)是乳腺癌预后的独立预后因子。与无淋巴结转移的患者相比,RasGRF1在有淋巴结转移的患者中高表达,并且其在淋巴结转移的乳腺癌患者中的表达与预后呈负相关(HR=1.86,95%CI:1.34~2.57,P=0.0002)。与其他3种乳腺癌类型(ER+/PR+、ER+/PR-、ER-/PR+)相比,RasGRF1在ER-/PR-类型的乳腺癌组织中高表达并且与患者预后呈负相关(HR=2.05,95%CI:1.01~4.19,P=0.0484)。在ER-/PR-类型的乳腺癌中RasGRF1的表达可能受hsa-mir-769的调控。结论:RasGRF1蛋白能够促进乳腺癌的进展,RasGRF1可作为乳腺癌预后的生物标志物及治疗靶点。

RASGRF1在结直肠癌组织中高表达对肿瘤转移和不良预后的影响

【目的】探讨RASGRF1在结直肠癌组织中表达及临床意义以及下调结肠癌细胞株RASGRF1表达,检测对细胞增殖、细胞周期、迁移的影响。【方法】免疫组化法检测35例结直肠癌组织、35例癌旁正常结肠组织、35例结直肠腺瘤组织RASGRF1表达水平,并分析RASGRF1表达与结直肠癌病人临床病理参数的关系;采用RNAi技术下调结肠癌细胞株HCT116中RASGRF1表达,CCK8法、流式细胞术检测对细胞增殖、细胞周期影响。【结果】结直肠癌组织中RASGRF1表达高于癌旁正常组织及结直肠腺瘤组织;RASGRF1蛋白表达与结直肠癌病人性别(P=0.021)、组织分型(P=0.009)、有无远处转移(P=0.019)及Dukes分期(P=0.001)相关。女性病人RASGRF1表达水平高于男性病人;RASGRF1在黏液腺癌、印戒细胞癌中表达水平显著高于腺癌;伴有远处转移者高于无远处转移;Dukes C、D期高于Dukes A、B期;与年龄、肿瘤部位、肿瘤最大径、分化不相关(P>0.05)。下调HCT116细胞中RASGRF1表达可抑制其增殖、迁移及影响细胞周期。【结论】RASGRF1可能作为促癌因子参与结直肠癌的发生发展,进一步研究有望将作为结直肠癌患者独立预后分子标志物和新的治疗靶点。

RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及其对癌细胞生物学行为的影响

目的探究RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及对癌细胞生物学功能的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同结直肠癌细胞系DiFi、SNU175、HT-29、HCT-15细胞中RasGRF1mRNA;体外培养人结肠癌细胞,随机分为si-RasGRF1-NC组(阴性对照)、si-RasGRF1组(沉默RasGRF1表达)、NG组(空白对照)。采用qRT-PCR检测各组RasGRF1 mRNA,CCK-8法检测细胞存活情况,AnnexinV/PITC双染法检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞PI3K/Akt通路蛋白。结果DiFi细胞中RasGRF1 mRNA相对表达量最高(P<0.05),选择DiFi细胞进行后续实验。si-RasGRF1组光密度值低于NG组、si-RasGRF1-NC组(P<0.05)。si-RasGRF1组细胞凋亡率高于NG组和si-RasGRF1-NC组(P<0.05)。si-RasGRF1组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量低于NG组和si-RasGRF1-NC组(P<0.05),Caspase-3蛋白相对表达量高于NG组和si-RasGRF1-NC组(P<0.05)。结论RasGRF1在结直肠癌细胞中异常高表达,抑制RasGRF1表达可抑制DiFi细胞增殖并诱导细胞凋亡,且该作用是通过抑制DiFi细胞PI3K/Akt通路活化来实现的。

RASGRF1基因遗传多态性与甘肃地区近视易感性的相关性

目的:分析RASGRF1基因顺式调控元件中单核苷酸多态性与甘肃地区近视人群的相关性。方法:系列病例对照研究。选取2018年1月至2019年1月就诊于甘肃省人民医院眼视光学中心的高度近视患者166例(332眼)和中低度近视患者92例(184眼)分别作为高度近视组和中低度近视组,并将77例(154眼)无近视的志愿者作为正常对照组。首先利用"DNA元件百科全书"计划(ENCODE)和基因型组织表达数据库(GTEx)确定眼组织细胞相关功能性调控元件中的5个单核苷酸多态性(SNP),并利用多重连接酶检测反应技术进行候选SNP的基因分型。在不同遗传模式下,采用卡方检验、非条件Logistic回归分析近视患者和正常对照人群的基因型频率分布差异。结果:rs8033417 T/C在显性模式下含等位基因C的个体近视的发病风险明显降低(P=0.035);rs8033417与甘肃地区中低度近视发病风险无相关性,但在显性模式和加性模式下能明显降低高度近视患者的患病风险(P=0.043、0.032)。进一步的生物信息学分析发现,rs8033417 T/C与RASGRF1基因的反义长非编码RNA基因RP11-16K12.1的表达相关。结论:rs8033417可能是甘肃地区近视发生相关的遗传变异位点,推测其可能通过影响反义长非编码RNA基因RP11-16K12.1的表达,继而调控RASGRF1基因表达从而影响近视尤其是高度近视的患病风险。

SLITRK6,RASGRF1基因多态性与高度近视的关联分析

探讨RASGRF1和SLITRK6基因上的6个SNP位点与山东某地汉族人群高度近视易感性之间的关联性,为近视有效防治提供理论依据。方法:本研究共选取101例高度近视患者和111例正常受试者的外周血样本。采用MassARRAY技术对所研位点进行基因分型,并进行统计分析。结果:父母近视状况与近视的发生显着相关(P<0.001)。病例组和对照组基因型和等位基因频率无统计学差异(P>0.05)。结论:RASGRF1和SLITRK6基因所研位点与人群高度近视易感性无明显关联,但近视患者具有更多的家族史。

Ras鸟嘌呤核苷酸交换因子1对人结直肠癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的观察Ras鸟嘌呤核苷酸交换因子1(RasGRF1)在结直肠癌细胞的表达及对人肠癌细胞株HCT116增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法采用RT-PCR方法检测结直肠癌细胞中RasGRF1的表达;MTT法检测RasGRF1对人结直肠癌细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果 RasGRF1在人结肠癌细胞HCT116中过表达;siRNA干扰RasGRF1表达使人结肠癌细胞HCT116的增殖率降低;siRNA干扰RasGRF1表达使人结肠癌细胞HCT116的凋亡率增加并使细胞周期停留在G1期。结论在人结直肠癌细胞中RasGRF1是高表达的,siRNA干扰RasGRF1的表达可抑制人结肠癌细胞HCT116的增殖,凋亡率增加并使HCT116的细胞周期停留在G1期。