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Characteristics of photosynthesis in rice plants transformed with an antisense Rubisco activase gene 被引量:2
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作者 金松恒 蒋德安 +1 位作者 李雪芹 孙骏威 《Journal of Zhejiang University Science》 EI CSCD 2004年第8期897-899,共3页
Transgenic rice plants with an antisense gene inserted via Agrobacterium tumefaciens were used to explore the impact of the reduction of Rubisco activase (RCA) on Rubisco and photosynthesis. In this study, transforma... Transgenic rice plants with an antisense gene inserted via Agrobacterium tumefaciens were used to explore the impact of the reduction of Rubisco activase (RCA) on Rubisco and photosynthesis. In this study, transformants containing 15% to 35% wild type Rubisco activase were selected, which could survive in ambient CO2 concentration but grew slowly compared with wild type controls. Gas exchange measurements indicated that the rate of photosynthesis decreased sig- nificantly, while stomatal conductance and transpiration rate did not change; and that the intercellular CO2 concentration even increased. Rubisco determination showed that these plants had approximately twice as much Rubisco as the wild types, although they showed 70% lower rate of photosynthesis, which was likely an acclimation response to the reduction in Rubsico activase and/or the reduction in carbamylation. 展开更多
关键词 Antisense rca rice plants rubisco rubisco activase PHOTOSYNTHESIS
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钾元素对植物光合速率、Rubisco和RCA的影响 被引量:81
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作者 郑炳松 程晓建 +1 位作者 蒋德安 翁晓燕 《浙江林学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期104-108,共5页
钾离子可提高叶肉细胞渗透势 ,增加植物叶片水势 ,减少气孔阻力 ,增多叶绿体内基粒 ,促进光合电子传递及光合磷酸化 ,提高光合关键酶二磷酸核酮糖羧化酶 /加氧酶(Rubisco)和Rubisco活化酶 (RCA)的含量和活性 ,明显降低量子需要量 ,提高... 钾离子可提高叶肉细胞渗透势 ,增加植物叶片水势 ,减少气孔阻力 ,增多叶绿体内基粒 ,促进光合电子传递及光合磷酸化 ,提高光合关键酶二磷酸核酮糖羧化酶 /加氧酶(Rubisco)和Rubisco活化酶 (RCA)的含量和活性 ,明显降低量子需要量 ,提高光合速率。Rubisco是光合速率的关键酶 ,RCA对Rubisco活性有重要的调节作用。低钾主要导致Rubisco及RCA含量均降低 ,限制了体内Rubisco的活化和Rubisco总活性 ,降低了Rubisco的初始活性 ,使CO2 固定作用低于Rubisco的最大能力 ,制约了光合速率和生物产量的提高。同时钾离子对Rubisco和RCA没有直接的活化作用。参 5 展开更多
关键词 钾元素 rubisco rca 光合速率 植物
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玉米Rubisco活化酶基因ZmRCA1的序列变异分析 被引量:6
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作者 谭贤杰 宋燕春 +4 位作者 石云素 程伟东 吴子恺 王天宇 黎裕 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期58-66,共9页
Rubisco活化酶(RCA)是一种可激活光合作用关键酶Rubisco的伴侣蛋白,可通过对Rubisco的活性调节决定植物的碳同化效率。为了研究玉米ZmRCA1的多态性,参考GenBank中编码玉米Rubisco活化酶的ZmRCA1基因组序列设计引物对玉米微核心种质的95... Rubisco活化酶(RCA)是一种可激活光合作用关键酶Rubisco的伴侣蛋白,可通过对Rubisco的活性调节决定植物的碳同化效率。为了研究玉米ZmRCA1的多态性,参考GenBank中编码玉米Rubisco活化酶的ZmRCA1基因组序列设计引物对玉米微核心种质的95份自交系的ZmRCA1进行测序,获得长约1 680 bp的基因组序列。多态分析表明,在1 680 bp的区间内共发现22个SNP和8个InDel,其中5个SNP和1个InDel变异产生氨基酸序列改变;频率在0.1以上的13个多态性位点共形成27种单倍型,利用6个多态性位点就可以分辨约90%的单倍型。ZmRCA1基因具有高度序列保守性,基因DNA序列相似性为97.9%,而氨基酸序列的相似性则达99.8%;中性检验表明,ZmRCA1基因符合中性进化模型假设,没有发生纯化选择。 展开更多
关键词 rubisco活化酶(rca) 单核苷酸多态性(SNP) InDe1 连锁不平衡(LD) 单倍犁 单倍犁标签SNP
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Rubisco和RCA在青菜叶绿体中的分布及病毒侵染对其细胞定位的影响 被引量:4
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作者 洪健 王卫兵 +3 位作者 胡东维 蒋德安 付东亚 陈集双 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2005年第1期29-36,共8页
运用免疫金标电镜术观察了青菜叶细胞中光合作用关键酶Rubisco和Rubisco活化酶(RCA)的细胞化学定位,结果显示Rubisco和RCA免疫金颗粒主要分布于薄壁组织叶绿体的间质中,在基粒片层上很少,表皮的气孔保卫细胞和维管束薄壁细胞叶绿体内也... 运用免疫金标电镜术观察了青菜叶细胞中光合作用关键酶Rubisco和Rubisco活化酶(RCA)的细胞化学定位,结果显示Rubisco和RCA免疫金颗粒主要分布于薄壁组织叶绿体的间质中,在基粒片层上很少,表皮的气孔保卫细胞和维管束薄壁细胞叶绿体内也有分布,在细胞质及线粒体等细胞器中无特异性分布。同时比较观察了感染芜菁花叶病毒(TuMV)的青菜叶绿体Rubisco和RCA免疫金标记结果,发现病组织中结构尚完整的叶绿体Rubisco和RCA标记率略有下降,而结构严重破坏的叶绿体中两种酶标记率分别仅为正常叶绿体的58.44%和64.67%,表明病毒侵染可导致Rubisco和RCA含量下降,影响寄主植物的光合作用。 展开更多
关键词 菜叶 叶绿体 青菜 病毒侵染 分布 薄壁细胞 气孔保卫细胞 标记率 rca 间质
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Diurnal Changes of Rubisco and RCA Activities and Their Cellular Localization in Rice 被引量:2
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作者 王妮妍 蒋德安 +2 位作者 洪健 张峰 翁晓燕 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第9期1076-1083,共8页
The cellular localization of Rubisco and Rubisco activase (RCA) in rice (Oryza sativa subsp. indica cv. Zhenong 952) leaf was investigated with immunogold-labeled electron microscope techniques on the basis of determi... The cellular localization of Rubisco and Rubisco activase (RCA) in rice (Oryza sativa subsp. indica cv. Zhenong 952) leaf was investigated with immunogold-labeled electron microscope techniques on the basis of determining the diurnal changes of photosynthetic rate (Pn), Rubisco and RCA activities, and quantifying two enzyme contents in the leaf with immuno-diffusion method in order to understand why RCA activity decreased in the midday when its contents was high. The results showed that Rubisco mainly was located in chloroplast, and RCA were found both in chloroplast and mitochondria. The lowering of Rubisco in chloroplast as well as Rubisco activity at noon could be one of good reasons to explain the photosynthetic midday depression in leaf. The density of RCA in chloroplast reached the maximum at 14:00 and a valley at 11:00. The result much coincided with the activity of RCA in leaf. In mitochondria, the density of RCA changed abruptly in one day with the highest at 13:00 and it can well elucidate why the activities of Rubisco declined at noon when its amount was increasing. Therefore the cellular localization and/or distribution of Rubisco and RCA during a day is more important for Pn, Rubisco and RCA activities. 展开更多
关键词 diurnal changes rubisco rubisco activase LOCATION CHLOROPLAST MITOCHONDRIA
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彩叶草Rubisco活化酶基因SsRCA的分子特征及其表达模式 被引量:5
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作者 祝钦泷 谢先荣 +1 位作者 眭顺照 李名扬 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1097-1104,共8页
为研究观赏植物彩叶草的光合特性,根据Rubisco活化酶(RCA)的保守区域简并扩增获得的保守片段,采用RACE方法,克隆了RCA全长cDNA,命名为SsRCA(GenBank登录号FJ787730)。SsRCAcDNA全长1 548bp,包含1个1 311bp的ORF框,编码436个氨基酸的前... 为研究观赏植物彩叶草的光合特性,根据Rubisco活化酶(RCA)的保守区域简并扩增获得的保守片段,采用RACE方法,克隆了RCA全长cDNA,命名为SsRCA(GenBank登录号FJ787730)。SsRCAcDNA全长1 548bp,包含1个1 311bp的ORF框,编码436个氨基酸的前体蛋白。其5-′UTR区含有1个终止子TAA,3-′UTR区具有2个mRNA非稳定性相关的DST-like元件和推测的加尾信号AATAAA。SsRCA蛋白具有定位于叶绿体的N端转运肽,具有2个保守的ATP-binding结构域、1个sensor 2基序和多个磷酸化位点。多序列比对和系统进化分析表明,SsRCA与其他植物的RCA蛋白具有较高的一致性,属于RCA的β亚基。表达分析表明,SsRCA基因在含有绿色组织的茎、叶和萼片表达。在9 h黑暗和15 h光照的光周期处理中,正午时表达量最高,午夜时表达量最低,具有明显的光诱导表达特性。 展开更多
关键词 彩叶草 rubisco活化酶 分子特征 表达模式
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一氧化氮对高温与干旱复合胁迫下小麦叶片Rca基因表达及Rubisco活性的影响 被引量:8
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作者 杜兴良 兰盼龙 +4 位作者 张皓帆 赵光伟 李华 汪月霞 赵会杰 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期868-873,共6页
以小麦(Triticum aestivum L.)品种豫麦49为材料,研究了高温、干旱及高温干旱复合胁迫对小麦叶片Ru BP羧化酶(Rubisco)、Rubisco活化酶(RCA)活性及Rubisco活化酶基因(Rca)表达的影响及外源一氧化氮(NO)的调节效应。结果表明,干旱和高温... 以小麦(Triticum aestivum L.)品种豫麦49为材料,研究了高温、干旱及高温干旱复合胁迫对小麦叶片Ru BP羧化酶(Rubisco)、Rubisco活化酶(RCA)活性及Rubisco活化酶基因(Rca)表达的影响及外源一氧化氮(NO)的调节效应。结果表明,干旱和高温干旱复合胁迫导致小麦叶片的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性降低,而高温胁迫下SOD和CAT活性升高。NO预处理能显著增强干旱及高温干旱复合胁迫下的抗氧化酶活性。编码RCA不同亚基的基因(Rca a和Rca b)对不同逆境胁迫的响应存在差异,干旱、高温和高温干旱复合胁迫导致Rca a基因的表达水平分别降低97%,92.31%和84.93%,Rca b的转录水平则在高温和高温干旱复合胁迫下分别比对照升高了26.14和28.02倍。NO预处理使干旱胁迫下Rca a的表达增加了38.42倍,Rca b的表达增加了32.74倍,使高温干旱复合胁迫下Rca b的表达水平提高了30.39%。遭受干旱、高温及二者复合胁迫后,小麦叶片的RCA活性、Rubisco初始活性、总活性以及Rubisco活化状态明显下降,而采用NO预处理不同程度地提高了干旱、高温及高温干旱复合胁迫下小麦叶片的RCA活性及Rubisco酶的初始活性、总活性与活化状态,使其在逆境下保持较高的叶绿素含量(SPAD值)和光合速率。总之,NO能够通过增强抗氧化酶活性和调节Rca基因表达,提高RCA和Rubisco活性,缓解高温干旱复合胁迫对小麦叶片的光合作用的损伤。 展开更多
关键词 小麦 高温干旱复合胁迫 rubisco活化酶 基因表达 NO调节效应
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黄瓜幼苗Rubisco与Rubisco活化酶对光强的响应 被引量:7
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作者 姜振升 刘培培 +2 位作者 王美玲 毕焕改 艾希珍 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期95-99,共5页
以津优3号幼苗为试材,研究弱光(LL:100μmol.m-2.s-1)、亚弱光(SL:300μmol.m-2.s-1)下黄瓜幼苗光合速率(Pn)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)、Rubisco活化酶(RCA)活性及其基因表达量的变化。结果表明,11 d弱光处理后,黄瓜幼... 以津优3号幼苗为试材,研究弱光(LL:100μmol.m-2.s-1)、亚弱光(SL:300μmol.m-2.s-1)下黄瓜幼苗光合速率(Pn)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)、Rubisco活化酶(RCA)活性及其基因表达量的变化。结果表明,11 d弱光处理后,黄瓜幼苗叶片的Pn、Rubisco初始活性、总活性及RCA活性均显著降低,亚弱光处理的Pn也明显降低,但其Rubisco初始活性和总活性与CK差异不显著。弱光和亚弱光处理的rbcS相对表达量有所降低,而rbcL和CsRCA相对表达量明显增加。说明弱光下Rubisco和RCA活性降低是引起Pn降低的重要原因之一,但当光强达到300μmol.m-2.s-1时,Rubisco和RCA活性与Pn相关性不明显。较长时间的弱光处理后,Pn的降低与rbcS相对表达量减小有关,而rbcL和CsRCA的表达量增加可在一定程度上弥补Rubisco和RCA活性降低引起的光合速率下降。 展开更多
关键词 黄瓜 核酮糖-1 5-二磷酸羧化/加氧酶(rubisco) rubisco活化酶(rca) 基因表达 弱光 亚弱光
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小麦Rubisco活化酶的纯化及其活性特性 被引量:30
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作者 李卫芳 王忠 +1 位作者 韩鹰 顾蕴洁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期929-933,共5页
试验以小麦为材料 ,纯化了Rubisco活化酶 ,经SDS 聚丙烯凝胶电泳鉴定呈 2条蛋白质谱带 ,分子量为410 0 0和 45 0 0 0 ,利用14 C标记法测定并探讨了Rubisco活化酶的活性 ,并发现Rubisco活化酶在纯化和储藏过程中都需要ATP以稳定其活性。
关键词 小麦 rubisco活化酶 纯化 活性
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条浒苔蛋白核超微结构和Rubisco及其活化酶分子定位 被引量:10
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作者 何培民 吴庆磊 +4 位作者 吴维宁 陆巍 张大兵 陈根云 张荣铣 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期255-260,共6页
研究了条浒苔蛋白核超微结构及其Rubisco和Rubisco活化酶金相免疫分子定位。超微结构显示,条浒苔细胞具有形态及组成相同的1~2个蛋白核,每个蛋白核被淀粉鞘所包围。蛋白核中央均有1条由1个类囊体构成的纵向孔道,并有时局部特别膨大。... 研究了条浒苔蛋白核超微结构及其Rubisco和Rubisco活化酶金相免疫分子定位。超微结构显示,条浒苔细胞具有形态及组成相同的1~2个蛋白核,每个蛋白核被淀粉鞘所包围。蛋白核中央均有1条由1个类囊体构成的纵向孔道,并有时局部特别膨大。纵向孔道两端与叶绿体基质相连接。小球藻Rubisco抗体对条浒苔Rubisco的Western印迹图谱显示仅为1条带,其位置与SDS-PAGE电泳图谱上的主带相对应,分子量大约为55kD。金相免疫分子定位的结果显示,条浒苔Rubisco金标颗粒主要分布于叶绿体的蛋白核(71.86%)和淀粉鞘(27.94%)部位中,按面积密度计算二者总和占99.8%,极少分布在叶绿体类囊体和基质中(0.2%)。Rubisco活化酶分子定位也显示其主要分布于蛋白核和淀粉鞘中。这些结果均表明条浒苔蛋白核(及淀粉鞘)与单细胞绿藻的蛋白核相同,具有光合作用功能。条浒苔Rubisco初始活性和总活性的测定结果表明,其活化率较高,高达77.62%。 展开更多
关键词 条浒苔 蛋白核 超微结构 rubisco rubisco活化酶 金相免疫分子定位
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水稻剑叶衰老期Rubisco活化酶对Rubisco活力和光合速率的调节(英文) 被引量:14
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作者 蒋德安 陆庆 +2 位作者 翁晓燕 郑炳松 奚海福 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期119-124,共6页
为明确 Rubisco活化酶在叶片衰老期间是否对 Rubisco羧化活性和光合速率起调节作用 ,本文研究了水稻剑叶衰老过程中叶片光合速率、可溶性蛋白含量、Rubisco初始羧化活力及含量 ,Rubisco活化酶活力及含量 .结果表明 :净光合速率与 Rubisc... 为明确 Rubisco活化酶在叶片衰老期间是否对 Rubisco羧化活性和光合速率起调节作用 ,本文研究了水稻剑叶衰老过程中叶片光合速率、可溶性蛋白含量、Rubisco初始羧化活力及含量 ,Rubisco活化酶活力及含量 .结果表明 :净光合速率与 Rubisco初始羧化活力和 Rubisco活化酶的活力间分别为 r2=0 .9663和 r2 =0 .70 2 ,Rubisco初始羧化活力与 Rubisco活化酶的活力和含量间分别为 r2 =0 .81 0 3和r2 =0 .81 4 3 ,Rubisco活化酶含量与 Rubisco和可溶性蛋白间分别为 r2 =0 .92 57和 0 .8675,Rubisco活化酶的活力与含量间 r2 =0 .7587.Rubisco活化酶的含量占 Rubisco含量的 0 .5%~ 1 .0 % ,占叶片可溶性总蛋白质的 0 .5%~ 0 .6% ,随着剑叶衰老 Rubisco活化酶所占的比值加速下降 .这表明水稻剑叶衰老期间 ,Rubisco活化酶对维持 Rubisco初始羧化活力和净光合速率有重要调节作用 . 展开更多
关键词 水稻 叶片衰老 光合作用 rubisco活化酶
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RubisCO的分子生物学研究 被引量:13
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作者 董晓丽 周集体 +1 位作者 杜翠红 严滨 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第12期95-97,共3页
RubisCO是卡尔文循环的关键酶 ,它既参与光合作用又参与光呼吸作用 ,调节两者之间的关系 ,是所有光合生物进行光合碳同化的关键性酶。光合生物每年约固定 5×10 14 kgCO2 ,成功固定二氧化碳既可降低温室效应 ,又可充分利用碳资源。... RubisCO是卡尔文循环的关键酶 ,它既参与光合作用又参与光呼吸作用 ,调节两者之间的关系 ,是所有光合生物进行光合碳同化的关键性酶。光合生物每年约固定 5×10 14 kgCO2 ,成功固定二氧化碳既可降低温室效应 ,又可充分利用碳资源。同时 ,RubisCO酶活性的高低直接影响植物的净光合产量。RubisCO本身是植物可溶性蛋白中含量最高的蛋白 ,是植物体内重要的储藏蛋白。本文对RubisCO的分子生物学研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 rubisco 光合生物 光合碳同化 光合作用 分子生物学 1 5-二磷酸核酮糠羧化/加氧酶 活性
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水稻Rubisco及其活化酶的免疫金标定位 被引量:4
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作者 王妮妍 蒋德安 +2 位作者 张峰 洪健 费万辛 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期387-391,共5页
采用免疫胶体金标记电镜技术对水稻叶片中的Rubisco及其活化酶进行细胞器定位,结果表明Rubisco主要分布于叶绿体,Rubisco活化酶特异性分布于叶绿体和线粒体中,预示Rubisco活化酶可能具有除活化钝化态Rubisco以外的其他功能.
关键词 水稻 rubisco rubisco活化酶 免疫胶体金标记电镜技术 细胞器 定位 叶绿体 线粒体 光合作用
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小麦旗叶Rubisco和Rubisco活化酶与光合作用日变化的关系 被引量:16
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作者 李卫芳 王秀海 王忠 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期30-34,共5页
Rub isco是植物光合作用中的关键酶,其体内活性由Rub isco活化酶调节。研究了小麦旗叶的光合速率与Rub isco和Rub isco活化酶之间的相关性。结果表明,小麦旗叶的光合速率和Rub isco初始活力、Rub isco活化酶活力都存在着明显的日变化;... Rub isco是植物光合作用中的关键酶,其体内活性由Rub isco活化酶调节。研究了小麦旗叶的光合速率与Rub isco和Rub isco活化酶之间的相关性。结果表明,小麦旗叶的光合速率和Rub isco初始活力、Rub isco活化酶活力都存在着明显的日变化;小麦旗叶的光合速率主要取决于Rub isco的初始活力,即Rub isco被Rub isco活化酶活化的程度,而与Rub isco和Rub isco活化酶本身的含量关系不大。 展开更多
关键词 光合速率 日变化 rubisco rubisco活化酶
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小麦Rubisco活化酶基因的克隆和表达特性 被引量:16
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作者 张国 李滨 邹琦 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2005年第3期313-319,共7页
Rubisco活化酶是广泛存在于光合生物中调节Rubisco活性的酶,我们利用PCR技术,从小麦(Triticumaestivum)叶片cDNA文库中克隆得到Rubisco活化酶基因cDNA片段,该片段长度为850bp,编码201个氨基酸。Northernblot表明,小麦叶片在暗诱导衰老... Rubisco活化酶是广泛存在于光合生物中调节Rubisco活性的酶,我们利用PCR技术,从小麦(Triticumaestivum)叶片cDNA文库中克隆得到Rubisco活化酶基因cDNA片段,该片段长度为850bp,编码201个氨基酸。Northernblot表明,小麦叶片在暗诱导衰老的条件下,叶片中活化酶基因表达水平逐渐下降;同时,小麦叶片的光合特性、叶绿素含量和Rubisco活性呈现下降趋势。这些结果表明,衰老时小麦叶片Rubisco活化酶基因表达水平下降与光合速率下降密切相关。 展开更多
关键词 酶基因 rubisco活化酶 表达特性 rubisco活性 克隆 Northern 基因表达水平 CDNA片段 CDNA文库 小麦叶片 PcR技术 叶绿素含量 光合生物 片段长度 BLOT 光合特性 光合速率 下降 氨基酸 衰老
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Rubisco活化酶基因反义表达载体的构建与水稻的遗传转化 被引量:9
16
作者 金松恒 翁晓燕 +3 位作者 王妮妍 李雪芹 毛伟华 蒋德安 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期881-886,共6页
利用pGEM Teasy、pBluescriptKS +获得了RCA基因两端可以引入与双元表达载体 pCAMBIA130 1多克隆位点相匹配的单酶切位点 ,将该片段连接到 pCAMBIA130 1载体 ,构建了RCA基因的反义植物表达载体 pCAMR0 2。通过电激法将该载体导入根癌农... 利用pGEM Teasy、pBluescriptKS +获得了RCA基因两端可以引入与双元表达载体 pCAMBIA130 1多克隆位点相匹配的单酶切位点 ,将该片段连接到 pCAMBIA130 1载体 ,构建了RCA基因的反义植物表达载体 pCAMR0 2。通过电激法将该载体导入根癌农杆菌EHA10 5菌株中 ,以根癌农杆菌介导的方法 ,将反义载体 pCAMR0 2转化粳稻品种中花 11,获得了抗潮霉素的再生植株 ,经过GUS组织化学检测和PCR鉴定结果表明 ,目的基因确已经整合到这些转基因水稻基因组中。表型测定显示 ,大部分反义水稻不能在大气CO2 浓度条件下生长 ,存活下来转化株也是生长缓慢 ,植株瘦小 ,RCA和Rubisco含量发生了明显改变 。 展开更多
关键词 水稻 rubisco活化酶 反义 载体构建 遗传转化
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棉花光合基因GhRCAα启动子的克隆及活性分析 被引量:2
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作者 晁毛妮 张志勇 +4 位作者 张金宝 温青玉 郭书磊 马亮 王清连 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期21-28,共8页
为了克隆棉花Rubisco活化酶基因(RCA)启动子,研究其表达调控的分子机制,以百棉1号为材料,对GhRCAα启动子区2 000 bp的片段进行克隆、顺式作用元件分析以及活性分析,结果表明,许多重要的顺式作用元件包括响应于光、生物钟、逆境胁迫、... 为了克隆棉花Rubisco活化酶基因(RCA)启动子,研究其表达调控的分子机制,以百棉1号为材料,对GhRCAα启动子区2 000 bp的片段进行克隆、顺式作用元件分析以及活性分析,结果表明,许多重要的顺式作用元件包括响应于光、生物钟、逆境胁迫、植物激素以及其他的基本顺式作用元件特异地存在于GhRCAα启动子区;进一步对GhRCAα进行表达特性分析发现,该基因在光合作用进行的主要位置叶片中表达量最高,在其他组织表达量很低,其表达具有组织特异性,这与该启动子区存在许多光响应及组织特异性表达相关元件的结果相一致;将克隆的GhRCAα启动子片段以烟草叶片为受体材料进行瞬时表达分析表明,GhRCAα启动子可以驱动GUS基因的表达,表明克隆的启动子片段具有驱动目标基因表达的活性。克隆的GhRCAα启动子可能是一种组织特异型启动子,有望用于植物的遗传转化,进而更好地调控重要基因的特异性表达。 展开更多
关键词 rubisco活化酶(rca) 启动子 顺式作用元件 光合作用 活性分析 棉花
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毛果杨Rubisco活化酶基因的克隆与功能分析 被引量:7
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作者 尹吴 孙伟博 +1 位作者 周燕 诸葛强 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第4期83-95,共13页
【目的】核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶(Rubisco)是参与植物光合作用的第1步碳同化的关键酶,而Rubisco活化酶(RCA)能够使Rubisco处于稳定的催化活性状态,从而提高光合效率。本研究从毛果杨中克隆RCA基因并通过遗传转化南林895杨,获得PtRCA高... 【目的】核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶(Rubisco)是参与植物光合作用的第1步碳同化的关键酶,而Rubisco活化酶(RCA)能够使Rubisco处于稳定的催化活性状态,从而提高光合效率。本研究从毛果杨中克隆RCA基因并通过遗传转化南林895杨,获得PtRCA高表达的转基因株系,并进行分子检测及相关功能分析,为培育杨树新型高光效抗逆品种提供依据。【方法】基于毛果杨基因组数据库信息克隆PtRCA基因序列,利用生物信息学对PtRCA基因进行功能和结构分析。采用Gateway技术将PtRCA构建到植物表达载体pGWB406中,以南林895杨为受体材料,通过农杆菌介导法进行遗传转化。以转PtRCA基因南林895杨和对照(南林895杨)为材料,测定分析在高温胁迫下转基因植株的基因表达、光合参数和叶绿素荧光参数的差异。【结果】从毛果杨中克隆获得PtRCA的CDS序列长1 323 bp,编码440个氨基酸残基,其蛋白相对分子质量为48 315.9 Da,等电点pI为5.57,为疏水性蛋白,无信号肽以及跨膜结构;通过序列对比,发现PtRCA属AAA+超级家族一员,且与大豆、拟南芥RCA蛋白同源性较高。转PtRCA基因南林895杨RCA表达量均高于对照,且能够利用强光充分进行光合作用,其光饱和点也均高于对照,增加约12.5%~37.5%;光补偿点除3号株系外,其他转基因株系均略低于对照;转基因植株在光饱和点的光合速率比对照增高24.6%~55.7%。转基因株系对CO_2的利用能力和羧化效率均强于对照组,CO_2饱和点除1号和4号株系外,其他株系均比对照低12.5%~25.0%;CO_2补偿点比对照降低53.1%~80.4%;光呼吸比对照低37.7%~79.3%,并且转基因杨树在CO_2饱和点的光合速率比对照增高4.4%~26.4%。另外,转基因杨树表现出耐光氧化的能力,光氧化处理后,对照PSⅡ原初光化学效率下降61.7%,而转基因杨树下降45.0%~53.1%;对照PSⅡ实际光化学效率下降54.1%,而转基因杨树下降38.7%~52.0%;光化学猝灭系数对照下降68.3%,而转基因杨树下降51.0%~65.8%;非光化学猝灭系数对照仅增加3.0%,而转基因杨树增加6.0%~26.5%。【结论】杨树Rubisco活化酶(PtRCA)蛋白与大豆、拟南芥RCA蛋白同源性较高。通过实时定量及相关生理分析表明,转PtRCA基因南林895杨具耐高温特性,利用CO_2和强光进行光合作用的能力较强,催化Ru BP进行羧化反应的效率较高。转PtRCA基因杨树能够充分利用吸收的光子,PSⅡ反应中心效率较高,过剩光能量得到较好的耗散,表现出耐光氧化的能力。研究结果表明,PtRCA基因的高效表达提高了转基因植株的光合效率,并对高温高光强具有调节能力。 展开更多
关键词 杨树 rubisco活化酶基因 转基因 光合作用
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Rubisco及其活化酶定位于豌豆和蚕豆叶绿体中 被引量:3
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作者 王卫兵 洪健 +1 位作者 胡东维 蒋德安 《电子显微学报》 CAS CSCD 2005年第2期146-150,共5页
运用免疫金标记电镜技术研究了豆科C3植物豌豆(PisumsativumL.)和蚕豆(ViciafabaL.)叶片中Rubisco及其活化酶(RCA)的细胞定位,结果表明:两种植物叶片解剖结构及叶绿体超微结构相似,叶肉细胞叶绿体具有发达的基粒片层,Rubisco和RCA免疫... 运用免疫金标记电镜技术研究了豆科C3植物豌豆(PisumsativumL.)和蚕豆(ViciafabaL.)叶片中Rubisco及其活化酶(RCA)的细胞定位,结果表明:两种植物叶片解剖结构及叶绿体超微结构相似,叶肉细胞叶绿体具有发达的基粒片层,Rubisco和RCA免疫金标记颗粒主要分布于叶绿体的间质中,在基粒片层上很少,在表皮的气孔保卫细胞叶绿体内也有免疫金颗粒标记,在细胞质、液泡、线粒体等细胞器中无特异性标记。两种植物光合作用关键酶在叶绿体中定位的相似性,体现了C3植物在光合器结构与功能上具有共性。 展开更多
关键词 rubisco 蚕豆 豌豆 酶定位 叶绿体超微结构 免疫金标记 气孔保卫细胞 植物光合作用 C3植物 结构与功能 电镜技术 细胞定位 解剖结构 植物叶片 叶肉细胞 活化酶 rca 细胞质 特异性 细胞器 线粒体 相似性 关键酶 光合器 片层
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大麦和玉米叶片叶绿体中Rubisco及其活化酶的免疫金标记定位 被引量:6
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作者 洪健 王卫兵 +1 位作者 蒋德安 胡东维 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2004年第5期561-568,共8页
运用免疫金标记电镜技术研究了禾本科C_3植物大麦(Hordeum vulgare L.)和C_4植物玉米(Zea mays L.)叶片中Rubisco及其活化酶(RCA)的细胞定位,结果表明:两种植物叶片解剖结构及叶绿体超微结构差别明显。在大麦叶细胞中,只有一种叶肉细胞... 运用免疫金标记电镜技术研究了禾本科C_3植物大麦(Hordeum vulgare L.)和C_4植物玉米(Zea mays L.)叶片中Rubisco及其活化酶(RCA)的细胞定位,结果表明:两种植物叶片解剖结构及叶绿体超微结构差别明显。在大麦叶细胞中,只有一种叶肉细胞叶绿体,Rubisco和RCA主要分布于叶绿体的间质中。在玉米叶细胞中,存在着维管束鞘细胞和叶肉细胞两种类型叶绿体,Rubisco主要分布于鞘细胞叶绿体的基质中,但在叶肉细胞叶绿体中亦有少量特异性标记;RCA在鞘细胞叶绿体和叶肉细胞叶绿体的基质中都有分布。两种植物叶绿体结构及光合作用关键酶定位的不同,体现了C_3植物和C_4植物在光合器结构与功能上的差异。 展开更多
关键词 C3植物 C4植物 叶绿体 rubisco rubisco活化酶 免疫金定位
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