RASSF7表达与乳腺癌上皮-间质转化的关系

目的探讨RASSF7在乳腺癌中的表达及与乳腺癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法采用免疫组化法检测80对乳腺癌及癌旁正常乳腺组织中RASSF7的表达,分析RASSF7表达与乳腺癌临床病理特征的关系。采用Western blot法检测8对新鲜乳腺癌及癌旁正常乳腺组织中RASSF7的表达。Western blot法检测在低氧条件下MDA-MB-231细胞中RASSF7、HIF-1α、EMT相关标志蛋白(E-cadherin、vimentin和N-cadherin)的表达水平。进一步分析乳腺癌组织中RASSF7的表达与HIF-1α及EMT相关标志蛋白(E-cadherin、vimentin和N-cadherin)表达的相关性。结果乳腺癌组织中RASSF7的阳性率(70.0%,56/80)明显高于癌旁正常乳腺组织(27.5%,22/80)(P<0.05),Western blot法结果亦证实,乳腺癌组织中RASSF7蛋白表达高于癌旁正常乳腺组织。RASSF7表达与乳腺癌淋巴结转移和TNM分期呈正相关(P=0.002,P=0.027)。低氧组RASSF7、HIF-1α、vimentin和N-cadherin的蛋白表达水平高于常氧组,E-cadherin在低氧组表达低于常氧组。进一步统计分析结果表明,乳腺癌组织中RASSF7表达与HIF-1α、vimentin和N-cadherin表达呈正相关(r=0.245,P=0.029;r=0.237,P=0.034;r=0.301,P=0.007),与E-cadherin的表达呈负相关(r=-0.33,P=0.003)。结论低氧环境下RASSF7可能通过引起乳腺癌EMT,促进乳腺癌的侵袭、转移。

结直肠癌中RASSF7表达及其对结直肠癌细胞生物学特性的影响

目的探讨Ras相关结构域家族成员7(Ras-association domain family 7,RASSF7)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中的表达及对CRC细胞系生物学特性的影响。方法应用免疫组化法检测RASSF7在80例CRC组织中的表达,并分析其与各临床病理特征的关系;Western blot实验检测RASSF7在CRC细胞系中的表达,选出RASSF7高、低表达的CRC细胞株各一种,应用RASSF7过表达质粒和敲除质粒瞬时转染CRC细胞,MTT和Transwell实验分别检测RASSF7对CRC细胞增殖及侵袭的影响。结果免疫组化结果显示:CRC组织中RASSF7高表达50例,低表达30例,CRC组织中RASSF7表达明显高于癌旁正常组织,RASSF7高表达与患者年龄(P=0.238)、性别(P=0.065)及肿瘤分化程度(P=0.238)无关,而与TNM分期(P<0.001)及淋巴结转移(P=0.030)相关;RASSF7过表达可促进CRC细胞的增殖及侵袭能力(P<0.01),而敲除RASSF7则作用相反(P<0.01)。结论RASSF7在CRC中可能发挥促癌基因的作用,其高表达可显著促进CRC细胞的增殖及侵袭能力。

Ras相关区域家族7基因在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:检测人食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中Ras相关区域家族7(Ras-association domain family 7,RASSF7)基因的mRNA、蛋白表达情况及其甲基化状态,探究RASSF7在ESCC发生发展中的作用。方法:组织标本取自河北医科大学第四医院2011—2012年间手术切除的69例ESCC原发灶组织及癌旁组织。分别应用RT-PCR及甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycitydine,5-Aza-dC)处理前后的4株食管癌细胞系(TE13、T.Tn、YES-2、Ec109)和69例病灶组织及其癌旁组织中RASSF7 mRNA表达水平及甲基化状态,应用免疫组织化学方法检测69例ESCC组织及相应癌旁组织中RASSF7的蛋白表达。结果:RASSF7基因在TE13、T.Tn、YES-2细胞系中表达阳性,在Ec109细胞系中表达缺失;经5-Aza-dC处理后,RASSF7在TE13、T.Tn、YES-2细胞中表达下调,在Ec109细胞中表达阳性。5-Aza-dC处理前后4株食管癌细胞系中均未检测到RASSF7的甲基化。人ESCC组织中RASSF7的mRNA相对表达量(0.63±0.08 vs 0.42±0.20,P<0.01)与蛋白表达阳性率[81.2%(56/69)vs 53.6%(37/69),P<0.01]均显著高于相应癌旁组织,且均与患者的淋巴结转移情况及分化程度有关(P<0.05或P<0.01),与TNM分期、年龄和性别无关(均P>0.05)。ESCC组织和相应癌旁组织中均未检测到RASSF7的甲基化。结论:4株食管癌细胞系、人ESCC组织和癌旁组织中RASSF7基因的表达差异与RASSF7本身甲基化状态无关,ESCC组织中RASSF7的高表达可能参与了ESCC的发生及转移。