NSCLC患者血清RASSF2基因甲基化检测临床意义分析

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中RASSF2基因启动子区域甲基化状况及其临床意义。方法:甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法检测62例NSCLC和30例肺部良性疾病患者及16名健康体检者血清中RASSF2启动子区域甲基化状况,并分析其与临床特征的关系。结果:RASSF2甲基化检出率在NSCLC患者中为38.71%(24/62),而肺部良性疾病患者和健康体检者血清未检出,χ2=22.89,P<0.01。NSCLC患者血清RASSF2基因甲基化检出率与年龄、性别、病理类型、临床分期和分化程度无明显相关(P>0.05),不吸烟者RASSF2甲基化率高于吸烟者(61.90%vs 26.83%,χ2=7.20,P<0.05)。结论:RASSF2甲基化可能在NSCLC发生、发展中起重要作用,有望成为NSCLC辅助诊断的分子标记。

宫颈癌RASSF2A基因启动子甲基化与其临床病理特征的关系

目的:检测宫颈癌组织中Ras相关区域家族2A(RASSF2A)基因启动子甲基化状态,并分析RASSF2A基因甲基化率与临床病理特征的关系。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)检测46例宫颈癌、38例宫颈上皮内瘤变(CIN)和25例正常宫颈组织中RASSF2A基因启动子甲基化状态。结果:宫颈癌组织中RASSF2A基因甲基化率显著高于CIN组织及正常宫颈组织(P<0.05)。RASSF2A甲基化阳性率随着淋巴结转移而升高,具有明显的相关性(P<0.05);不同年龄、临床分期、组织分级及病理性类型与RASSF2A基因甲基化无显著相关性(P>0.05)。结论:RASSF2A基因启动子甲基化为频发事件,可能与宫颈癌的发生和淋巴结转移有关。

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对肺癌WIF1、RASSF2A基因表达及细胞凋亡的影响

目的观察在肺腺癌SPC-A-1细胞中5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对WIF1、RASSF2A基因甲基化状态改变的影响,探讨5-Aza-CdR对肺腺癌SPC-A-1细胞凋亡的影响及其可能的抗癌机制。方法将体外培养的人肺腺癌SPC-A-1细胞株分为4组,A组为未加药组(对照组),B、C、D加药组分别加入3、6、12μmol/L的5-Aza-CdR。采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测4组细胞WIF1、RASSF2A基因甲基化状态的差异,RT-PCR法检测4组细胞WIF1、RASSF2A基因mRNA表达水平差异,Western blot检测4组细胞WIF1、RASSF2A蛋白表达水平差异,流式细胞学技术检测各组细胞周期及细胞凋亡率的差异。结果①A组细胞检测出WIF1、RASSF2A基因为甲基化状态,B、C、D组均检测出WIF1、RASSF2A为去甲基化状态。②肺腺癌SPC-A-1细胞WIF1、RASSF2A基因mRNA及WIF1、RASSF2A蛋白表达水平低下,经5-Aza-CdR处理后,其表达水平明显增强(均P<0.05)。③5-Aza-CdR处理后的细胞凋亡率较未加药组均明显提高,差异有统计学意义(均P<0.05)。④5-Aza-CdR处理后的D组细胞WIF1、RASSF2A蛋白表达水平与细胞凋亡率呈正相关(均P<0.05)。结论肺癌细胞WIF1、RASSF2A基因呈甲基化状态,5-Aza-CdR具有明显去甲基化作用,可使WIF1、RASSF2A基因重新激活表达,进而促进肺癌细胞凋亡及抑制癌细胞增殖,发挥抗癌作用。

肾癌组织中BHD、RASSF1A、SPINT2基因启动子的甲基化研究

目的:检测肾癌组织中伯特-霍格-杜贝(BHD)、Ras相关结构域家族(RASSF)1A、丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPINT)2基因启动子的甲基化状态,探讨其在肾癌发病中的可能作用。方法:收集肾肿瘤组织标本24份,其中透明细胞癌19份、错构瘤2份、癌旁组织3份,应用甲基化特异性聚合酶链反应法分别检测其BHD、RASSF1A、SPINT2基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果:19例透明细胞癌同时检出3种抑癌基因甲基化3例,2种抑癌基因甲基化9例,1种抑癌基因甲基化7例。2例错构瘤中检出1种抑癌基因甲基化1例,3例癌旁组织中检出2种抑癌基因甲基化1例。检出BHD基因甲基化9例,均为透明细胞癌。检出RASSF1A基因甲基化8例,其中透明细胞癌7例,癌旁组织1例。检出SPINT2基因甲基化20例,其中透明细胞癌18例,错构瘤1例,癌旁组织1例。结论:肾癌组织中BHD、RASSF1A、SPINT2基因启动子区存在甲基化状态,抑癌基因甲基化可能在肾癌的发病机制中起重要作用。

应用MSP检测子宫内膜异位症相关性卵巢癌中RASSF2A基因启动子甲基化状态

目的采用甲基化特异性PCR(MSP)检测子宫内膜异位症相关性卵巢癌(EAOC)中RASSF2A基因启动子甲基化的情况。方法收集30例正常子宫内膜组织,30例卵巢透明细胞癌(OCC)组织,30例卵巢子宫内膜样腺癌(OEA)组织,采用MSP法分析比较RASSF2A启动子甲基化在不同组织类型患者中的表达差异。结果 63.33%(19/30)的卵巢透明细胞癌组织中存在RASSF2A启动子甲基化,73.33%(22/30)的卵巢子宫内膜样腺癌组织中存在RASSF2A启动子甲基化,而在正常子宫内膜组织中没有检测到甲基化现象。卵巢透明细胞癌组织RASSF2A基因启动子甲基化阳性率明显高于正常子宫内膜组织(P<0.05),卵巢子宫内膜样腺癌组织RASSF2A基因启动子甲基化阳性率明显高于正常子宫内膜组织(P<0.01)。结论RASSF2A基因启动子甲基化与EAOC的发生、发展有关。

宫颈病变组织中高危型乳头瘤病毒感染及SLC5A8、RASSF2A基因启动子甲基化阳性率

目的:探究高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染及SLC5A8基因、RASSF2A基因启动子甲基化在宫颈病变中的变化。方法:收集本院2018年5月-2021年5月收治的186例宫颈病变患者临床资料,根据阴道镜宫颈活检病理诊断结果,分为宫颈上皮内瘤变I级组(n=73)、宫颈上皮内瘤变II级组(n=57)和III级组(n=56),同时收集正常细胞43份作为对照组(n=43)。检测4组标本HPV DNA、SLC5A8以及RASSF2A基因启动子甲基化阳性率。结果:对照组、宫颈上皮内瘤变I级、II级、III级组标本HPV DNA(0、28.8%、63.2%、92.9%)、SLC5A8(0、30.1%、66.7%、89.3%)以及RASSF2A(0、13.7%、49.1%、82.1%)基因启动子甲基化阳性率依次升高(均P<0.05)。结论:高危型HPV感染及SLC5A8、RASSF2A基因启动子甲基化在宫颈病变组织中异常升高,并随病情发展而增加。

子宫内膜异位症恶变组织中RASSF2A启动子甲基化的表达差异性检测及其临床意义

目的通过运用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测子宫内膜异位囊肿(EC)组织、子宫内膜异位相关的卵巢癌(EAOC)中RASSF2A基因启动子甲基化(以下简称甲基化)的情况。探讨该基因启动子甲基化在子宫内膜异位恶变组织中的表达及临床意义。方法选取在宁波市妇女儿童医院进行手术治疗患者的石蜡包埋标本。30份正常子宫内膜组织,30份EC组织,30例卵巢透明细胞癌(OCC)组织,30份卵巢子宫内膜样腺癌(OEA)组织,比较甲基化在不同组织类型患者中的表达差异。显微镜观察筛选20份EAOC样本,比较甲基化与各种临床病理特征的关系。结果 OCC组织中RASSF2A启动子甲基化阳性率明显高于EC和正常子宫内膜组织(均P <0.05),OEA组织中RASSF2A启动子甲基化阳性率明显高于EC组织和正常子宫内膜组织(均P<0.05),EC组织中RASSF2A启动子甲基化阳性率高于正常子宫内膜组织(P<0.05)。EAOC组织中RASSF2A基因启动子甲基化率与患者年龄、临床分期、组织学分级及临床病理类型无关(均P> 0.05);RASSF2A基因启动子甲基化程度与淋巴结转移有关(P <0.05)。结论 RASSF2A基因启动子甲基化与子宫内膜异位症恶变存在联系。

子宫颈癌组织中RASSF2A基因启动子甲基化状态的研究

目的探讨RASSF2A基因启动子甲基化状态及其在子宫颈癌发生中的作用。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测RASSF2A基因在62例子宫颈癌组织、30例正常子宫颈组织中的甲基化状态和表达情况。结果RASSF2A基因启动子区在子宫颈癌组织的甲基化比例高于正常子宫颈组织,分别为53.2 % （33／62）和13.3 %（4／30）,两组差异有统计学意义（P〈0.05）。子宫颈癌组织中RASSF2A基因mRNA表达低于正常子宫颈组织（mRNA相对表达量分别为0.254 3±0.102 7和0.623 4±0.063 8,t=0.932,P〈0.05）;在子宫颈癌组织中,甲基化组RASSF2A基因的mRNA表达低于非甲基化组（mRNA相对表达量分别为0.118 2±0.035 2和0.301 2±0.076 4）,差异有统计学意义（t=0.481,P〈0.05）。结论RASSF2A基因启动子甲基化是RASSF2A基因失活的主要机制,在子宫颈癌的发生过程中发挥重要作用。

RASSF2A基因甲基化与大肠癌的相关性分析

目的 探讨大肠癌组织中RASSF2A基因启动子甲基化状态及其与大肠癌发生的相关性.方法 选择我院2007年2月到2013年3月收治的共111例散发性大肠癌患者,取其肿瘤组织及相关正常黏膜组织为标本,应用结合重亚硫酸盐限制性内切酶法（COBRA）检测RASSF2A基因在不同标本中的甲基化状态,分析RASSF2A基因甲基化与大肠癌临床病理特征的相关性.结果 RASSF2A基因甲基化在大肠癌组织及正常组织中分别为83.78％ （93/111）和7.21％ （8/111）,差异有统计学意义（x2=131.245,P＜0.001）.RASFF2A基因甲基化与大肠癌组织学分类（x2=3.554,P=0.314）、Duke分期（x2 =3.217,P =0.359）以及肿瘤部位（x2=1.060,P=0.303）无明显相关性.结论 大肠癌中存在RASSF2A的过甲基化,可能与大肠癌的发生有关.

RASSF2A基因启动子甲基化在上皮性卵巢癌早期诊断中的意义

目的：探讨上皮性卵巢癌组织及血清标本中RASSF2A基因启动子甲基化状态及其对卵巢癌诊断的意义。方法以60例上皮性卵巢癌、20例良性上皮性卵巢肿瘤患者肿瘤组织、10例正常卵巢组织及各组相对应的血清标本为研究对象，采用甲基化特异性PCR法检测RASSF2A基因启动子甲基化状态。结果 RASSF2A基因启动子甲基化率在卵巢癌的组织和血清中分别为58.3%（35／60）、43.3%（26／60），而在良性卵巢肿瘤组及正常卵巢组中均无甲基化，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。血清标本中RASSF2A基因启动子甲基化状态与组织标本中甲基化水平呈正相关（r=0.739，P=0.000）。组织和血清RASSF2A基因启动子甲基化水平与临床病理参数之间均无相关性（P〉0.05）。结论 RASSF2A基因启动子高甲基化是卵巢癌的早期、频发事件。血清标本中RASSF2A基因启动子甲基化检测可能有助于卵巢癌的早期诊断。

RASSF2A基因甲基化在喉癌组织中的表达及意义

目的探讨抑癌基因RASSF2A表达水平及其基因异常甲基化与喉癌的关系及意义。方法采用RT-PCR及甲基化特异性PCR(MSP)检测50例喉癌组织(实验组)和10例癌旁正常黏膜组织(对照组)中RASSF2A基因mRNA的表达水平及其启动子甲基化状态。结果喉癌组织中有54%(27/50)存在RASSF2A基因启动子,而对照组正常黏膜组织中未发现RASSF2A基因甲基化现象,差异有统计学意义(χ~2=9.818,P=0.002)。RASSF2A甲基化水平程度与喉癌患者临床病理特征无明显相关性。喉癌组织中RASSF2A基因mRNA的表达水平明显低于正常黏膜组织(χ~2=9.818,P=0.002)。RASSF2A基因甲基化的喉癌组织中其mRNA的表达减少,反之亦然。结论喉癌组织中RASSF2A基因Cp G岛甲基化与其基因表达缺失有关,可能参与了喉癌的发生发展过程。

散发性结直肠癌患者血RASSF2和sFRP1启动子区甲基化检测

目的检测散发性结直肠癌患者血清RASSF2和sFRP1启动子区甲基化情况．从而为散发性结直肠癌的早期筛查提供参考。方法使用甲基化特异性PCR检测59例散发性直结肠癌患者和59例健康对照血清sFRP1和RASSF2基因启动子区甲基化的情况，并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果59例结直肠癌患者中RASSF2和sFRP1甲基化者分别为16例（27．1％）和18例（30．5％）；而59例健康对照无一例发现RASSF2或sFRP1基因甲基化，差异有统计学意义（均P〈0．01）。29例（49．2％）结直肠癌患者有至少1个基因甲基化，其甲基化率明显高于RASSF2和sFRP1单-基因甲基化率（均P〈0．05）。结直肠癌患者血清RASSF2和sFRP1基因甲基化率与结直肠癌临床病理特征均无明显关系（均P〉0．05）。结论血清RASSF2和sFRP1基因启动子区甲基化水平在结直肠癌组织异常升高，联合两基因的血清甲基化检测可为散发性结直肠癌的早期筛查提供参考。

RASSF2A基因启动子甲基化在宫颈癌组织中的表达及临床监测价值

目的探讨RASSF2A基因启动子甲基化在宫颈癌组织中的表达及临床监测价值。方法选取2012年1月-2013年1月淮安市洪泽区人民医院收治的宫颈癌患者标本60例,对比RASSF2A启动子甲基化在不同分期及组织学类型患者中的阳性率情况。结果临床上Ⅲ~Ⅳ期患者的宫颈癌组织当中,RASSF2A的甲基化率显著高于Ⅰ期患者(P<0.05),Ⅰ期患者与Ⅱ期患者之间、Ⅱ期患者与Ⅲ~Ⅳ期患者之间的RASSF2A甲基化差异均无统计学意义(均P>0.05);宫颈鳞癌患者RASSF2A甲基化明显高于宫颈腺癌患者(P<0.05);免疫组织染色结果显示,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期,RASSF2A的阳性表达逐渐下降,3组患者比较差异均有统计学意义(P<0.05)。宫颈鳞癌患者RASSF2A阳性率明显低于宫颈腺癌患者阳性表达率(P<0.05);结论RASSF2A甲基化同宫颈癌发生存在联系,并多见于宫颈鳞癌组织当中,RASSF2A甲基化同宫颈癌细胞转移以及浸润相关。

宫颈癌患者血清RASSF2A启动子甲基化检测意义

目的宫颈癌前病变进展为宫颈癌不仅在于高危型HPV持续感染,而且取决于抑癌基因CpG岛的高度甲基化。RAS相关结构域蛋白2A基因(RAS associated domain family 2Agene,RASSF2A)启动子甲基化可引起基因失活和转录抑制,导致肿瘤发生。本研究探讨了宫颈癌患者血清中RASSF2A启动子甲基化水平检测的意义及其对宫颈癌的诊断价值。方法收集2015-05-01-2016-09-30三峡大学人民医院妇科收治的宫颈癌患者57例和同期40名健康妇女(对照组)的血清,采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测各组患者血清RASSF2A甲基化水平,并分析其与临床病理特征的关系。结果宫颈癌患者血清RASSF2A基因甲基启动子甲基化阳性率为36.84%(21/57),明显高于正常对照组,差异有统计学意义,χ~2=18.809,P<0.001。宫颈癌患者血清RASSF2A基因启动子甲基化率与患者临床分期(P=0.011)、淋巴结转移(P=0.006)之间差异有统计学意义,与年龄(P=0.520)、病理类型(P=0.175)差异无统计学意义。结论血清RASSF2A基因启动子的甲基化为宫颈癌的早期事件,参与了宫颈癌的发生发展。