上皮性卵巢肿瘤RASSF1A基因甲基化与蛋白表达的关系及意义

目的:检测上皮性卵巢肿瘤中RASSF1A基因启动子CpG岛的甲基化状态,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达的关系及其意义。方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)方法对62例上皮性卵巢癌、21例交界性囊腺瘤及30例良性囊腺瘤的RASSF1A基因启动子甲基化状态进行检测,免疫组化S-P法检测上述标本中RASSF1A蛋白表达,并结合肿瘤生物学行为进行分析。结果:上皮性卵巢癌组织、卵巢交界性囊腺瘤组织中RASSF1A基因启动子区甲基化率(58.06%、42.85%)显著高于卵巢良性囊腺瘤组织(13.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。RASSF1A基因启动子区甲基化与上皮性卵巢癌的细胞分化程度和临床分期密切相关(P<0.05)而与组织类型和患者年龄及绝经与否无相关性(P>0.05);RASSF1A基因甲基化与其蛋白表达下降一致。结论:卵巢癌组织中存在RASSF1A基因启动子CpG岛的异常甲基化,可能和该蛋白表达缺失的主要原因,是导致该基因失活的重要机制之一。

RASSF1A蛋白在结肠癌中的表达意义

目的探讨结肠癌组织中RAS相关区域家族1A(RAS association domain family,RASSF1A)蛋白的表达意义。方法收集60例结肠癌及40例正常结肠黏膜组织,采用Western blotting检测RASSF1A蛋白在结肠癌组织中的表达情况(正常结肠黏膜组织为对照);利用免疫组织化学染色方法观察结肠癌及正常结肠黏膜组织中RASSF1A蛋白的表达情况,并分析其临床意义。结果①Western blotting结果显示,RASSF1A蛋白在正常结肠黏膜中表达高于结肠癌组织。②免疫组织化学染色结果显示,RASSF1A蛋白在正常结肠黏膜中的表达阳性率为95.0%(38/40),在结肠癌中为46.7%(28/60),正常结肠组织中RASSF1A蛋白的表达阳性率明显高于结肠癌组织(P<0.01)。Duke’s分期的A+B期RASSF1A蛋白表达阳性率为61.1%(22/36),而C+D期为25.0%(6/24);有淋巴结转移者RASSF1A蛋白表达阳性率为11.1%(2/18),而无淋巴结转移者为61.9%(26/42),RAS SF1A蛋白表达与Duke’s分期和淋巴结转移有关(P<0.01)。结论正常结肠组织中RASSF1A蛋白表达明显高于结肠癌组织,结肠癌中RASSF1A蛋白表达与Duke’s分期和淋巴结转移有关。

唾液腺腺样囊性癌中RASSF1A表达及与启动子甲基化之间的关系

目的:研究唾液腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)中RASSF1A表达及其与启动子区甲基化之间的关系。方法:收集167例原发性唾液腺ACC,亚硫酸盐测序聚合酶链反应(bisulfite sequencing polymerase chain reaction,BSP)和甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测RASSF1A基因启动子区甲基化状况,免疫组织化学方法检测RASSF1A蛋白表达情况。去甲基化药物decitabine处理ACC细胞系SACC-83后,检测处理前、后RASSF1A基因甲基化及表达情况。应用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:59/167(35.3%)例病例中检测到RASSF1A基因启动子区甲基化。101/167(60.5%)例病例中RASSF1A蛋白呈低或不表达,66/167(39.5)病例中RASSF1A蛋白呈高表达。存在RASSF1A基因甲基化组,RASSF1A蛋白表达显著低于不存在甲基化组(P=0.012)。去甲基化药物decitabine处理ACC细胞系后,RASSF1A mRNA及蛋白水平表达均升高。结论:唾液腺ACC中,启动子区甲基化是RASSF1A基因失活的主要原因,可作为该肿瘤的潜在治疗靶点。

RASSF1A和P16在食管鳞癌中的表达及临床病理意义

目的:探讨食管鳞癌(esophageal squamous cell car-cinoma,ESCC)中RASSF1A和P16的表达及临床病理意义。方法:应用免疫组织化学法检测90例ESCC患者癌组织及癌旁正常组织中RASSF1A、P16的表达,分析其与食管鳞癌临床病理参数的关系。结果:食管鳞癌组织中RASSF1A蛋白表达显著低于相应癌旁正常黏膜组织(51.1%vs 93.3%,P<0.01);P16蛋白表达显著低于相应癌旁正常黏膜组织(41.1%vs 91.1%,P<0.01)。RASSF1A蛋白低表达与食管鳞癌的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05),与大体类型无关(P>0.05)。P16蛋白低表达与食管鳞癌TNM分期、大体类型、浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05)。两者表达皆与食管鳞癌患者的年龄、性别无关(P>0.05)。结论:RASSF1A和P16可成为判断食管鳞癌恶性程度和预后的检测指标。

青年食管鳞癌和贲门腺癌组织中Ras相关区域家族1A蛋白的表达

目的探讨青年食管鳞癌(SCC)和贲门腺癌(GCA)组织中Ras相关区域家族1A(RASSF1A)蛋白的表达变化特征。方法采用免疫组织化学检测河南省林州地区青年SCC和GCA组织RASSF1A蛋白表达,将癌组织阳性结果分为弥漫型、灶性、镶嵌型,并分析其与临床病理变化的关系。结果SCC和GCA组织中RASSF1A阳性表达频率均较高(83%(10/12)vs89%(8/9)),与对应正常组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05),但表达类型并不相同。食管鳞癌以镶嵌型(4例)和灶性(4例)较多,弥漫型(2例)次之;食管正常组织以乳头性(3例)和灶性(3例)较多,镶嵌型(2例)次之,无弥漫型表达;贲门腺癌组织以灶性为主(6例),镶嵌型(2例)次之,无弥漫型表达;贲门正常组织以弥漫型(5例)较多,另有灶性(4例)表达。RASSF1A蛋白表达与SCC和GCA的转移、分化和浸润程度无相关性。结论RASSF1A蛋白阳性表达是河南高发区青年食管鳞癌和贲门腺癌组织中常见的分子事件,可能在食管和贲门癌变过程中起一定作用。

血清GP73与RASSF1A基因启动子区甲基化检测对肝癌的诊断价值

目的探讨高尔基体蛋白73(GP73)与RASSF1A基因启动子区甲基化对原发性肝癌(HCC)的诊断价值。方法选择2012年8月-2014年2月在浙江省宁波市第六医院住院的80例肝癌患者、40例肝硬化、30例健康体检者,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中GP73含量,甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)检测血清中RASSF1A基因启动子区甲基化情况,ROC曲线分析GP73对HCC的最佳诊断点,并对单一及组合(GP73+RASSF1A)方式的敏感度、特异度进行比较。结果肝癌组、肝硬化组、健康体检组血清GP73平均浓度为278.3μg/L、187.3μg/L、46.8μg/L(F=6.85,P<0.05);RASSF1A基因甲基化检出率分别为65%(52/80)、20%(8/40)、3.3%(1/30)(χ2=44.1,P<0.05);GP73诊断肝癌的ROC曲线下面积为0.852,P<0.05,取GP73为122.02μg/L为最佳诊断分界点;GP73诊断HCC的灵敏度高于RASSF1A基因甲基化,GP73诊断HCC的特异度低于RASSF1A基因甲基化,GP73与RASSF1A基因甲基化并联诊断HCC的敏感度与单项GP73相比,差异具有统计学意义(χ2=4.12,P<0.05),两项指标并联诊断HCC的特异度与单项RASSF1A甲基化比较,差异无统计学意义(χ2=0.31,P>0.05)。结论 GP73并联RASSF1A基因甲基化检测对诊断HCC的敏感度较高,具有一定的筛查能力。